【技术实现步骤摘要】
一种基于Sanger测序法检测人类LTC4S基因突变的方法及其试剂盒
[0001]本专利技术涉及生物
,具体为一种基于
Sanger
测序法检测人类
LTC4S
基因突变的方法及其试剂盒
。
技术介绍
[0002]作为抗血小板治疗的标准药物,阿司匹林的应用非常广泛,可减少高危患者心肌梗死
、
心源性猝死及脑卒中
。
阿司匹林是慢性荨麻疹的诱因之一,研究表明
LTC4S
基因(
c.
‑
444A>C
)与部分患者服用阿司匹林后出现荨麻疹相关,
AC
和
CC
型的携带者提示较高荨麻疹风险
。
[0003]有研究表明,进行相关研究后认为 LTC4S 启动子上的 rs730012 c.
‑
444A>C
多态性与阿司匹林致敏的产生有关联,敏感患者中
C
等位基因频率更高,关联密切度在不同种族 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.
一种基于
Sanger
测序法检测人类
LTC4S
基因突变的方法,其特征在于:包括以下步骤:
S1、DNA
提取,首先通过采样器对对血液基因组
DNA
进行提取,受检样本提取的
DNA
经过
Thermo Scientifi Multiskan go
进行酶标仪浓度和纯度浓度检测,然后再进行
OD
260/280
的吸光光度比值;
S2、
引物设计,然后根据检测位点在基因组位置,在
NCBI
数据库中获取参考序列,对参考序列进行引物设计,引物通过
NCBI
数据库中
Primer
‑
BLAST
功能进行引物特异性验证;
S3、PCR
扩增,引物特异性验证需要对提取的基因组
DNA
进行
PCR
扩增富集
。2.
根据权利要求1所述的一种基于
Sanger
测序法检测人类
LTC4S
基因突变的方法,其特征在于:所述
S1
步骤中
OD
260/280 为
1.8~2.0。3.
根据权利要求1所述的一种基于
Sanger
测序法检测人类
LTC4S
基因突变的方法,其特征在于:所述
S2
步骤参考序列通过
Oligo 7
软件对参考序列进行引物设计,其设计如下;
LTC4S
‑
PCR
‑
F
:
5'CAC...
【专利技术属性】
技术研发人员:赖开生,刘哲,李九翔,江慧,原婉瑜,刘昕超,
申请(专利权)人:百世诺北京医疗科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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