检测大肠杆菌制造技术

本发明专利技术公开了检测大肠杆菌

【技术实现步骤摘要】
检测大肠杆菌O157抗原的杂交瘤细胞及其应用


[0001]本专利技术涉及检测领域，具体涉及检测大肠杆菌
O157
抗原的杂交瘤细胞，还涉及由该杂交瘤细胞分泌的抗体，以及在检测
O157
抗原中的应用
。

技术介绍

[0002]肠出血性大肠埃希菌
(Enterohemorrhagic Escherichia coli
，
EHEC)
感染可引起出血性结肠炎
、
溶血性尿毒综合征和血栓性血小板减少性紫癜等，严重威胁人类健康，其中
O157
：
H7
是最为常见的血清型，具有感染剂量低，感染后病情发展快，疾病致死率较高的特点
。
受动物粪便污染的食物和水是大肠杆菌
O157∶H7
的主要来源，大肠杆菌
O157∶H7
的低剂量和高毒力往往使感染严重，危及生命，特别是对幼儿
、
老年人和免疫系统减弱的人危害严重
。
自
1982
年美国首次被报告后，在加拿大
、
瑞典
、
澳大利亚
、
苏格兰
、
威尔士等国家和地区也相继报道了
EHEC
的散发性感染和暴发流行，在世界范围内得到普遍关注
。
我国自
1986
年首次报告大肠杆菌
O157∶H7
的感染病例以来，已先后有十几个省市发现大肠杆菌
O157∶H7
感染的散发病例，存在潜在的流行的威胁
。
因此建立特异
、
灵敏及快速的
EHEC O157
：
H7
检测方法显得尤为重要
。
[0003]大肠杆菌
O157∶H7
中
O
是指
O
抗原，也就是菌体抗原，指包埋在细菌细胞壁中的脂多糖类；
H
是指
H
抗原，也称之为鞭毛抗原，属于蛋白质类，其结构具有较强免疫能力
。
除常见的两类抗原之外，还有
K
抗原，指荚膜抗原，大部分是多糖；还有
M
抗原，类似于粘蛋白
、
多糖类
。
临床上主要通过这4类不同抗原类型来对大肠杆菌进行血清学分类
。
大肠杆菌
O157
：
H7
检测方法包括传统分离鉴定法
、
分子生物学法和免疫学法等
。
其中免疫学方法具有快速便捷
、
准确可靠的特点，广泛用于各类微生物的检测预防之中
。
要实现对
O157∶H7
的快速准确免疫学检测，就需要高特异
、
高灵敏的单克隆抗体
。
优异的大肠杆菌
O157:H7
单克隆抗体，能够用于
ELISA、
胶体金试纸条
、
化学发光等不同用途的免疫学试验
。
[0004]开发高特异灵敏的
O157∶H7
单克隆抗体，对大肠杆菌
O157∶H7
及时检测和有效预防具有重要意义
。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，本专利技术的目的之一在于提供一种检测大肠杆菌
O157
抗原单克隆抗体杂交瘤细胞
CF6
；本专利技术的目的之二在于提供杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体
CF6
；本专利技术的目的之三在于提供所述单克隆抗体
CF6
在制备检测大肠杆菌
O157
抗原的检测试剂中的应用；本专利技术的目的之四在于提供含有所述单克隆抗体
CF6
的检测试剂
。
[0006]为达到上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
[0007]1、
检测大肠杆菌
O157
抗原单克隆抗体杂交瘤细胞
CF6
，所述杂交瘤细胞保藏编号为
GDMCC No
：
63527
，保藏日期为
2023
年
06
月
06
日，保藏单位为广东省微生物菌种保藏中心
。
[0008]2、
所述杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体
CF6。
[0009]3、
所述单克隆抗体
CF6
在制备检测大肠杆菌
O157
抗原的检测试剂中的应用
。
[0010]本专利技术优选的，所述检测试剂的检测原理为胶体金法
、
免疫荧光层析法
、
酶联免疫法或化学发光法
。
[0011]4、
含有所述单克隆抗体
CF6
的检测试剂
。
[0012]本专利技术优选的，所述检测试剂为
Western Blot
试剂
。
[0013]本专利技术优选的，所述检测试剂包括单克隆抗体
CF6
和
HRP
标记羊抗鼠
IgG。
[0014]本专利技术的有益效果在于：本专利技术公开了检测大肠杆菌
O157
抗原的杂交瘤细胞，还公开了由该杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体
CF6
，分泌的抗体能够用于大肠杆菌
O157
抗原检测，可检测到
O157
血清型大肠杆菌，且对其他非
O157
血清型大肠杆菌和常见菌不呈现交叉反应，特异性好；按1：
1000
稀释，仍能检测到
O157
血清型大肠杆菌，说明抗体
CF6
有良好的检测灵敏度，为大肠杆菌
O157
抗原的检测提供了新的工具
。
[0015]生物材料保藏
[0016]本专利技术的大肠杆菌
O157
抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株
DA3
保藏于广东省微生物菌种保藏中心，地址位于广州市先烈中路
100
号大院
59
号楼5楼广东省科学院微生物研究所，其保藏编号为
GDMCC No
：
63528
，保藏日期为
2023
年
06
月
06
日，分类命名为
BALB/C
小鼠杂交瘤细胞
。
[0017]大肠杆菌
O157
抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株
CF6
进行保藏，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，地址位于广州市先烈中路
100
号大院
59
号楼5楼广东省科学院微生物研究所，其保藏编号为<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
检测大肠杆菌
O157
抗原单克隆抗体杂交瘤细胞
CF6
，其特征在于：所述杂交瘤细胞保藏编号为
GDMCC No
：
63527
，保藏日期为
2023
年
06
月
06
日，保藏单位为广东省微生物菌种保藏中心
。2.
权利要求1所述杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体
CF6。3.
权利要求2所述单克隆抗体
CF6
在制备检测大肠杆菌
O157
抗原检测试剂中的应用
...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑建，张娟，国锦琳，袁作为，朱传琳，
申请(专利权)人：重庆市中医院成都中医药大学，
类型：发明
国别省市：