一种高效测定血浆中布洛芬的浓度的方法技术

本发明专利技术公开了一种高效测定血浆中布洛芬的浓度的方法，包括

【技术实现步骤摘要】
一种高效测定血浆中布洛芬的浓度的方法


[0001]本专利技术涉及医学检验
，具体为一种高效测定血浆中布洛芬的浓度的方法
。

技术介绍

[0002]布洛芬是解热镇痛药物，非甾体抗炎药，其化学名称2‑
甲基
‑4‑
(2
‑
甲基丙基
)
苯乙酸，分子式：
C13H18O2
，分子量：
206.29
，用于普通感冒或流行性感冒引起的发热即其通过下丘脑体温调节中枢，达到解热的作用，可以通过抑制环氧化酶，减少前列腺素的合成，达到镇痛和抗炎作用，同时也可用于风湿，类风湿性关节炎，值得特别说明是是布洛芬是世界卫生组织
、
美国
FDA
唯一共同推荐的儿童退烧药，是公认的儿童首选抗炎药，因此布洛芬的使用特别广泛，因此对布洛芬的研究具有重要意义，而在对血液进行检测时需要对血浆中布洛芬浓度数据的测定
。
经检索，发现现有技术中的血浆中布洛芬浓度的检测方法典型的如公开号
CN112433018A
一种血浆中布洛芬含量的检测方法，包括溶液配制
、
预处理
、
浓度测定和
、
定量分析四个步骤，在定量分析中，设置流动相
A
为含
2mmol/L
甲酸铵水溶液，并匹配相应的色谱梯度为：
0.01
到
0.2s
，流动相
B
由
25
％到
95
％，
0.20
到
2.00s
，流动相
B
为
95
％，
2.00
到
2.10s
，流动相
B
由
95
％到
25
％，
2.10
到
2.80s
，平衡流动相并停止
。
本专利技术通过四个步骤，可使布洛芬的液质信号的出峰时间适中，峰型良好，响应强，从而更准确地确定血浆中布洛芬的浓度；还可以排出基质效应对实验数据造成的干扰；同时本专利技术的预处理过程简单，可批量处理血浆样品
。
其主要特点是操作简便
。
[0003]例如公开号为
CN111157639A
一种高效液相质谱法测定大鼠血浆中布洛芬的浓度的方法，包括以下步骤：制备校正标示样
、
质控样品
、
空白样品
、QC0
样品
、ULOQ without IS
样品
、Reagent
样品
、
基质效应样品和回收率样品
。
利用所述校正标示样和所述质控样品制得标准曲线，将待测样品根据所述标准曲线得到待测样品中的布洛芬浓度
。
利用所述空白样品
、
所述
QC0
样品
、
所述
ULOQ without IS
样品和
Reagent
样品用来相互校正，减少干扰性
。
利用所述基质效应样品和所述回收率样品来评价该方法的基质效应和回收率
。
应用
HPLC
‑
MS/MS(
高效液相质谱
)
法同时测量大鼠血浆中布洛芬的浓度，该测试方法具有干扰性小，回收率高的优点
。
[0004]综上所述，现有的血浆中布洛芬浓度的检测方法时直接选取血液样本进行洛芬浓度检测，从而使得检测数据容易受到血浆中其它物质的影响而导致检测数据偏差，针对上述问题，需要对现有设备进行改进
。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种高效测定血浆中布洛芬的浓度的方法，以解决上述
技术介绍
中提出的现有的血浆中布洛芬浓度的检测方法时直接选取血液样本进行洛芬浓度检测，从而使得检测数据容易受到血浆中其它物质的影响而导致检测数据偏差的问题
。
[0006]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种高效测定血浆中布洛芬的浓度
的方法，包括
[0007]S1
溶液配制阶段：
[0008]S11
内标物配制：称取吲哚美辛
,
用乙腈溶解并定容，配制成
1mg/m1
的储备液，精取该溶液用乙腈稀释得
20
μ
g/m1
的内标物；
[0009]S12
标准溶液的配制
:
精密称取布洛芬，用
20
μ
g/m
的内标物溶解并定容，配制成
1280
μ
g/ml
的含内标储备液；
[0010]S2
血浆处理阶段：
[0011]取血浆样品加入内标物搅拌混匀
,
加入乙腈
300
μ
1,
涡旋
、
振荡和离心，然后取上清液进样5μ1；
[0012]S3
色谱图制取阶段：
[0013]S31
取空白血浆
100
μ1，按
S2
操作，得空白血浆色谱图即内部不含布洛芬的血浆；
[0014]S32
将含内标的标准溶液进样
,
得标准液及内标的色谱图；
[0015]S33
将空白血浆加入含内标的布洛芬标准液，按
S2
操作，得空白血浆加入布洛芬及内标的色谱图；
[0016]S4
曲线绘制阶段：
[0017]采用加权
(1/c2)
最小二乘法进行回归运算计算出布洛芬的浓度
。
[0018]优选的，所述
S12
标准溶液的配制包括用
20
μ
g/m
的内标物为稀释剂分别得含布洛芬为不同
μ
g/m1
的样本
,
内标为
0.4
μ
g/ml
的血浆样本
。
[0019]优选的，所述
S2
血浆处理阶段的涡旋振荡时间为
15min,
离心时间为
15min
每
min12000
转，同时
S2
血浆处理阶段中的乙腈可无差别替换成甲醇
。
[0020]优选的，所述
S3
色谱图制取阶段的色谱条件是色谱条件为
Inertstain AQ
‑
C18 5.0
μ
m(46mm
×
150mm
，
5mm)
，且保护柱的
Zorbax SB
‑
C18(46本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种高效测定血浆中布洛芬的浓度的方法，包括以下具体步骤，其特征在于：
S1
溶液配制阶段：
S11
内标物配制：称取吲哚美辛
,
用乙腈溶解并定容，配制成
1mg/m1
的储备液，精取该溶液用乙腈稀释得
20
μ
g/m1
的内标物；
S12
标准溶液的配制
:
精密称取布洛芬，用
20
μ
g/m
的内标物溶解并定容，配制成
1280
μ
g/ml
的含内标储备液；
S2
血浆处理阶段：取血浆样品加入内标物搅拌混匀
,
加入乙腈
300
μ
1,
涡旋
、
振荡和离心，然后取上清液进样5μ1；
S3
色谱图制取阶段：
S31
取空白血浆
100
μ1，按
S2
操作，得空白血浆色谱图即内部不含布洛芬的血浆；
S32
将含内标的标准溶液进样
,
得标准液及内标的色谱图；
S33
将空白血浆加入含内标的布洛芬标准液，按
S2
操作，得空白血浆加入布洛芬及内标的色谱图；
S4
曲线绘制阶段：采用加权
(1/c2)
最小二乘法进行回归运算计算出布洛芬的浓度
。2.
根据权利要求1所述的一种高效测定血浆中布洛芬的浓度的方法，其特征在于：所述
S12
标准溶液的配制包括用
20
μ
g/m
的内标物为稀释剂分别得含布洛芬为不同
μ
g/m1
的样本
,
内标为
0.4
μ
g/ml
的血浆样本
。3.
根据权利要求1所述的一种高效测定血浆中布洛芬的浓度的方法，其特征在于：所述
S2
血浆处理阶段的涡旋振荡时间为
15min,
离心时间为
15min
每
min12000
转，同时
S2
血浆处理阶段中的乙腈可无差别替换成甲醇
。4.
根据权利要求1所述的一种高效测定血浆中布洛芬的浓度的方法，其特征在于：所述
S3
色谱图制取阶段的色谱条件是色谱条件为
Inertstain AQ
‑
C185.0
μ
m(46mm
×
150mm
，
5mm)
，且保护柱的
Zorbax SB
‑
C18(46mm
×
125mm
，
5mm)

【专利技术属性】
技术研发人员：金毅，邢国振，
申请(专利权)人：安领生物医药深圳有限公司，
类型：发明
国别省市：