替罗非班检测及质量控制方法技术

本发明专利技术提供了一种替罗非班检测及质量控制方法，所述方法包括采用高效液相色谱法对含有替罗非班的样品进行检测，进行所述高效液相色谱检测之前，对所述替罗非班样品进行稀释处理，所述稀释处理采用的稀释剂包括双氧水

【技术实现步骤摘要】
替罗非班检测及质量控制方法


[0001]本专利技术属于分析检测领域，具体地，涉及替罗非班检测及质量控制方法
。

技术介绍

[0002]盐酸替罗非班对血小板
IIb/IIIa
受体具有高度的选择性和特异性，可逆性抑制血小板聚集，目前用于与肝素联用治疗不稳定型心绞痛或非
Q
波心肌梗死患者及经皮冠状动脉介入治疗
(PCI)
中预防心脏缺血
。
盐酸替罗非班的制备工艺涉及磺酰胺化工序，成醚工序
、
水解工序及氢化工序等最终制得盐酸替罗非班，示意性的合成路线如下
。
[0003][0004]在盐酸替罗非班合成工艺中，三苯基膦为中间体
TL1
‑2制备过程中所用试剂，在
Mitsunobu
反应中，三苯基膦
(TPP)
首先和偶氮二甲酸二乙酯
(DEAD)
形成中间体，然后夺取酚羟基上的质子形成正离子
。
同时，4‑
吡啶丁醇作为亲核试剂进攻正离子中的膦原子形成
R
‑
O
‑
PPh3
化合物，随后，
R
‑
O
键断裂生成副产物三苯基氧膦
(TPPO)。
制备中间体
TL
‑2的反应如下：
[0005][0006]该反应中三苯基膦为过量投料
(
过量
0.24
倍
)
，三苯基膦可能残留至成品中
。
三苯基膦是一种有害物质，可能造成皮肤过敏反应和呼吸道刺激，长期或反复接触会对器官造成损害
。
而现有技术中，尚未报道替罗非班中三苯基膦检测或质量控制的有效方案
。
[0007]三苯基膦极性较弱，在水中溶解度较小且不稳定，在空气
、
水等条件下易氧化为三苯基氧膦
。
通过对现有公开专利
、
文献等资料的调研，发现目前国内外对于三苯基膦检测主要采用气相色谱或液相色谱法，为了避免三苯基膦氧化为三苯基氧膦影响检测结果，现有分析方法中多采用非水试剂作为稀释剂溶解样品
。
例如
。
李瑞峰等
(
毛细管气相色谱法测定三苯基膦纯度，
1996
年
)
公开了一种毛细管气相色谱法测定三苯基膦纯度的实验方法，采用丙酮溶解样品，
TCD
检测实现了三苯基膦的纯度检测，但文献中提示，样品溶解后应立即进
行分析检测，否则三苯基膦容易发生氧化，导致检测不准确
。
高如瑜等
(
反相液相色谱分析三苯基磷，
1997
年
)
采用反向液相色谱法定量分析三苯基磷，以乙腈为稀释剂溶解样品，可实现化工产品中三苯基膦定量检测
。
[0008]但在替罗非班粗品检测过程中发现，在采用文献中公开气相色谱法或液相色谱法对替罗非班中三苯基膦进行检测时发现，三苯基膦除了受检测环境中氧气等影响向三苯基氧膦转化外，替罗非班样品中的酸性环境和可能存在的金属离子会进一步催化加速三苯基膦向三苯基氧膦的转化，干扰三苯基膦目标峰的检测
。
参照现有技术中选用非水溶剂溶解样品，样品溶解后应立即检测，仍然无法准确检测或控制替罗非班样品中三苯基膦的含量
。
因此，开发一种适用于替罗非班产品中三苯基膦质量控制检测方法显得非常有必要
。

技术实现思路

[0009]针对现有技术中缺少针对替罗非班样品中三苯基膦检测方法，本专利技术第一方面，提供一种替罗非班的检测方法，所述方法包括采用高效液相色谱法对含有替罗非班的样品进行检测，进行所述高效液相色谱检测之前，对所述替罗非班样品进行稀释处理，所述稀释处理采用的稀释剂包括双氧水
。
[0010]进一步地，所述稀释剂中双氧水的体积分数为
0.1
‑1％，当双氧水体积分数较低时，其氧化三苯基膦所需反应时间较长，需要等待氧化完全之后再检测样品；当双氧水体积分数较高，可以迅速氧化待分析物中的三苯基膦，但过高的双氧水溶度会降低色谱柱使用寿命；本领域技术人员可以根据待分析物中三苯基膦的含量范围，合理选择稀释剂中双氧水的体积分数；优选地，所述双氧水的体积分数为
0.15
‑
0.3
％；优选地，所述双氧水体积分数为
0.15
％
。
[0011]进一步地，所述流动相为乙腈和水，优选地，所述高效液相色谱法采用的洗脱方式为梯度洗脱
。
[0012]进一步地，所述流动相为乙腈和磷酸二氢钾溶液，优选地，所述磷酸二氢钾溶液的
pH
为
6.2
‑
6.8
，更优选地，所述磷酸二氢钾溶液的
pH
为
6.5
；优选地，所述流动相中乙腈和磷酸二氢钾溶液体积比为
5:95
‑
65:35
，更优选地，所述流动相中乙腈和磷酸二氢钾溶液体积比为
45:55
‑
55:45
；优选地，所述高效液相色谱法采用的洗脱方式为等度洗脱
。
当所述流动相为乙腈和磷酸二氢钾溶液时，采用等度洗脱，
20min
内即可将待分析物洗脱完全，且由于该流动相具备缓冲能力，可以有效缓冲待分析物对色谱体系
pH
的影响，测得的色谱图基线平稳，且色谱体系长时间运行之后，色谱体系依然可以维持在稳定状态，无异常峰干扰目标峰的检测
。
[0013]进一步地，所述高效液相色谱检测中采用的色谱柱为
C18
色谱柱，优选地，所述色谱柱为
BDS C18、CAPCELL PAK
‑
C18
或
Agilent XDB
‑
C18
柱
。CAPCELL PAK
‑
C18
柱对硅胶表面进行了特殊的包覆处理；
BDS C18
柱采用碱钝化处理，将本来带弱酸性的硅胶完全屏蔽掉；
Agilent XDB
‑
C18
柱采用双重封端处理，覆盖了多数的硅醇基；
BDS C18、CAPCELL PAK
‑
C18
或
Agilent XDB
‑
C18
柱均通过一定的手段降低了色谱柱填料里裸露的硅醇基，减少了硅醇基与待分析物之间的相互作用，降低了色谱峰的拖尾程度
。
相较
ODS
‑
3 C18
色谱柱，用上述色谱柱测得的谱图的色谱峰对称性更高
。
[0014]进一步地，所述高效液相色谱检测中采用的柱温为...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种替罗非班的检测方法，其特征在于，所述方法包括采用高效液相色谱法对含有替罗非班的样品进行检测，进行所述高效液相色谱检测之前，对所述替罗非班样品进行稀释处理，所述稀释处理采用的稀释剂包括双氧水
。2.
根据权利要求1所述的替罗非班的检测方法，所述稀释剂中双氧水的体积分数为
0.1
‑1％，优选地，所述双氧水的体积分数为
0.15
‑
0.3
％
。3.
根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱法使用的流动相为乙腈和水
。4.
根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱法使用的流动相为乙腈和磷酸二氢钾溶液，任选地，所述磷酸二氢钾溶液的
pH
为
6.2
‑
6.8
，优选地，所述磷酸二氢钾溶液的
pH
为
6.5
；任选地，所述流动相中乙腈和磷酸二氢钾溶液体积比为
5:95
‑
65:35
，优选地，所述流动相中乙腈和磷酸二氢钾溶液体积比为
45:55
‑
55:45
；任选地，所述高效液相色谱法采用的洗脱方式为等度洗脱
。5.
根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱检测中采用的色谱柱为
C18
色谱柱，优选地，所述色谱柱为
BDS C18、CAPCELL PAK
‑
C18
或
Agilent XDB
‑
C18
柱
。6.
根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱检测中采用的柱温为
30℃
‑
40℃
；任选地，所述高效液相色谱检测中采用的流动相流速为
0.8mL/min
‑
1.2mL/min。7.
根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱检测中采用的检测波长为
200nm
‑
230nm
，优选地，所述高效液相色谱检测中采用的检测波长为
208nm
‑
212nm。8.
一种化学品的检测方法，其特征在于，所述化学品包括三苯基膦，所述检测方法包括：将含有所述化学品的样品进行高效液相色谱检测，其中，进行所述高效液相色谱检测之前，对所述化学品进行稀释处理，所述稀释处理采用的稀释剂包括双氧水
。9.
根据权利要求8所述化学品的检测方法，所述化学品还包括替罗非班；任选地，所述稀释剂中双氧水的体积分数为
0.1
‑1％，优选地，所述双氧水的体积分数为
0.15
‑
0.3
％；任选地，所述高效液相色谱法使用的流动相为乙腈和水；任选地，所述高效液相色谱法使用的流动相为乙腈和磷酸二氢钾溶液，优选地，所述磷酸二氢钾溶液的
pH
为
6.2
‑
6.8
，更优选地，所述磷酸二氢钾溶液的
pH
为
6.5
；优选地，所述流动相中乙腈和磷酸二氢钾溶液体积比为
5:95
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：黄爱珍，田婉容，杨萍，刘欣，李振武，
申请(专利权)人：武汉武药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：