筛选高抗霜疫病荔枝种质资源的标志物和方法技术

本发明专利技术公开了一种筛选高抗霜疫病荔枝种质资源的标志物和方法，所述标志物为东莨菪内酯

【技术实现步骤摘要】
筛选高抗霜疫病荔枝种质资源的标志物和方法


[0001]本专利技术属于植物抗病
，更具体地，本专利技术涉及一种筛选高抗霜疫病荔枝种质资源的标志物
、
以及一种筛选高抗霜疫病荔枝种质资源的方法
。

技术介绍

[0002]荔枝霜疫病是由荔枝霜疫霉菌侵染所引起一种最严重的荔枝病害
。
荔枝霜疫病主要危害荔枝果实，有时也侵染荔枝幼果
、
花穗和叶片
。
另外，荔枝霜疫病在荔枝储藏和运输过程中极易造成果实褐变和腐败，造成极大的经济损失
。
[0003]高抗荔枝霜疫病种质资源的筛选对荔枝产业的发展至关重要
。
传统的高抗霜疫病种质的筛选需要对大量荔枝成熟果实接种霜疫霉菌，再通过感官审评来筛选确定，存在操作繁琐
、
耗时长
、
需样量大
、
人为主观干预等问题，不利于大规模的荔枝种质的筛选
。
[0004]随着生物信息学的发展，各种分子标记技术或化学标记技术等辅助手段越来越多的应用在筛选特异种质资源上
。
然而，由于荔枝霜疫病的具体抗性基因和抗病物质报道还较少，所以难以应用于抗性筛选
。
此外，荔枝体内受霜疫病诱导代谢产物众多，包括多酚类物质
、
香豆素类物质以及木质素类物质等多种
。
因此，这些分子标记技术或化学标记技术难以应用于荔枝抗性筛选
。
本申请的专利技术人前期利用生物信息学等方法发现荔枝体内物质东莨菪内酯具有体外抑制霜疫霉菌生长的作用
(ZL202211204110.0)。
然而，目前未发现东莨菪内酯可以作为高抗霜疫病荔枝种质筛选标记物
。

技术实现思路

[0005]基于此，本专利技术的目的在于提供一种筛选高抗霜疫病荔枝种质资源的标志物和方法
。
[0006]实现上述专利技术目的的技术方案包括如下
。
[0007]本专利技术的第一方面，提供了一种筛选高抗霜疫病荔枝种质资源的标志物，所述标志物为东莨菪内酯
。
[0008]本专利技术的第二方面，提供了上述标志物在筛选高抗霜疫病荔枝种质资源中的应用
。
[0009]本专利技术的第三方面，提供了一种筛选高抗霜疫病荔枝种质资源的方法，包括以下步骤：
[0010](1)、
使用荔枝霜疫霉菌处理待测荔枝叶片；
[0011](2)、
提取待测荔枝叶片的次生代谢物；
[0012](3)、
测定所述次生代谢物中的东莨菪内酯含量，筛选高抗霜疫病荔枝种质资源
。
[0013]本专利技术的专利技术人发掘了东莨菪内酯可以作为筛选高抗霜疫病荔枝种质资源的标志物，并确定了筛选高抗霜疫病荔枝种质的东莨菪内酯含量的标准，本专利技术的筛选高抗霜疫病的荔枝种质资源的方法，操作简单
、
耗时短
、
需样量少
、
可靠性强，可应用于大批量的资源样品筛选
。
附图说明
[0014]图1为本专利技术实施例1中
51
份荔枝病情指数的频率分布
。
[0015]图2为本专利技术实施例1中
51
份荔枝叶片的东莨菪内酯含量的频率分布
。
[0016]图3为本专利技术实施例1中病情指数与东莨菪内酯含量的回归分析结果
。
具体实施方式
[0017]为了便于理解本专利技术，下面将对本专利技术进行更全面的描述
。
本专利技术可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例
。
相反地，提供这些实施例的目的是使对本专利技术公开内容的理解更加透彻全面
。
[0018]除非另有定义，本专利技术所使用的所有的技术和科学术语与属于本专利技术的
的技术人员通常理解的含义相同
。
本专利技术的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不用于限制本专利技术
。
本专利技术所使用的术语“和
/
或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合
。
[0019]下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，例如
Green
和
Sambrook
等人，分子克隆实验指南
(Molecular Cloning:A Laboratory Manual,2013)
中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件
。
实施例中所用到的各种常用化学试剂，均为市售产品
。
[0020]本专利技术的专利技术人前期通过对抗病和感病荔枝品种的代谢组分比较分析，发现东莨菪内酯的含量存在显著差异，并通过体外抑菌实验证明，东莨菪内酯对荔枝霜疫霉菌具有良好的生物活性
。
在进一步实验中发现，在荔枝霜疫霉菌侵染后，荔枝叶片中的东莨菪内酯的含量显著提高，并与荔枝的病情指数呈显著负相关，因此，东莨菪内酯可以作为筛选高抗霜疫病荔枝种质资源的标志物
。
进一步地，本专利技术通过测定荔枝叶片的东莨菪内酯含量，即可检测待测荔枝品种是高抗霜疫病荔枝品种还是低抗或不抗霜疫病荔枝品种
(
若东莨菪内酯含量大于
12.01
μ
g/g
，即所述待测荔枝为高抗霜疫病的荔枝品种，若东莨菪内酯含量小于
12.01
μ
g/g
，即所述待测荔枝为低抗或不抗霜疫病的荔枝品种
)。
本专利技术的使用化学标记物筛选高抗霜疫病的荔枝种质资源的方法，操作简单
、
耗时短
、
需样量少
(
每次测定只需要1‑3片叶片
)、
可靠性强，可应用于大批量的资源样品筛选
。
[0021]在本专利技术的其中一些实施例中，公开了一种筛选高抗霜疫病荔枝种质资源的标志物，所述标志物为东莨菪内酯
。
[0022]在本专利技术的另一些实施例中，公开了上述标志物在筛选高抗霜疫病荔枝种质资源中的应用
。
[0023]在本专利技术的另一些实施例中，公开了一种筛选高抗霜疫病荔枝种质资源的方法，包括以下步骤：
[0024](1)、
使用荔枝霜疫霉菌处理待测荔枝叶片；
[0025](2)、
提取待测荔枝叶片的次生代谢物；
[0026](3)、
测定所述次生代谢物中的东莨菪内酯含量；若东莨菪内酯含量大于
12.01
μ
g/g
，即所述待测荔枝为高抗霜疫病的荔枝品种，若东莨菪内酯含量小于
12.01
μ
g/g
，即所述待测荔枝为低抗或不抗霜疫病的荔枝品种
。
[0027]在其中一些实施例中，步骤
(1)
中所述荔枝霜疫霉菌的孢子数为<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种筛选高抗霜疫病荔枝种质资源的标志物，其特征在于，所述标志物为东莨菪内酯
。2.
权利要求1所述的标志物在筛选高抗霜疫病荔枝种质资源中的应用
。3.
一种筛选高抗霜疫病荔枝种质资源的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)、
使用荔枝霜疫霉菌处理待测荔枝叶片；
(2)、
提取待测荔枝叶片的次生代谢物；
(3)、
测定所述次生代谢物中的东莨菪内酯含量，筛选高抗霜疫病荔枝种质资源
。4.
根据权利要求3所述的筛选高抗霜疫病荔枝种质资源的方法，其特征在于，步骤
(3)
中，若东莨菪内酯含量
≥12.01
μ
g/g
，则所述待测荔枝为高抗霜疫病的荔枝品种，若东莨菪内酯含量
&lt;12.01
μ
g/g
，则所述待测荔枝为低抗或不抗霜疫病的荔枝品种
。5.
根据权利要求3所述的筛选高抗霜疫病荔枝种质资源的方法，其特征在于，步骤
(1)
中所述荔枝霜疫霉菌的孢子数为
3*104个
/mL
～
5*104个
/mL
，优选为
4*104个
/mL。6.
根据权利要求3所述的筛选高抗霜疫病荔枝种质资源的方法，其特征在于，步骤
(1)
中所述处理时间为
20h
～
24h
，优选为
24h。7.
根据权利要求3所述的筛选高抗霜疫病荔枝种质资源的方法，其特征在于，步骤
(2)
中所述提取待测荔枝叶片...

【专利技术属性】
技术研发人员：
申请(专利权)人：广东省农业科学院果树研究所，
类型：发明
国别省市：