【技术实现步骤摘要】
灵菌红素在作为僵蚕劣品的定性定量标志物中的应用
[0001]本专利技术属于中药材优劣鉴别
,涉及一种僵蚕劣品的定性定量标志物灵菌红素及其检测方法
。
技术介绍
[0002]僵蚕
BombyxBatryticatus
是蚕蛾科昆虫家蚕
BombyxmoriLinnaeus4
~5龄的幼虫,感染
(
或人工接种
)
白僵菌
Beauveriabassiana(Bals.)Vuillant
而致死的干燥体,为常用的中药,性味咸
、
辛
、
平,具有息风止痉
、
祛风止痛
、
化痰散结的功效
。
在市场调研中发现一种表面红色的僵蚕,与药典收载感染白僵菌致死的蚕体不同,通过外观性状观察发现此类僵蚕发生了二次感染并产生一类红色物质,推测此类僵蚕对药材质量可能存在影响甚至有一定的安全性风险
。
[0003]本专利技术通过对表面为红色的蚕体中的代谢产物进行提取分离纯化分析鉴定发现红色僵蚕其实是粘质沙雷氏菌后期感染所致,红色物质为粘质沙雷氏菌所分泌的次生代谢产物灵菌红素,具有三吡咯环甲氧基的基本结构,其有一定的毒性,对于临床僵蚕用药的有效性与安全性带来了比较大的影响,本方法通过灵菌红素标志物的定性定量检测从而控制劣品红色僵蚕的流通,为僵蚕的药材品质和临床用药安全以及药效提供技术支撑
。
技术实现思路
[0004]专利技术目的 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.
灵菌红素在作为僵蚕劣品的定性定量标志物中的应用
。2.
根据权利要求1所述的应用,对僵蚕劣品中的灵菌红素进行检测,其特征在于,包括以下步骤:
(1)
灵菌红素标准溶液制备和标准曲线建立:灵菌红素标准储备液制备:准确称取灵菌红素粉末,溶于甲醇定容,封装于棕色瓶内,避光保存;灵菌红素标准溶液制备:取灵菌红素标准储备液,加甲醇依次稀释得到不同浓度的灵菌红素标准溶液;吸取不同浓度的灵菌红素标准溶液注入超高效液相色谱仪,以峰面积为纵坐标
Y
,灵菌红素对照品溶液浓度为横坐标
X
,进行线性回归分析,绘制灵菌红素标准曲线方程;
(2)
中药僵蚕劣品供试品溶液的制备:取表面为红色的僵蚕死蚕,经自然风干
、
烘干
、
粉碎
、
过筛,得到中药僵蚕劣品粉末;取僵蚕劣品粉末,加8~
12
倍量体积的乙酸乙酯中,加热回流提取1~3次,每次
0.5
~4小时,过滤,合并提取液,得到僵蚕劣品提取液,浓缩,浓缩液用甲醇稀释并过微孔滤膜,以滤过的续滤液作为中药僵蚕劣品的供试品溶液;
(3)
僵蚕劣品中灵菌红素的测定:取步骤
(2)
中药僵蚕劣品的供试品溶液注入超高效液相色谱仪分析;然后将灵菌红素的峰面积代入步骤
(1)
的标准曲线方程,计算出中药僵蚕劣品中灵菌红素的含量
。3.
根据权利要求2所述的应用,其特征在于,步骤
(1)
和步骤
(3)
的色谱条件为:流动相以甲酸溶液为
A
相,以乙腈为
B
相,梯度洗脱;检测波长为
545nm
;流速为
0.5mL/
分钟
。4.
根据权利要求2所述的应用,其特征在于,步骤
(2)
中药僵蚕劣品供试品溶液的制备:称
0.5g
于
100mL
圆底烧瓶内,加入
20mL
乙酸乙酯加热回流提取
4h
,回流提取液进行浓缩成浸膏,僵蚕劣品浸膏用甲醇溶解过微孔滤膜,取续滤液作为中药僵蚕劣品供试品溶液
。5...
【专利技术属性】
技术研发人员:倪亮,姚毅,刘继平,旷翔,曾友兵,吴媛,甘兴林,易剑欢,
申请(专利权)人:贵州同德药业股份有限公司,
类型:发明
国别省市:
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