PCR制造技术

本发明专利技术提供了一种

【技术实现步骤摘要】
PCR试剂盒、反应机构及反应设备


[0001]本专利技术涉及分子诊断
，尤其涉及一种
PCR
试剂盒
、
反应机构及反应设备
。

技术介绍

[0002]分子诊断技术是指以
DNA
和
RNA
为诊断材料，用分子生物学技术通过检测基因的存在
、
缺陷或表达异常，从而对人体状态和疾病作出诊断的技术
。
其基本原理是检测
DNA
或
RNA
的结构是否变化
、
量的多少及表达功能是否异常，以确定受检者有无基因水平的异常变化，对疾病的预防
、
预测
、
诊断
、
治疗和预后具有重要意义
。
通俗简单的讲所有基于分子生物学水平的方法学技术，都属于分子诊断技术，比如聚合酶链式反应技术（
Polymerase chain reaction
，
PCR
）
、
基因测序技术等等
。PCR
技术是一种用于扩增特定
DNA
片段（待测基因）的分子生物学技术，即待测基因的特异性体外扩增过程
。PCR
基本原理为：双链
DNA
在高温下发生变性解链成为单链
DNA
，当温度降低后又可以复性成双链，通过温度变化控制
DNA
的变性和复性，加入引物
、DNA
聚合酶r/>、
脱氧核糖核苷三磷酸（
dNTP
）及相应缓冲液，配合温度控制则可以完成特定
DNA
片段的体外复制扩增
。
[0003]多数情况下，待测样本的初始状态下不仅包含待扩增的待测基因，还包含细胞壁
、
细胞膜以及其他物质，为了准确对待测基因实现体外复制扩增，在进行
PCR
前，需要对待测样本进行预处理
(
细胞破碎
)、
样本核酸提取
(DNA/RNA
分离等
)。
待测样本的待测基因完成复制扩增后，还需对复制扩增后的产物进行检测，现有的检测方法为荧光检测法，也就是利用光学检测系统对复制扩增产物进行光学照射处理，并检测照射后复制扩增产物所传递的荧光信号，最终根据荧光信号对待测样本完成定性
、
定量检测
。
定性是指判断待测样本是否携带待测基因，定量是指待测样本携带了多少量的待测基因
。
[0004]目前，待测样本在完成上述细胞破碎
、
核酸提取
、
扩增产物
、
产物检测过程中，需要用到多个容器来盛装不同阶段的待测样本，并在不同的容器之间进行转移，不仅操作繁琐，容易造成污染，成本也高；同时，根据荧光信号强度来对待测样本进行定量计算时，需要设置标准品作为参考，所得到的定量结果仅仅是一个相对值，定量结果可能相较于真实值偏差较大，无法满足对定量结果准确度要求极高的场景需求
。
[0005]对复制扩增产物定量分析时，通常所用到的分析方法为
qPCR
相对定量法，
qPCR
相对定量法是在
PCR
反应的待测样本中加入报告基团，当待测基因每经历一个反应循环（也就是经历一次复制后）报告基团发出的荧光信号强度就会增强一次，通过检测每个反应循环后的荧光信号强度，生成反映循环数与荧光信号强度的关系的扩增曲线图，同时设置标准品作为参考，根据标准品的扩增曲线图与待测样本的扩增曲线图比较计算，得出待测样本的定量结果
。
但是，
qPCR
相对定量法存在一定的局限性，对定量结果的计算需要依赖于待测样本和标准品的扩增曲线图，并容易受到待测基因以及标准品扩增效率的影响，导致定量结果不准确
。
[0006]因此，使用现有技术中的检测试剂盒在对待测样本进行定量计算时，容易出现定量结果不准确的问题
。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的是提供一种
PCR
试剂盒
、
反应机构及反应设备，以解决现有技术中的检测试剂盒在对待测样本进行定量计算时，容易出现定量结果不准确的问题
。
[0008]本专利技术的上述目的可采用下列技术方案来实现：本专利技术提供一种
PCR
试剂盒，包括：储料装置和反应机构；所述反应机构设置有进样流道
、
出样流道和多个反应室，各个所述反应室均直接或间接地与所述进样流道和出样流道连通，所述储料装置中的待测样本能够经所述进样流道流入各个所述反应室，各个所述反应室中的待测样本能够经所述出样流道流回所述储料装置
。
[0009]在优选的实施方式中，所述反应机构设置有反应腔，所述出样流道与所述反应腔连通，所述反应室设置在所述反应腔内；至少一个所述反应室连接有出样管，并且，各个所述反应室均与至少一个所述出样管直接或间接地连通；所述出样管的出样端口暴露于所述反应腔
。
[0010]在优选的实施方式中，多个所述反应室中的一个或者多个被配置为出样反应室，所述出样反应室连接有所述出样管；所述出样反应室之外的所有所述反应室均与至少一个所述出样反应室连通
。
[0011]在优选的实施方式中，所述出样反应室的数量为一个，各个所述反应室通过连管串联连接，末端的一个所述反应室为所述出样反应室，首端的一个所述反应室为进样反应室，所述进样流道与所述进样反应室连通；或，所述出样反应室的数量为多个，多个所述反应室分置为多个支路，多个所述支路分别与多个所述出样反应室对应连接
。
[0012]在优选的实施方式中，所述出样管的出样端口背离重力方向设置
。
[0013]在优选的实施方式中，所述出样管为蛇形管
。
[0014]在优选的实施方式中，所述反应机构包括反应板，所述反应腔由所述反应板向自身凹陷形成或者向远离自身凸出形成
。
[0015]在优选的实施方式中，所述反应室背离所述反应腔底壁的一端的顶面为敞开的；所述反应板覆盖有封膜，所述封膜密封覆盖所述反应腔和所述反应室背离所述反应腔底壁的一端的顶面
。
[0016]在优选的实施方式中，所述储料装置包括阀体和处理室，所述阀体用于控制所述进样流道与所述处理室的通断，和
/
或，所述阀体用于控制所述出样流道与所述处理室的通断
。
[0017]在优选的实施方式中，所述储料装置包括至少一个试剂腔，所述阀体能够分别控制所述处理室与各个所述试剂腔之间的通断
。
[0018]在优选的实施方式中，所述反应板的一端安装于所述储料装置的侧壁，各个所述反应室设置于所述反应板远离所述储料装置的一端，所述进样流道和所述出样流道均沿所述反应板安装于所述本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种
PCR
试剂盒，其特征在于，包括：储料装置和反应机构；所述反应机构设置有进样流道
、
出样流道和多个反应室，各个所述反应室均直接或间接地与所述进样流道和出样流道连通，所述储料装置中的待测样本能够经所述进样流道流入各个所述反应室，各个所述反应室中的待测样本能够经所述出样流道流回所述储料装置；所述反应机构设置有反应腔，所述出样流道与所述反应腔连通，所述反应室设置在所述反应腔内；至少一个所述反应室连接有出样管，并且，各个所述反应室均与至少一个所述出样管直接或间接地连通；所述出样管的出样端口暴露于所述反应腔
。2.
根据权利要求1所述的
PCR
试剂盒，其特征在于，多个所述反应室中的一个或者多个被配置为出样反应室，所述出样反应室连接有所述出样管；所述出样反应室之外的所有所述反应室均与至少一个所述出样反应室连通
。3.
根据权利要求2所述的
PCR
试剂盒，其特征在于，所述出样反应室的数量为一个，各个所述反应室通过连管串联连接，末端的一个所述反应室为所述出样反应室，首端的一个所述反应室为进样反应室，所述进样流道与所述进样反应室连通；或，所述出样反应室的数量为多个，多个所述反应室分置为多个支路，多个所述支路分别与多个所述出样反应室对应连接
。4.
根据权利要求1‑3中任一项所述的
PCR
试剂盒，其特征在于，所述出样管的出样端口背离重力方向设置
。5.
根据权利要求4所述的
PCR
试剂盒，其特征在于，所述出样管为蛇形管
。6.
根据权利要求1所述的
PCR
试剂盒，其特征在于，所述反应机构包括反应板，所述反应腔由所述反应板向自身凹陷形成或者向远离自身凸出形成
。7.
根据权利要求6所述的
PCR
试剂盒，其特征在于，所述反应室背离所述反应腔底壁的一端的顶面为敞开的；所述反应板覆盖有封膜，所述封膜密封覆盖所述反应...

【专利技术属性】
技术研发人员：姚克迪，廖杰，何伟，王芳，朱信，董立兵，戴涛，郭旻，
申请(专利权)人：鲲鹏基因北京科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：