一种利用组合免疫细胞外泌体多肽因子治疗抑郁症的方法技术

本方法涉及抑郁症技术领域，且公开了一种利用组合免疫细胞外泌体多肽因子治疗抑郁症的方法，包括以下步骤：

【技术实现步骤摘要】
一种利用组合免疫细胞外泌体多肽因子治疗抑郁症的方法


[0001]本方法涉及抑郁症
，具体为一种利用组合免疫细胞外泌体多肽因子治疗抑郁症的方法
。

技术介绍

[0002]抑郁症是现在最常见的一种心理疾病，以连续且长期的心情低落为主要的临床特征，是现代人心理疾病最重要的类型
。
[0003]临床可见，心情低落和现实过得不开心，情绪长时间地低落消沉，从一开始的闷闷不乐到最后的悲痛欲绝，自卑
、
痛苦
、
悲观
、
厌世，感觉活着每一天都是在绝望地折磨自己，消极，逃避，最后甚至更有自杀倾向和行为
。
患者患有躯体化症状
。
胸闷，气短
。
[0004]经检索，
201580043454.X 用于治疗抑郁症的方法，涉及一种用于治疗抑郁症的方法，例如治疗难治性抑郁症的方法；其中所述治疗方案根据患者在单核苷酸多态性
(SNP)rs4306882
处的基因型进行调整
。
具体地讲，所述方法包括确定在
rs4306882
处是否存在
G
或
T
等位基因，以及施用氯胺酮或艾司氯胺酮的给药方案，其中所述给药方案经过调整，以向那些在
rs4306882
多态性位点处具有所述
G
等位基因
(
而不是
T
等位基因
)
的患者提供更高剂量和
/
或更高频率的所述氯胺酮或艾司氯胺酮
。
还公开了一种用于预测患有抑郁症的患者是否遗传上易于对阻断单胺神经递质的再摄取的抗抑郁药反应不良的方法，所述方法包括对所述患者进行基因分型以确定所述患者在
SNP rs4306882
处的基因型
。
[0005]目前，抑郁症的治疗药物主要基于单胺类物质假说，如上述，
201580043454.X 用于治疗抑郁症的方法，临床上常用的治疗方法包括靶向单胺类递质的药物治疗和电休克疗法等
。
但遗憾的是，这些药物都需要数周乃至数月才能发挥作用，并且有三分之一的患者对任何治疗方法都不反应
。 因此， 研究新型有效的用于抑郁症治疗和预防的药物是治疗抑郁症的关键
。

技术实现思路

[0006]针对现有技术的不足，本方法提供了一种利用组合免疫细胞外泌体多肽因子治疗抑郁症的方法，解决了上述的问题
。
[0007]本方法提供如下技术方案：一种利用组合免疫细胞外泌体多肽因子治疗抑郁症的方法，包括以下步骤：
[0008]S1
，制备免疫细胞；
[0009]S2
，制备免疫细胞外泌体多肽再生因子；
[0010]S3
，将免疫细胞外泌体多肽再生因子用混合物
A
进行乳化，得到混合物
B。
[0011]优选的技术方案：所述步骤
S1
，包括以下步骤：
[0012]S101
，用促进细胞贴壁材料对免疫细胞培养皿进行包被；
[0013]S102
，依次将氨基酸
、
维生素
、
盐类
、
脂类或蛋白多肽中的一种或多种
、
细胞因子或抗体中的一种或多种营养物质加入到上述免疫细胞培养皿中，配制成免疫细胞培养基；
[0014]S103
，对免疫细胞进行接种，将免疫细胞接种到上述免疫细胞培养基中，得到初步扩增的初代免疫细胞；
[0015]S104
，将初步扩增的所述免疫细胞加入无血清免疫细胞诱导培养基进行第二阶段诱导扩增培养，得到诱导扩增的免疫细胞；
[0016]S105
，诱导扩增的所述免疫细胞加入无血清免疫细胞激活培养基进行第三阶段激活扩增培养，得到激活扩增的免疫细胞
。
[0017]优选的技术方案：所述步骤
S2
，包括以下步骤：
[0018]S201,
将激活扩增的所述免疫细胞进行第四阶段培养，得到培养液；
[0019]S202,
将培养液以密度梯度离心法，制备外泌体悬液；
[0020]S203
，采用亲和层析柱进行蛋白纯化，收集洗脱液，得到所述组合免疫细胞外泌体多肽再生因子
。
[0021]将培养液进行离心分离后，得上清液；然后采用
MabSelectTMSuReTM
亲和层析柱，使用5个柱体积平衡缓冲液进行平衡，将经步骤
203
初步纯化的样品加载到亲和层析柱上，用5个柱体积的淋洗缓冲液进行淋洗，使用5个柱体积的洗脱缓冲液进行洗脱，使用预放有中和液容器收集获得的目的蛋白洗脱物，中和后的目的蛋白溶液的
pH
为
6.5
～
8.0。
使用5个柱体积的再生液进行再生，使用3个柱体积的清洗液清洗层析柱，最后使用5个柱体积的平衡缓冲液平衡层析柱，最后使用保存液将层析柱保存；其中，平衡缓冲液：
20mMTris
‑
HCl
，
150mMNaCl
，
pH7.2
；淋洗缓冲液：
20mMTris
‑
HCl
，
150mMNaCl
，
pH7.2
；洗脱缓冲液：
100mM
柠檬酸缓冲液，
0.1M
蔗糖，
pH3.4
；中和液：
1MTris
‑
HCl
，
pH8.5
；再生液：
100mMHAc
；清洗液：
0.1MNaOH
；保存液：
20
体积％乙醇
。
[0022]优选的技术方案：所述步骤
S3
中的混合物
A
为弗氏完全佐剂与
PBS
缓冲液等体积混合得到
。
[0023]优选的技术方案：所述步骤
S101
中的贴壁材料为胶原蛋白
、
明胶
、
多聚赖氨酸
、
纤粘连蛋白
、
层粘连蛋白
、
玻表粘连蛋白中的一种或多种
。
[0024]优选的技术方案：所述步骤
S102
中的免疫细胞培养基还包括微量元素和其它小分子物质 ；其中所述微量元素包括氯化钴
、
亚硒酸钠
、
氯化镍
、
氯化锰
、
七钼酸铵
、
氯化铝
、
硫酸铬钾
、
硫酸铜
、
硝酸铁
、
硫酸亚铁或硫酸锌中的一种或本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种利用组合免疫细胞外泌体多肽因子治疗抑郁症的方法，其特征在于：包括以下步骤：
S1
，制备免疫细胞；
S2
，制备免疫细胞外泌体多肽再生因子；
S3
，将免疫细胞外泌体多肽再生因子用混合物
A
进行乳化，得到混合物
B。2.
根据权利要求1所述的一种利用组合免疫细胞外泌体多肽因子治疗抑郁症的方法，其特征在于：所述步骤
S1
，包括以下步骤：
S101
，用促进细胞贴壁材料对免疫细胞培养皿进行包被；
S102
，依次将氨基酸
、
维生素
、
盐类
、
脂类或蛋白多肽中的一种或多种
、
细胞因子或抗体中的一种或多种营养物质加入到上述免疫细胞培养皿中，配制成免疫细胞培养基；
S103
，对免疫细胞进行接种，将免疫细胞接种到上述免疫细胞培养基中，得到初步扩增的初代免疫细胞；
S104
，将初步扩增的所述免疫细胞加入无血清免疫细胞诱导培养基进行第二阶段诱导扩增培养，得到诱导扩增的免疫细胞；
S105
，诱导扩增的所述免疫细胞加入无血清免疫细胞激活培养基进行第三阶段激活扩增培养，得到激活扩增的免疫细胞
。3.
根据权利要求2所述的一种利用组合免疫细胞外泌体多肽因子治疗抑郁症的方法，其特征在于：所述步骤
S2
，包括以下步骤：
S201,
将激活扩增的所述免疫细胞进行第四阶段培养，得到培养液；
S202,
将培养液以密度梯度离心法，制备外泌体悬液；
S203
，采用亲和层析柱进行蛋白纯化，收集洗脱液，得到所述组合免疫细胞外泌体多肽再生因子
。4.
根据权利要求1所述的一种利用组合免疫细胞外泌体多肽因子治疗抑郁症的方法，其特征在于：所述步骤
S3
中的混合物
A
为弗氏完全佐剂与
PBS
缓冲液等体积混合得到
。5.
根据权利要求4所述的一种利用组合免疫细胞外泌体多肽因子治疗抑郁症的方法，其特征在于：所述步骤
S101
中的贴壁材料为胶原蛋白
、...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨晓晨，
申请(专利权)人：北京圣美细胞生命科学工程研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：