N末端B型利钠肽原的稀释液及其制备方法、N末端B型利钠肽原的校准品技术

本发明专利技术公开了一种N末端B型利钠肽原的稀释液及其制备方法、N末端B型利钠肽原的校准品，N末端B型利钠肽原的稀释液包括以下浓度的组分：0.5％～10％的蛋白保护剂、0.1％～5％的还原剂和10mmol/L～50mmol/L的缓冲液；缓冲液的pH为4.0～6.0。通过缓冲液、蛋白保护剂和还原剂的协同增效的作用，稳定保护N末端B型利钠肽原抗原，无需较多成分的辅助，在保证试剂性能处于最佳状态下，提高了试剂的稳定性。提高了试剂的稳定性。

【技术实现步骤摘要】
N末端B型利钠肽原的稀释液及其制备方法、N末端B型利钠肽原的校准品


[0001]本专利技术涉及生化检测
，更具体地，涉及一种N末端B型利钠肽原的稀释液及其制备方法、N末端B型利钠肽原的校准品。

技术介绍

[0002]心力衰竭是指由于心脏的收缩功能或舒张功能发生障碍，不能将静脉回心血量充分排出心脏，导致静脉系统血液淤积，动脉系统血液灌注不足，从而引起心脏循环障碍症候群。心力衰竭并不是一个独立的疾病，而是心脏疾病发展的终末阶段。其中，心肌细胞受到刺激后首先分泌B型利钠肽原前体(pre
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proBNP)，随后形成BNP前体(proBNP)，proBNP在内切酶作用下裂解为有利钠、利尿、扩血管等生物活性的B型利钠肽(BNP，含32个氨基酸)和无生物活性的N末端B型利钠肽原(NT
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proBNP，含76个氨基酸)，NT
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proBNP与BNP相比，NT
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proBNP半衰期长，在体外更稳定，其浓度可反映短时间内新合成的BNP释放，在心衰病人体内浓度比BNP高，具有高的敏感性和特异性，因此，可作为心力衰竭诊断的敏感指标，在心衰疾病的预后判断和疗效监测具有重要价值。
[0003]目前NT
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proBNP校准品主要是冻干品，冻干品复溶比较麻烦，且复溶过程中，水质差异及人为操作误差可能导致校准品复溶后的浓度与靶值有偏差，从而造成临床检测结果的不准确，复溶后的校准品不易保存，保存时间短。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于克服现有技术存在的上述缺陷，提供一种无需冻干，且稳定性强和有效期长的N末端B型利钠肽原的稀释液及其制备方法、N末端B型利钠肽原的校准品。
[0005]为实现上述目的，本专利技术的技术方案如下：
[0006]一种N末端B型利钠肽原的稀释液，所述稀释液包括以下浓度的组分：
[0007]0.5％～10％的蛋白保护剂、0.1％～5％的还原剂和10mmol/L～50mmol/L的缓冲液；所述缓冲液的pH为4.0～6.0。
[0008]本专利技术还提供了一种N末端B型利钠肽原的稀释液的制备方法，包括以下步骤：
[0009]提供以下浓度的组分：0.5％～10％的蛋白保护剂、0.1％～5％的还原剂和10mmol/L～50mmol/L的缓冲液；
[0010]将所述蛋白保护剂、所述还原剂和所述缓冲液进行混合，调节pH值至4.0～6.0，得到所述稀释液。
[0011]本专利技术还提供了一种N末端B型利钠肽原的校准品，包括N末端B型利钠肽原抗原和稀释液；所述稀释液为如上述的稀释液或如上述的制备方法得到的稀释液。
[0012]实施本专利技术实施例，将具有如下有益效果：
[0013]本专利技术实施例在pH为4.0～6.0的酸性缓冲液体系下，添加蛋白保护剂、还原剂起到协同增效的作用，稳定保护N末端B型利钠肽原抗原，延长N末端B型利钠肽原抗原的保存
时间，其中，蛋白保护剂可使稀释液基质与血清基质接近，保证N末端B型利钠肽原抗原的生物状态，能够提高N末端B型利钠肽原抗原的稳定性，还原剂可防止蛋白发生氧化，缓冲液可以为N末端B型利钠肽原抗原的稳定保存提供基础环境，更好地维持N末端B型利钠肽原抗原形态与结构的稳定性。本专利技术实施例的稀释液无需较多成分的辅助，在保证试剂性能处于最佳状态下，提高了试剂的稳定性。本专利技术的校准品无需冻干，不仅缩短了生产周期，降低了生产成本，同时无需经过复溶环节，避免了复溶过程中可能出现的不可控因素，使得临床检测结果更为准确。
具体实施方式
[0014]下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0015]本专利技术公开了一种N末端B型利钠肽原的稀释液，稀释液包括以下浓度的组分：0.5％～10％的蛋白保护剂、0.1％～5％的还原剂和10mmol/L～50mmol/L的缓冲液；缓冲液的pH为4.0～6.0。
[0016]具体的，本专利技术实施例在pH为4.0～6.0的酸性缓冲液体系下，添加蛋白保护剂、还原剂起到协同增效的作用，稳定保护N末端B型利钠肽原抗原，延长N末端B型利钠肽原抗原的保存时间，其中，蛋白保护剂可使稀释液基质与血清基质接近，保证N末端B型利钠肽原抗原的生物状态，能够提高N末端B型利钠肽原抗原的稳定性，还原剂可防止蛋白发生氧化，缓冲液可以为N末端B型利钠肽原抗原的稳定保存提供基础环境，更好地维持N末端B型利钠肽原抗原形态与结构的稳定性，本专利技术实施例的稀释液无需较多成分的辅助，在保证试剂性能处于最佳状态下，提高了试剂的稳定性。
[0017]在一具体实施例中，还原剂包括硫代硫酸钠、L
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丙氨酸和精氨酸中的一种或两种以上。
[0018]在一具体实施例中，缓冲液包括醋酸缓冲液、2
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(N
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吗啉)乙磺酸缓冲液、甘氨酸
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盐酸缓冲液和柠檬酸缓冲液中的一种或两种以上。
[0019]在一具体实施例中，缓冲液的pH包括但不限于4.0、4.5、5.0、5.5、6.0等。
[0020]具体的，缓冲液保证反应环境的稳定，确保检测结果不会受到波动和影响。
[0021]在一具体实施例中，蛋白保护剂包括重组人血清白蛋白、牛血清白蛋白、酪蛋白、脱氧核糖、蛋白聚糖、赤藓糖醇和海藻糖中的一种或两种以上。
[0022]在一具体实施例中，稀释液还包括浓度为5％～20％的醇类物质。
[0023]具体的，醇类物质不仅可以保持N末端B型利钠肽原抗原表面滋润，使其避免因失水而失活，而且可以降低分子运动，避免蛋白聚集。
[0024]在一具体实施例中，醇类物质包括甘油和/或乙二醇。
[0025]在一具体实施例中，稀释液还包括浓度为0.05％～0.15％的防腐剂。
[0026]具体的，防腐剂可以抑制细菌与真菌的生长，提高校准品的稳定性，延长了校准品的有效期限。
[0027]在一具体实施例中，防腐剂包括叠氮钠、苯酚、ProClin150、ProClin200、
ProClin300和ProClin5000中的一种或两种以上。
[0028]本专利技术还提供了一种N末端B型利钠肽原的稀释液的制备方法，包括以下步骤：
[0029]1)提供以下浓度的组分：0.5％～10％的蛋白保护剂、0.1％～5％的还原剂和10mmol/L～50mmol/L的缓冲液。
[0030]2)将蛋白保护剂、还原剂和缓冲液进行混合，调节pH值至4.0～6.0，得到稀释液。
[0031]在一具体实施例中，将蛋白保护剂、还原剂和缓冲液与超纯水进行混合，溶解后，调节pH值至4.0～6.0，定容至100ml，得到稀释液。
[0032]在本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种N末端B型利钠肽原的稀释液，其特征在于，所述稀释液包括以下浓度的组分：0.5％～10％的蛋白保护剂、0.1％～5％的还原剂和10mmol/L～50mmol/L的缓冲液；所述缓冲液的pH为4.0～6.0。2.根据权利要求1所述的N末端B型利钠肽原的稀释液，其特征在于，所述还原剂包括硫代硫酸钠、L
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丙氨酸和精氨酸中的一种或两种以上。3.根据权利要求1所述的N末端B型利钠肽原的稀释液，其特征在于，所述缓冲液包括醋酸缓冲液、2
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(N
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吗啉)乙磺酸缓冲液、甘氨酸
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盐酸缓冲液和柠檬酸缓冲液中的一种或两种以上。4.根据权利要求1所述的N末端B型利钠肽原的稀释液，其特征在于，所述蛋白保护剂包括重组人血清白蛋白、牛血清白蛋白、酪蛋白、脱氧核糖、蛋白聚糖、赤藓糖醇和海藻糖中的一种或两种以上。5.根据权利要求1～4中任意一项所述的N末端B型利钠肽原的稀释液，其特征在于，所述稀释液还包括浓度为5％～2...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵博文，
申请(专利权)人：深圳市科曼医疗设备有限公司，
类型：发明
国别省市：