一种超灵敏免标记荧光适配体传感体系及其制备方法和应用技术

本发明专利技术属金刚烷胺检测技术领域，提供一种超灵敏免标记荧光适配体传感体系及其制备方法和应用

【技术实现步骤摘要】
一种超灵敏免标记荧光适配体传感体系及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于金刚烷胺检测
，具体涉及一种超灵敏免标记荧光适配体传感体系及其制备方法和应用
。

技术介绍

[0002]金刚烷胺
(Amantadine
，
AMD)
是一种典型的抗病毒药物，已广泛用于动物养殖，尤其是在禽流感的防治方面应用更为广泛
。
然而，由于
AMD
的广泛和非法使用导致其残留在动物组织中，通过食物链进入人体引起紧张
、
焦虑
、
噩梦，偶尔还会产生幻觉
。
在抗病毒药物耐药性的压力下，可能会加速“超级病毒”的进化，近年来还出现了抗
AMD
药的高频率突变现象
。
因此，早在
2005
年，包括我国在内的许多国家已明令禁止在家禽养殖场中使用
AMD
，并开发了多种分析方法，对
AMD
残留物进行检测
。
目前检测
AMD
残留本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种超灵敏免标记荧光适配体传感体系，其特征在于：所述超灵敏免标记荧光适配体传感体系为金刚烷胺原寡核苷酸序列截短为特异性核酸适配体作为为识别元件，小檗碱
BBR
为信号探针，
MoS2Ns
进行信号放大；所述特异性适配体的序列如
SEQ ID NO.1
所示；所述超灵敏免标记荧光适配体传感体系的缓冲液为
BB
缓冲液，体系的
pH
值为
7.4
；小檗碱
BBR
的浓度为
20
μ
M
；特异性核酸适配体浓度为
125nM
；
MoS2Ns
浓度为
40
μ
g/mL
；体系反应时间为
20min。2.
制备权利要求1所述的超灵敏免标记荧光适配体传感体系的方法，其特征在于：具体步骤如下：（1）
MoS2Ns
合成：将
Na2MoO4·
2H2O
和硫代乙酰胺以质量比
1:2
溶解在
50mL
水中，在常温下搅拌
60min
，然后置于高压反应釜中，
220℃
条件下保持
24h
；待反应釜冷却后，取出产物，依次用去离子水和乙醇分别洗涤3次，在真空冷冻干燥机中干燥备用；（2）金刚烷胺原适配体截短：利用5’
端
、3
’
端及两端同时裁剪的方式将金刚烷胺原适配体截短获得截短适配体；通过保留合适的颈环结构，一端裁剪以3个碱基为裁剪单元，两端同时裁剪先去掉两端多余的“手臂”后以碱基对为裁剪单元进行裁剪；（3）体系荧光测定：
10
μ
L
浓度为
10
μ
mol
·
L
‑1的核酸适配体溶于
800
μ
L BB
缓冲液，加入不同浓度的
AMD

【专利技术属性】
技术研发人员：贠克明，王凌霄，兰艺凤，尉志文，张潮，马迎奇，
申请(专利权)人：山西医科大学，
类型：发明
国别省市：