包括用一个或多个可检测部分标记的一种或多种生物标志物的染色生物学样本制造技术

本公开涉及一种用一种或多种普通和/或特殊他汀类药物对生物学样本(例如，来源于生物学样品的单个连续组织切片)进行染色同时用一个或多个可检测部分附随地标记同一生物学样本而无需去除任何染色剂或评估生物学样本的染色连续组织切片的不同图像的方法。在一些实施方案中，本公开涉及用一种或多种常规染料进行染色的生物学样本，并且其中所述生物学样本进一步包含用一个或多个可检测部分标记的一种或多种生物标志物。种或多种生物标志物。种或多种生物标志物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】包括用一个或多个可检测部分标记的一种或多种生物标志物的染色生物学样本
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求于2021年1月25日提交的美国临时专利申请第63/141,091号的权益，该申请的公开内容全文通过引用并入本文。


[0003]本申请涉及一种用一种或多种常规染料对生物学样本进行染色并且用一个或多个可检测部分标记该生物学样本内的一种或多种生物标志物的方法，其中用该常规染料进行染色并且用该一个或多个可检测部分标记该生物标志物发生在同一生物学样本上。

技术介绍

[0004]免疫组织化学(IHC)是指使用对特定抗原具有特异性的抗体检测、定位和/或定量生物学样品中的抗原(例如蛋白质)的方法。IHC具有准确鉴定生物学样品中特异性蛋白质的位点的实质性优点。这也是一种检查组织本身的有效的方法。原位杂交(ISH)是指检测、定位和定量核酸的方法。IHC和ISH均可以用于各种生物学样品，诸如组织(例如，新鲜冷冻、福尔马林固定的、石蜡包埋)和细胞学样品。无论靶标是核酸还是抗原，均可以使用各种标记物(例如，显色、荧光、发光、放射标本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种使置于基底上的生物学样本内的一种或多种靶标可视化的方法，所述方法包括：(a)用第一可检测部分标记第一生物标志物，其中所述第一可检测部分具有小于约200nm的FWHM和小于约430nm或大于约670nm的最大吸光度(λ
max
)；以及(b)用具有在约400nm与约700nm之间的一个或多个峰吸收波长的至少一种常规染料对置于所述基底上的所述生物学样本进行染色，其中所述第一可检测部分的峰吸收波长和一种或多种常规染料的所述一个或多个峰吸收波长相隔至少20nm。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一可检测部分的所述FWHM小于约150nm。3.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一可检测部分的所述FWHM小于约100nm。4.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一可检测部分的所述FWHM小于约70nm。5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述一种或多种常规染料包括苏木精。6.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述一种或多种常规染料包括伊红。7.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述一种或多种常规染料包括苏木精和伊红。8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述一种或多种常规染料选自由以下项组成的组：酸性品红、阿尔新蓝8GX、茜素红S、金胺O、偶氮胭脂红B、偶氮胭脂红G、天青A、天青B、天青C、碱性品红、俾斯麦棕Y、亮甲酚蓝、亮绿、胭脂红、氯唑黑E、刚果红、甲酚紫、结晶紫、达罗红、乙基绿、固绿F C F、异硫氰酸荧光素、姬姆萨染色剂、靛蓝胭脂红、詹纳斯绿B、哲纳尔氏染色素1899、浅绿SF、孔雀石绿、马休黄、甲基橙、甲基紫2B、亚甲蓝、亚甲蓝、亚甲紫fBernthsen)、中性红、苯胺黑、尼罗蓝A、核固红、油红O、橙黄G、橙黄II、地衣红、副品红、根皮红B、蛋白银S、派洛宁B、派洛宁Y、刃天青、玫瑰红、番红O、苏丹黑B、苏丹III、苏丹IV、四铬染色(MacNeal)、硫堇、甲苯胺蓝、Weigert 1878、瑞氏色素及它们的组合。9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中用所述第一可检测部分标记所述第一生物标志物包括：(a)使所述生物学样本与抗生物标志物一抗接触；(b)使所述生物学样本与对所述抗生物标志物一抗具有特异性的抗特异性二抗接触，其中抗物种抗体直接或间接与至少一种酶缀合；以及(c)使所述生物学样本与第一可检测缀合物接触，所述第一可检测缀合物包含：(i)所述第一可检测部分和(ii)酪酰胺部分、醌甲基化物部分、或者酪酰胺部分或醌甲基化物部分的衍生物或类似物。10.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中用所述第一可检测部分标记所述第一生物标志物包括：(a)使所述生物学样本与抗生物标志物一抗接触；(b)使所述生物学样本与对抗生物标志物抗体具有特异性的抗特异性二抗接触，其中抗物种抗体直接或间接与至少一种酶缀合；(c)使所述生物学样本与第一组织反应性缀合物接触，所述第一组织反应性缀合物包含：(i)能够参与点击化学反应的一对反应性官能团的第一成员和(ii)酪酰胺部分、醌甲基化物部分、或者酪酰胺部分或醌甲基化物部分的衍生物或类似物；以及(d)使所述生物学样本与可检测缀合物接触，所述可检测缀合物包含：(i)所述第一可检测部分和(ii)所述一对反应性官能团的第二成员。11.根据权利要求1至10中任一项所述的方法，其中所述第一生物标志物为蛋白质生物标志物。
12.根据权利要求1至10中任一项所述的方法，其中所述第一生物标志物选自由以下项组成的组：PD
‑
L1、PD
‑
1、Ki
‑
67、CD3、CD8、Ki67、CD5、CD20、泛细胞角蛋白、HER2、ER、PR、p16、p63、p40、TTF
‑
1、天冬氨酸蛋白酶A、突触素和MART
‑
1/MelanA。13.根据权利要求1至10中任一项所述的方法，其中所述第一生物标志物为核酸生物标志物。14.根据权利要求1至13中任一项所述的方法，其中所述第一可检测部分选自由香豆素核、七甲川菁核和克酮酸盐核组成的组。15.根据权利要求14所述的方法，其进一步包括：用第二可检测部分标记第二生物标志物，其中所述第二可检测部分具有小于约70nm的FWHM和小于约430nm或大于约670nm的最大吸光度(λ
max
)，并且其中所述第一可检测部分和所述第二可检测部分是不同的。16.根据权利要求15所述的方法，其中所述第二可检测部分在紫外光谱内或红外光谱内。17.根据权利要求15所述的方法，其中所述第二可检测部分在紫外光谱内。18.根据权利要求15所述的方法，其中所述第一可检测部分和所述第二可检测部分具有相隔至少20nm的最大吸光度(λ
max
)。19.根据权利要求15所述的方法，其中所述第一可检测部分和所述第二可检测部分具有相隔至少30nm的最大吸光度(λ
max
)。20.根据权利要求15所述的方法，其中所述一种或多种常规染料选自由以下项组成的组：苏木精、伊红、酸性品红、阿尔新蓝8GX、茜素红S、金胺O、偶氮胭脂红B、偶氮胭脂红G、天青A、天青B、天青C、碱性品红、俾斯麦棕Y、亮甲酚蓝、亮绿、胭脂红、氯唑黑E、刚果红、甲酚紫、结晶紫、达罗红、乙基绿、固绿F C F、异硫氰酸荧光素、姬姆萨染色剂、靛蓝胭脂红、詹纳斯绿B、哲纳尔氏染色素1899、浅绿SF、孔雀石绿、马休黄、甲基橙、甲基紫2B、亚甲蓝、亚甲蓝、亚甲紫(Bernthsen)、中性红、苯胺黑、尼罗蓝A、核固红、油红O、橙黄G、橙黄II、地衣红、副品红、根皮红B、蛋白银S、派洛宁B、派洛宁Y、刃天青、玫瑰红、番红O、苏丹黑B、苏丹III、苏丹IV、四铬染色(MacNeal)、硫堇、甲苯胺蓝、Weigert 1878、瑞氏色素及它们的组合。21.一种检测置于基底上的生物学样本内的一种或多种靶标的方法，所述方法包括：(a)用第一可检测部分标记第一生物标志物标志物，其中所述第一可检测部分选自由香豆素核、七甲川菁核和克酮酸盐核组成的组；以及(b)用具有在约400nm与约700nm之间的一个或多个峰吸收波长的至少一种常规染料对置于所述基底上的所述生物学样本进行染色，其中所述第一可检测部分的峰吸收波长和一种或多种常规染料的所述一个或多个峰吸收波长相隔至少20nm。22.根据权利要求21所述的方法，其中所述第一可检测部分在紫外光谱内。23.根据权利要求21所述的方法，其中所述第一可检测部分在红外光谱内。24.根据权利要求21所述的方法，其中所述第一可检测部分具有小于约430nm的峰吸收波长。25.根据权利要求21所述的方法，其中所述第一可检测部分具有小于约400nm的峰吸收波长。26.根据权利要求21所述的方法，其中所述第一可检测部分具有大于约670nm的峰吸收波长。
27.根据权利要求21所述的方法，其中所述第一可检测部分具有大于约700nm的峰吸收波长。28.根据权利要求21所述的方法，其中所述第一可检测部分具有小于约430nm但大于约400nm的峰吸收波长，并且其中所述一种或多种常规染料的所述一个或多个峰吸收波长大于约430nm。29.根据权利要求21所述的方法，其中所述第一可检测部分具有大于约670nm但小于约400nm的峰吸收波长，并且其中所述一种或多种常规染料的所述一个或多个峰吸收波长小于约670nm。30.根据权利要求1至29中任一项所述的方法，其进一步包括：用第二可检测部分标记第二生物标志物，其中所述第二可检测部分具有小于约200nm的FWHM和小于约430nm或大于约670nm的最大吸光度(λ
max
)，并且其中所述第一可检测部分和所述第二可检测部分是不同的。31.根据权利要求30所述的方法，其中所述第二可检测部分在红外光谱内。32.根据权利要求30所述的方法，其中所述第二可检测部分在紫外光谱内。33.根据权利要求30所述的方法，其中所述第一可检测部分和所述第二可检测部分具有相隔至少20nm的最大吸光度(λ
max
)。34.根据权利要求30所述的方法，其中所述第一可检测部分和所述第二可检测部分具有相隔至少30nm的最大吸光度(λ
max
)。35.根据权利要求30所述的方法，其中所述一种或多种常规染料选自由以下项组成的组：苏木精、伊红、酸性品红、阿尔新蓝8GX、茜素红S、金胺O、偶氮胭脂红B、偶氮胭脂红G、天青A、天青B、天青C、碱性品红、俾斯麦棕Y、亮甲酚蓝、亮绿、胭脂红、氯唑黑E、刚果红、甲酚紫、结晶紫、达罗红、乙基绿、固绿F C F、异硫氰酸荧光素、姬姆萨染色剂、靛蓝胭脂红、詹纳斯绿B、哲纳尔氏染色素1899、浅绿SF、孔雀石绿、马休黄、甲基橙、甲基紫2B、亚甲蓝、亚甲蓝、亚甲紫(Bernthsen)、中性红、苯胺黑、尼罗蓝A、核固红、油红O、橙黄G、橙黄II、地衣红、副品红、根皮红B、蛋白银S、派洛宁B、派洛宁Y、刃天青、玫瑰红、番红O、苏丹黑B、苏丹III、苏丹IV、四铬染色(MacNeal)、硫堇、甲苯胺蓝、Weigert 1878、瑞氏色素及它们的组合。36.根据权利要求21所述的方法，其中所述第一可检测部分选自由以下项组成的组：
其中符号是指所述可检测部分与可检测缀合物的另一部分缀合的位点。37.一种置于基底上的染色生物学样本，所述染色生物学样本包含用第一可检测部分标记的第一生物标志物；其中所述第一可检测部分具有小于约200nm的FWHM和小于约430nm或大于约670nm的最大吸光度(λ
max
)；其中所述染色生物学样本用至少一种常规染料进行染色，其中所述至少一种常规染料具有在可见光谱内的一个或多个峰吸收波长。38.根据权利要求37所述的染色生物学样本，其中所述第一可检测部分的所述FWHM小
于约150nm。39.根据权利要求37所述的染色生物学样本，其中所述第一可检测部分的所述FWHM小于约100nm。40.根据权利要求37所述的染色生物学样本，其中所述第一可检测部分的所述FWHM小于约70nm。41.根据权利要求37所述的染色生物学样本，其中所述至少一种常规染料包括苏木精。42.根据权利要求37所述的染色生物学样本，其中所述至少一种常规染料包括伊红。43.根据权利要求37所述的染色生物学样本，其中所述至少一种常规染料包括苏木精和伊红。44.根据权利要求37至43中任一项所述的染色生物学样本，其中所述至少一种常规染料选自由以下项组成的组：酸性品红、阿尔新蓝8GX、茜素红S、金胺O、偶氮胭脂红B、偶氮胭脂红G、天青A、天青B、天青C、碱性品红、俾斯麦棕Y、亮甲酚蓝、亮绿、胭脂红、氯唑黑E、刚果红、甲酚紫、结晶紫、达罗红、乙基绿、固绿F C F、异硫氰酸荧光素、姬姆萨染色剂、靛蓝胭脂红、詹纳斯绿B、哲纳尔氏染色素1899、浅绿SF、孔雀石绿、马休黄、甲基橙、甲基紫2B、亚甲蓝、亚甲蓝、亚甲紫(Bernthsen)、中性红、苯胺黑、尼罗蓝A、核固红、油红O、橙黄G、橙黄II、地衣红、副品红、根皮红B、蛋白银S、派洛宁B、派洛宁Y、刃天青、玫瑰红、番红O、苏丹黑B、苏丹III、苏丹IV、四铬染色(MacNeal)、硫堇、甲苯胺蓝、Weigert 1878、瑞氏色素及它们的组合。45.根据权利要求1至44中任一项所述的染色生物学样本，其中所述染色生物学样本进一步包含用第二可检测部分标记的第二生物标志物，其中所述第二可检测部分具有小于约200nm的FWHM和小于约430nm或大于约670nm的最大吸光度(λ
max
)，并且其中所述第一可检测部分和所述第二可检测部分是不同的。46.根据权利要求45所述的染色生物学样本，其中所述第二可检测部分在红外光谱内。47.根据权利要求45所述的染色生物学样本，其中所述第二可检测部分在紫外光谱内。48.根据权利要求45所述的染色生物学样本，其中所述第一可检测部分和所述第二可检测部分具有相隔至少20nm的最大吸光度(λ
max
)。49.根据权利要求45所述的染色生物学样本，其中所述第一可检测部分和所述第二可检测部分具有相隔至少30nm的最大吸光度(λm
ax
)。50.根据权利要求45所述的染色生物学样本，其中一种或多种常规染料选自由以下项组成的组：苏木精、伊红、酸性品红、阿尔新蓝8GX、茜素红S、金胺O、偶氮胭脂红B、偶氮胭脂红G、天青A、天青B、天青C、碱性品红、俾斯麦棕Y、亮甲酚蓝、亮绿、胭脂红、氯唑黑E、刚果红、甲酚紫、结晶紫、达罗红、乙基绿、固绿F C F、异硫氰酸荧光素、姬姆萨染色剂、靛蓝胭脂红、詹纳斯绿B、哲纳尔氏染色素1899、浅绿SF、孔雀石绿、马休黄、甲基橙、甲基紫2B、亚甲蓝、亚甲蓝、亚甲紫(Bernthsen)、中性红、苯胺黑、尼罗蓝A、核固红、油红O、橙黄G、橙黄II、地衣红、副品红、根皮红B、蛋白银S、派洛宁B、派洛宁Y、刃天青、玫瑰红、番红O、苏丹黑B、苏丹III、苏丹IV、四铬染色(MacNeal)、硫堇、甲苯胺蓝、Weigert 1878、瑞氏色素及它们的组合。51.根据权利要求45所述的染色生物学样本，其中所述染色生物学样本进一步包含用第三可检测部分标记的第三生物标志物，其中所述第三可检测部分具有小于约200nm的FWHM和小于约430nm或大于约670nm的最大吸光度(λ
max
)，并且其中所述第一可检测部分、所
述第二可检测部分和所述第三可检测部分是不同的。52.根据权利要求51所述的染色生物学样本，其中所述第三可检测部分在红外光谱内。53.根据权利要求51所述的染色生物学样本，其中所述第三可检测部分在紫外光谱内。54.根据权利要求51所述的染色生物学样本，其中所述第一可检测部分、所述第二可检测部分和所述第三可检测部分具有相隔至少20nm的最大吸光度(λ
max
)。55.根据权利要求51所述的染色生物学样本，其中所述第一可检测部分、所述第二可检测部分和所述第三可检测部分具有相隔至少30nm的最大吸光度(λ

【专利技术属性】
技术研发人员：D，
申请(专利权)人：文塔纳医疗系统公司，
类型：发明
国别省市：