一种通脉养心丸的质量检测方法技术

本发明专利技术属于中药质量检测领域，具体涉及一种通脉养心丸的质量检测方法，包括如下步骤，制备供试品溶液，所述供试品溶液为通脉养心丸供试品溶液；对上述通脉养心丸供试品溶液进行UPLC

【技术实现步骤摘要】
一种通脉养心丸的质量检测方法


[0001]本专利技术属于中药质量检测领域，具体涉及一种通脉养心丸的质量检测方法。

技术介绍

[0002]通脉养心丸是基于张仲景《伤寒论》原方“炙甘草汤”，由11味中药组成(君药：甘草、地黄；臣药：何首乌、党参、麦冬、五味子；佐药：龟甲、阿胶、鸡血藤；使药：大枣、桂枝)，具有益气养阴、通脉止痛的功效，临床主要用于胸痹心痛、心悸怔忡等证的治疗。
[0003]目前，通脉养心丸的研究主要集中在药效学及某些成分作用机制的研究，对通脉养心丸的药效物质基础研究较少。然而，中药从药材到发挥药效，经历：药材
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饮片
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复方制剂/汤药
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体内
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效应器官
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发挥药效，其本质是化学成分群的传递和变化，直至成为药效成分并与效应器官结合发挥治疗作用。此外，中药的成分数量繁多复杂、种类繁杂多样、含量差异悬殊，严重限制中药物质基础研究。
[0004]质量检测是保证中药质量一致性的重要手段，CN 107703244 A公布了一种中药组合物中14种化学成分含量的测定方法，采用HPLC
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MS/MS法，同时测定中药组合物中14种化学成分的含量；所述中药组合物为通脉养心丸；所述14种化学成分包括：大黄素、党参炔苷、二苯乙烯苷、甘草酸、甘草苷、甘草素、虎杖苷、芦丁、异甘草素、芒柄花苷、毛蕊花糖苷、没食子酸、五味子醇甲、大黄酸。所述方法为，先建立14个化学成分的标准曲线，然后获得通脉养心丸中各14种化学成分的多反应离子色谱图；最后根据通脉养心丸中各化学成分的多反应离子色谱图的峰面积，及各化学成分的标准曲线，确定通脉养心丸中各化学成分的含量。其采用的色谱条件为色谱柱：采用十八烷基硅烷键合硅胶的固定相；流动相：A相为0.1％甲酸
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水，B相为乙腈；梯度洗脱；柱温：30℃；流速：0.3mL/分钟；进样量：10μL。洗脱程序为：0
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10min，10％
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85％B；10
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13min，85％
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95％B；13
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19min，95％
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95％。上述方法只能检测14个化合物，且化合物的分离度并不足够高。
[0005]CN104777247A公开了一种确定中药中具有心肌保护和抗炎作用的活性成分的方法，包括以下步骤：(1)通过制备液相色谱获得目标中药各分离组分；(2)通过心肌细胞抗氧化模型实验确定具有心肌保护作用的活性成分；(3)通过巨噬细胞抗炎模型实验确定具有抗炎作用的活性成分。
[0006]其检测条件为：色谱柱型号：SN SAGH01324，流动相为0.1％甲酸
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水(A)、乙腈(B)，流速为10mL/分钟，柱温为室温，检测波长为210nm、230nm、250nm、254nm、280nm。洗脱梯度如下：0分钟A:B＝95:5；60分钟A:B＝10:90；72分钟A:B＝5:95；82分钟A:B＝5:95。除去量太少的几个组分之外，共获得18个分离组分。检测的有效成分太少，很难有效的评价通脉养心丸的质量。

技术实现思路

[0007]本专利技术要解决的技术问题是提供一种通脉养心丸的质量检测方法，其可以检测出较多的有效成分，且各成分的分离度较好，可以有效的提高通脉养心丸的质量评价能力。
[0008]本专利技术的内容包括一种通脉养心丸的质量检测方法，包括如下步骤，制备供试品溶液，所述供试品溶液为通脉养心丸供试品溶液，制备方法为，将通脉养心丸和甲醇混合，提取，静置，过滤，分离，取上清液，得到通脉养心丸供试品溶液；
[0009]对上述通脉养心丸供试品溶液进行UPLC
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Q
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TOF
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MS检测，色谱条件为：
[0010]柱温30℃，流速0.3mL/min，进样量2μL，检测波长254nm，流动相梯度：A相0.1％甲酸水溶液，B相乙腈，洗脱程序为0min
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2min
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8min
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17min
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25min
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44min
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54min，15％
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21％
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24％
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38％
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44％
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65％
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77
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95％。
[0011]优选的，所述UPLC
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Q
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TOF
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MS检测的质谱条件为：质谱检测模式为ESI
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Negative/Positive ion mode，质谱参数如下表所示：
[0012]MS参数参数值MS/MS参数参数值TOF mass range50～1500MS/MS mass range50～1250Ion Source Gas 1(psi)50Declustering Potential(V)100Ion Source Gas 2(psi)50Collision Energy(eV)
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35/40Curtain Gas(psi)30Collision Energy Spread(eV)20Ion Spray Voltage Floating(V)
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4500/5000Ion Release Delay(ms)30Ion Source Temperature(℃)450Ion Release Width(ms)15Declustering Potential(V)100
ꢀꢀ
Collision Energy(eV)10
ꢀꢀ
。
[0013]优选的，所述色谱条件中，色谱柱为：WatersACQUITYUPLC BEH C181.7μm 2.1*100mm。
[0014]优选的，所述甲醇的体积浓度为50％，通脉养心丸和甲醇的重量体积比为200mL：25mL。
[0015]优选的，所述提取方式为超声提取。
[0016]优选的，所述供试品溶液还包括血清样本溶液和心脏组织样本溶液，所述质量检测方法还包括对血清样本溶液和心脏组织样本溶液进行UPLC
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Q
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TOF
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MS检测。
[0017]优选的，所述血清样本溶液的制备方法为，将实验动物喂食通脉养心丸，一段时间后，取血，分离血清，得到血清样本，将血清样本和甲醇混合，离心，取上清液，浓缩干燥，将浓缩干燥后的样品加甲醇复溶，离心，取上清液，得到血清样本溶液。
[0018]优选的，所述心脏组织样本溶液的制备方法为，将实验动物喂食通脉养心丸，一段时间后，处死，取心脏组织，将心脏组织和甲醇混合，组织研磨，离心，取上清液，浓缩干燥，将浓缩干燥后的样品加甲醇复溶，离心，取上清液，得到心脏组织样本溶液<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种通脉养心丸的质量检测方法，其特征是，包括如下步骤，制备供试品溶液，所述供试品溶液为通脉养心丸供试品溶液，制备方法为，将通脉养心丸和甲醇混合，提取，静置，过滤，分离，取上清液，得到通脉养心丸供试品溶液；对上述通脉养心丸供试品溶液进行UPLC
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Q
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TOF
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MS检测，色谱条件为：柱温30℃，流速0.3mL/min，进样量2μL，检测波长254nm，流动相梯度：A相0.1％甲酸水溶液，B相乙腈，洗脱程序为0min
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2min
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8min
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17min
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25min
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44min
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54min，15％
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21％
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24％
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38％
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44％
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65％
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77
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95％。2.如权利要求1所述的通脉养心丸的质量检测方法，其特征是，所述UPLC
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Q
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TOF
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MS检测的质谱条件为：质谱检测模式为ESI
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Negative/Positive ion mode，质谱参数如下表所示：
MS参数参数值MS/MS参数参数值TOF mass range50～1500MS/MS mass range50～1250Ion Source Gas 1(psi)50Declustering Potential(V)100Ion Source Gas 2(psi)50Collisi on Energy(eV)
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35/40Curtain Gas(psi...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈婷，张伟，秦灏学，唐艳，刘海瑞，周榆霖，
申请(专利权)人：湖南中医药大学，
类型：发明
国别省市：