一种可用于混样筛查J亚群禽白血病病毒的检测引物、试剂盒及方法技术

技术编号:39406077 阅读:25 留言:0更新日期:2023-11-19 15:58
本发明专利技术公开了一种可用于混样筛查J亚群禽白血病病毒的检测引物、试剂盒及方法。该检测引物包括上游引物ALV

【技术实现步骤摘要】
一种可用于混样筛查J亚群禽白血病病毒的检测引物、试剂盒及方法


[0001]本专利技术属于生物
,特别涉及一种可用于混样筛查J亚群禽白血病病毒的检测引物、试剂盒及方法。

技术介绍

[0002]禽白血病(Avian leukosis,AL)是由禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)引起的一类禽肿瘤性疾病。ALV属于反转录病毒科、α反转录病毒属,其基因组由两条完全相同的单股正链线性RNA组成,全长约7.2~7.9kb。根据病毒传播方式,ALV可分为内源性病毒和外源性病毒。内源性病毒为整合于宿主细胞染色体中的完整或缺失的前病毒DNA序列,借助宿主染色体实现垂直传播,致病性极低或无致病性;外源性病毒以传染性病毒粒子的形式存在,可垂直传播,也可水平传播。根据宿主范围、囊膜蛋白特性、交叉中和反应特性,ALV可分为A~K共11个不同亚群,其中以J亚群禽白血病病毒(ALV

J)流行最广、危害最大。
[0003]病毒分离法是目前检测外源性ALV的金标准,可从鸡的血液、组织、蛋清、精液、泄殖腔拭子、胎粪等样本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种可用于混样筛查J亚群禽白血病病毒的检测引物,其特征在于:包括上游引物ALV

J

F和下游引物ALV

J

R,核苷酸序列如下所示:ALV

J

F:5
′‑
GGATGAGGTGACTAAGAAAGAT
‑3′
;ALV

J

R:5
′‑
CAACGGAAATAATAACCACGC
‑3′
。2.一种可用于混样筛查J亚群禽白血病病毒的检测试剂盒,其特征在于:包括权利要求1所述的检测引物。3.根据权利要求2所述的检测试剂盒,其特征在于:所述的试剂盒还包括qPCR预混液和/或阳性对照标准品。4.根据权利要求3所述的检测试剂盒,其特征在于:所述的qPCR预混液为qPCRGreen Master Mix;所述的阳性对照标准品为J亚群禽白血病病毒的基因组DNA、序列如SEQ ID NO.3所示的DNA片段、以及含有SEQ ID NO.3所示序列的载体中的至少一种。5.权利要求1所述的可用于混样筛查J亚群禽白血病病毒的检测引物或权利要求2~4任一项所述的可用于混样筛查J亚群禽白血病病毒的检测试剂盒在非疾病诊断治疗目的的检测J亚群禽白血病病毒中的应用。6.一种非疾病诊断治疗目的的检测J亚群禽白血病病毒的方法,其特征在于,通过如下任一种方式实现:S1、单个样品检测(1)病毒DNA提取:提取待测样品的DNA作为DNA模板;(2)扩增检测:配制荧光定量PCR反应体系进行扩增反应和检测;(3)结果判定:若待测样品的检测Ct值>35,则判定为ALV

J阴性;若待测样品的检测Ct值<35,则判定为ALV

J阳性;S2、混合血样核酸筛查(I)病毒DNA提取:将n份待测样品混合,得到混合样本;然后提取混合样本的DNA作为...

【专利技术属性】
技术研发人员:曹伟胜李琪董欣怡
申请(专利权)人:华南农业大学
类型:发明
国别省市:

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