一种暗褐脉柄牛肝菌菌株Ｖ239.04及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种暗褐脉柄牛肝菌菌株V239.04及其应用，所述菌株V239.04于2023年05月10日保藏在广东省微生物菌种保藏中心GDMCC，保藏编号GDMCC NO.63447。NO.63447。

【技术实现步骤摘要】
一种暗褐脉柄牛肝菌菌株V239.04及其应用


[0001]本专利技术涉及食用菌
，具体而言，涉及一种暗褐脉柄牛肝菌菌株V239.04及其应用。

技术介绍

[0002]暗褐脉柄牛肝菌(Phlebopus portentosus)，又名暗褐网柄牛肝菌，俗名黑牛肝菌，隶属于牛肝菌目(Boletales)，小牛肝菌科(Boletinellaceae)，脉柄牛肝菌属(Phlebopus)。暗褐脉柄牛肝菌目前已成功实现了人工栽培，并能够进行工厂化的大规模量产。
[0003]从暗褐脉柄牛肝菌的生物学和生态学特性来看，该物种在野外主要分布于热带地区，且《暗褐网柄牛肝菌人工驯化研究的回顾与前瞻》(曹旸等人，菌物学报，2021年12期，第3064
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3080页)、云南省地方标准《DB53T746
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2016暗褐网柄牛肝菌人工栽培技术规程》以及专利CN101524035B和CN103766137B多篇现有技术中报道其最适生长温度为30℃，一般不低于26℃，属于高温菇类。从大规模量产的生产成本出发，若能获得适应较低温度生长出菇的菌株，将大大降低生产过程中用于加温的能源成本，为暗褐脉柄牛肝菌在全国范围内的种植奠定基础。
[0004]因此，本领域中存在对适宜于工厂化栽培，能够适应较低温度出菇的暗褐脉柄牛肝菌菌株的需要。

技术实现思路

[0005]为了解决上述问题，在第一个方面，本专利技术的目的在于提供一种暗褐脉柄牛肝菌菌株V239.04，所述菌株V239.04于2023年05月10日保藏在广东省微生物菌种保藏中心GDMCC，保藏编号GDMCC NO.63447。
[0006]在第二个方面，本专利技术的目的在于提供如第一个方面所述的暗褐脉柄牛肝菌菌株V239.04产生的原生质体、孢子、子实体或菌丝体。
[0007]在第三个方面，本专利技术的目的在于提供包含如第一个方面所述的暗褐脉柄牛肝菌菌株V239.04或如第二个方面所述的原生质体、孢子、子实体或菌丝体的菌棒。
[0008]在第四个方面，本专利技术的目的在于提供包含如第一个方面所述的暗褐脉柄牛肝菌菌株V239.04或如第二个方面所述的原生质体、孢子、子实体或菌丝体的食品制品。在任选的实施方案中，所述食品制品可以是营养品、调味品或添加剂。在可选的实施方案中，所述食品制品可以是菌菇制品。
[0009]在第五个方面，本专利技术的目的在于提供一种栽培暗褐脉柄牛肝菌的方法，所述方法包括使用如第一个方面所述的暗褐脉柄牛肝菌菌株V239.04或如第二个方面所述的原生质体、孢子、子实体或菌丝体栽培暗褐脉柄牛肝菌。
[0010]在第六个方面，本专利技术的目的在于提供如第一个方面所述的暗褐脉柄牛肝菌菌株V239.04在牛肝菌育种中的应用。在优选的实施方案中，所述育种可以为自交育种或杂交育
种。
[0011]在第七个方面，本专利技术的目的在于提供如第一个方面所述的暗褐脉柄牛肝菌菌株V239.04或如第二个方面所述的原生质体、孢子、子实体或菌丝体在生产食品制品中的应用。在任选的实施方案中，所述食品制品可以是营养品、调味品或添加剂。在可选的实施方案中，所述食品制品可以是菌菇制品。
[0012]在具体的实施方案中，如第一个方面所述的暗褐脉柄牛肝菌菌株V239.04或如第二个方面所述的原生质体、孢子、子实体或菌丝体可以包括在所述食品制品的原料和/或成品中。
[0013]与现有技术相比，本专利技术的暗褐脉柄牛肝菌菌株V239.04具有以下优点：
[0014](1)本专利技术菌株遗传稳定，活力强，生长速度快，菌盖深褐色，菌柄黄色，在出菇管理过程中温度可低至21～26℃等特点。
[0015](2)由于该菌株在出菇管理过程中能适应较低的温度，可有效降低生产成本，属于优良菌株，具有较高的商业价值。
具体实施方式
[0016]为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本专利技术的一部分实施例，而不是全部的实施例。
[0017]基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0018]下面通过具体实施方式来进一步说明本专利技术的技术方案。
[0019]除暗褐脉柄牛肝菌菌株外，实施例中所用的试剂和设备等均为可以通过市售购买获得的常规产品。
[0020]实施例1：菌株V239.04的选育
[0021]菌株V239.04的选育过程，包括以下步骤：
[0022](1)采集自中国云南省西双版纳傣族自治州景洪市勐养镇的多株牛肝菌的子实体；
[0023](2)对上述子实体进行表面消毒，在超净工作台上，以无菌手术刀挑取子实体中心位置，菌柄菌盖交界处组织块；
[0024](3)将上述组织块置于固体培养基进行培养(配方：马铃薯200g(水煮浸出液)、葡萄糖20.0g、牛肉浸膏2.0g、MgSO
4 1.0g、KH2PO
4 1.0g，加蒸馏水定容至1000mL，琼脂16.0g，pH值自然)，获得多株菌丝体；
[0025](4)将上述菌丝体作为母种，进行比较栽培试验，并在其菌种培养、出菇管理的各个阶段进行降温试验，最终选育获得在出菇管理过程中能适应低至21～26℃温度的菌株V239.04。
[0026]实施例2菌株V239.04的物种分类学分子鉴定
[0027](1)基因组DNA制备：取上述菌丝体置于1.5ml的离心管中，采用改进过的CTAB法提取基因组DNA，具体包括以下步骤：
[0028]a.向上述加入标本的离心管中加入少许石英砂，再加入250μL的2
×
CTAB裂解液，
用研磨棒进行充分研磨，直至呈匀浆状，再加入600μL的2
×
CTAB裂解液，颠倒混匀；
[0029]b.将装有研磨充分标本液的离心管置于65℃水浴1小时(其间每10分钟翻转离心管1次)；
[0030]c.加入苯酚和氯仿各300μL，翻转离心管几次，13000rpm离心10分钟；
[0031]d.收集上层水相，转至新的1.5mL离心管中；
[0032]e.重复c
–
d步2至3次，直至两相界面上无沉淀为止；
[0033]f.加入等体积的氯仿抽提一次，收集上层水相；
[0034]g.加入0.5
–
1倍体积预冷的异丙醇(或2倍体积的无水乙醇)，4℃下13000rpm离心10分钟；
[0035]h.小心倒去上清液，将离心管扣压在干净的面巾纸上，吸干残留的上清液；
[0036]i.加入1mL预冷的75％乙醇，翻转离心管几次，13000rpm离心10分钟，弃除上清液，重复两次；
[0037]j.置于室温或真空系统中干燥；
[0038]k.加入50μL无菌水室温溶解，于<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种暗褐脉柄牛肝菌(Phlebopus portentosus)菌株V239.04，其特征在于，所述菌株V239.04于2023年05月10日保藏在广东省微生物菌种保藏中心GDMCC，保藏编号GDMCC NO.63447。2.如权利要求1所述的暗褐脉柄牛肝菌菌株V239.04产生的原生质体、孢子、子实体或菌丝体。3.包含如权利要求1所述的暗褐脉柄牛肝菌菌株V239.04或如权利要求2所述的原生质体、孢子、子实体或菌丝体的菌棒。4.包含如权利要求1所述的暗褐脉柄牛肝菌菌株V239.04或如权利要求2所述的原生质体、孢子、子实体或菌丝体的食品制品。5.如权利要求4所述的食品制品，其特征在于，所述食品制品是营养品、调味品或添加剂。6.如权利要求4所述的食品制品，其特征在于，所述食品制品是菌菇制品。7.一种栽培暗褐脉柄牛肝菌的方法，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹旸，罗顺珍，纪开萍，纪光燕，李文，果花，代静，
申请(专利权)人：景洪宏臻农业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：