鱼鳔糖胺聚糖在制备肠道损伤药物中的应用制造技术

本发明专利技术属于生物医药技术领域，涉及鱼鳔糖胺聚糖在制备肠道损伤药物中的应用。本发明专利技术所述鱼鳔糖胺聚糖对小鼠肠道损伤的干预效果明显，可改善结肠长度变短，结肠隐窝紊乱，炎症浸润等病理损伤。试验数据显示，鱼鳔糖胺聚糖可使机体炎症因子IL

【技术实现步骤摘要】
鱼鳔糖胺聚糖在制备肠道损伤药物中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，涉及鱼鳔糖胺聚糖在制备肠道损伤药物中的应用。

技术介绍

[0002]食物中砷污染主要来源于含砷农药、环境砷污染、含砷的原料等，并以不同形态存在于食物中，砷可以通过饮水、食物经消化道进入体内，长期摄入会导致砷引起的包括肠道损伤的各种身体毒性。砷常常以化合物的形式存在，包括无机砷以及有机砷，不同形态的砷对人体有不同毒性作用，也正由于形态的多样，砷具体的毒性机制仍存在很多值得探究的地方。胃肠道作为人体重要的消化代谢器官，不仅可以消化吸收营养成分，也更是作为重金属排泄环节中一个重要中转点，近年来砷致肠道相关毒性作用也逐渐引起关注，因此发掘出可预防砷致肠道损伤的天然活性物质以及阐明其具体的解毒机制对于预防重金属带来的慢性损伤有着重要的意义和价值。
[0003]鱼鳔是鱼类调节身体沉浮的重要器官，是一种低脂肪高蛋白原料，具有活血化瘀，美容养颜等各种功效。鱼鳔多糖是鱼鳔中的活性成分之一，是含有以
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4GlcUAβ1
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3GalNAc(4S)β1
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为主链的大分子糖胺聚糖，是一种硫酸软骨素A类似物，具有广泛的应用潜力。
[0004]现有技术中CN103788222B公开了Fuc3S4S取代的低聚糖胺聚糖及其药物组合物可用于制备抗血栓药物。CN110776578B公开了一种低分子海参糖胺聚糖，其具有抗炎、抗血管病变、抗肿瘤或抗肿瘤转移以及改善学习记忆能力的作用。鱼鳔功效溯源及其现代研究进展中，鱼鳔酶解蛋白中释放的生物活性肽显示出多种生物活性，包括抗高血压、抗氧化、增强免疫活性，促进细胞生长发育、免疫，并且降低炎症反应，影响肠道免疫球蛋白（IgA）的水平。在鱼鳔中已鉴定出了2种糖胺聚糖，即分子量为18
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40KD的硫酸软骨素和硫酸乙酰肝素，可以介导组织修复、再生、伤口愈合。
[0005]现有技术已经发现糖胺聚糖在抗癌、抗肿瘤、抗血栓、抗氧化等方面表现出较强的活性，展现出了良好的应用开发前景，但是目前还没有糖胺聚糖应用在肠道损伤上的报道，因此，开发鱼鳔糖胺聚糖在制备肠道损伤药物中的应用具有较大的开发意义和市场需求。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种鱼鳔糖胺聚糖在保护肠道损伤的用途。本专利技术通过以鱼鳔为原料，加入含碱性蛋白酶酶解，阴离子交换层析柱纯化，无水乙醇进行醇沉，浓缩冷冻干燥得所述鱼鳔糖胺聚糖，进一步通过鱼鳔糖胺聚糖保护小鼠肠道损伤试验中，验证了鱼鳔糖胺聚糖在保护肠道损伤上干预效果明显，为研究肠道损伤的有效治疗和预防提供了技术支撑。
[0007]基于上述目的，本专利技术通过提供鱼鳔糖胺聚糖在制备肠道损伤药物中的应用，来解决所属领域中的这种需要。
[0008]一方面，本专利技术涉及糖胺聚糖在制备损伤治疗药物中的应用，所述糖胺聚糖为鱼
鳔糖胺聚糖，所述鱼鳔糖胺聚糖的制备方法：碱性蛋白酶酶解鱼鳔后，离心取上清，阴离子交换层析柱纯化洗脱，洗脱液采用不同浓度氯化钠溶液，获得所述鱼鳔糖胺聚糖；所述鱼鳔糖胺聚糖用于降低机体血液中的炎症水平，降低肠道通透性，改善结肠长度缩短，改善结肠隐窝结构紊乱，改善炎症浸润，缓解肠道氧化应激损伤。
[0009]进一步地，本专利技术提供的糖胺聚糖在制备肠道损伤治疗药物中的应用，所述鱼鳔糖胺聚糖保护肠道损伤的使用浓度为50mg/kg
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200mg/kg。
[0010]进一步地，本专利技术提供的糖胺聚糖在制备肠道损伤治疗药物中的应用，所述碱性蛋白酶酶解条件为：将鱼鳔干燥粉碎后加入含碱性蛋白酶的氯化钠溶液，鱼鳔悬浮液中固液比为1:10，氯化钠添加量为6mg/mL，碱性蛋白酶添加量为5.4mg/mL，于55℃水浴搅拌酶解20h，然后灭酶活，4000rpm/min，5min离心取上清得鱼鳔酶解产物。
[0011]进一步地，本专利技术提供的糖胺聚糖在制备肠道损伤治疗药物中的应用，所述鱼鳔糖胺聚糖的洗脱条件为：采用0.3mol/L，0.9mol/L和1.1mol/L不同浓度氯化钠溶液洗脱，使用填料为Amberlite
™
FPA98Cl阴离子交换层析柱吸附纯化，所述鱼鳔糖胺聚糖为1.1mol/L氯化钠溶液洗脱得到的组分。
[0012]另一方面，本专利技术涉及一种治疗肠道损伤的药物，其组分包括鱼鳔糖胺聚糖，以及医学上可接受的辅料。
[0013]本专利技术中，术语“药学上可接受的”是指对接受治疗的受试者的一般健康情况没有长期的有害影响。
[0014]本专利技术中，术语“药学上可接受的辅料”是指保留了鱼鳔糖胺聚糖的生物效力，并且在生物学或其它方面上没有不良作用的辅料，药学上可接受的辅料包括赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、包衣剂、溶剂、助溶剂、助悬剂、粘稠剂和表面活性剂中的一种或多种。例如，赋形剂，如水、生理盐水等；粘合剂，如纤维素衍生物、藻酸盐、明胶和/或聚乙烯吡咯烷酮；湿润剂，如甘油；崩解剂，如琼脂、碳酸钙和/或碳酸氢钠；表面活性剂，如十六烷醇；润滑剂，如滑石粉、硬脂酸钙/镁、聚乙二醇等。
[0015]另外，本专利技术的药物组合物还可以进一步含有其它辅料，如香味剂、甜味剂等。根据本领域的公知技术，可以根据治疗目的、给药途径的需要将药物组合物制成各种剂型，优选该组合物为单位给药剂量形式，如冻干剂、片剂、胶囊、粉剂、乳液剂、水针剂或喷雾剂，更优选该药物组合物为注射剂型（如冻干粉针剂）或口服剂型，如片剂、胶囊。药物可以通过常规途径施用，特别是肠内，例如口服，以片剂或胶囊剂形式，或非肠道施用，例如以可注射溶液剂或混悬剂形式，局部施用，例如以洗剂或凝胶剂形式。
[0016]与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果或者优点：本专利技术所述鱼鳔糖胺聚糖可有效改善小鼠肠道炎症及氧化损伤。本专利技术发现，鱼鳔糖胺聚糖可以改善机体炎症因子IL
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2和内毒素含量升高，缓解了炎症水平以及肠道通透性的增加，并且改善了空肠和结肠隐窝紊乱，炎症浸润等微观病理损伤；同时结肠组织中T
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SOD活性和GSH含量显著上升，MPO活性和MDA含量显著下降，以此减缓了肠道的氧化应激和炎症的发生。鱼鳔糖胺聚糖对MPO，T
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SOD活性及GSH含量变化的干预作用中呈现出剂量效应，即随着剂量的增加，其对MPO酶活性上升，T
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SOD酶活性下降和GSH含量下降的干预作用更明显。该干预作用与糖胺聚糖的抗氧化，抗炎和潜在益生元特性有关。
附图说明
[0017]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例。
[0018]图1是检测鱼鳔糖胺聚糖对小鼠炎症因子IL
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2含量变化的统计分析图。C表示对照组IL
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2含量；M表示小鼠的模型组IL
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2含量；GL表示低剂量试验组的IL...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.糖胺聚糖在制备肠道损伤治疗药物中的应用，其特征在于，所述糖胺聚糖为鱼鳔糖胺聚糖，所述鱼鳔糖胺聚糖的制备方法：碱性蛋白酶酶解鱼鳔后，离心取上清，阴离子交换层析柱纯化洗脱，洗脱液采用不同浓度氯化钠溶液，获得所述鱼鳔糖胺聚糖；所述鱼鳔糖胺聚糖用于降低机体血液中的炎症水平，降低肠道通透性，改善结肠长度缩短，改善结肠隐窝结构紊乱，改善炎症浸润，缓解肠道氧化应激损伤。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述鱼鳔糖胺聚糖保护肠道损伤的使用浓度为50mg/kg
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200mg/kg。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述碱性蛋白酶酶解条件为：将鱼鳔干燥粉碎后加入含碱性蛋白酶的氯化...

【专利技术属性】
技术研发人员：钟赛意，欧洁莹，刘寿春，汪卓，黄后培，钟艾彤，郭晓琳，张杰良，李瑞，刘晓菲，
申请(专利权)人：广东海洋大学，
类型：发明
国别省市：