一种生产炭疽霉素和制造技术

本发明专利技术公开了一种生产炭疽霉素和

【技术实现步骤摘要】
一种生产炭疽霉素和
β
‑
玉红霉素的新型海洋链霉菌及其应用


[0001]本专利技术属于微生物
，具体涉及一种生产炭疽霉素（
anthracimycin
）和
β
‑
玉红霉素（
β
‑
rubromycin
）的新型海洋链霉菌（
Streptomycessp.
）
SCSIO K001
及其应用
。

技术介绍

[0002]近年来，病原菌耐药性愈发严重，这迫切需要研究和发现产生新的活性次级代谢物的新型微生物，以对抗新发疾病和耐药性病原菌的传播
。
由于海洋生境的多样性和独特的生态因素，海洋微生物被认为是多种生物活性次生代谢物的优秀生产者，为开发具有独特结构和强生物活性的新型化合物提供重要的菌种资源
。
[0003]炭疽霉素（
anthracimycin
，
CAS No.:1452849
‑
94
‑3）是近年来发现的一种来自海洋微生物的新型化合物，它可以帮助研究者开发治疗炭疽热及其它疾病等的新型疗法，比如耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引发的疾病等
。
炭疽霉素氯化后产生的二氯衍生物不但对革兰氏阳性菌
(
如炭疽菌
)
有良好的抑制活性，还对某些革兰氏阴性菌有抑制活性
。
炭疽霉素为未来开发新型
MRSA
抗生素提供了一个新骨架
。
β
‑
玉红霉素（
β
‑
rubromycin
，
CAS No.:27267
‑
70
‑5）是从链霉菌中分离出来的一种细菌代谢物，具有独特的螺旋酮结构，它具有抑制
HIV
‑1逆转录酶活性，对革兰氏阳性细菌等多种生物具有抗菌杀菌活性，是一种广谱的新型抗生素
。
此外，它还是一种高效的人类端粒酶抑制剂，能特异性的抑制癌细胞的端粒酶活性，诱导癌细胞的衰老从而导致癌细胞的死亡，达到治疗恶性肿瘤的目的；目前
β
‑
玉红霉素被认为是一种有前景的抗癌药物先导物，具有重要的研究价值
。

技术实现思路

[0004]本专利技术的第一个目的是提供一株生产炭疽霉素和
β
‑
玉红霉素的新型海洋链霉菌（
Streptomycessp.
）
SCSIO K001
，其保藏编号为：
CGMCC No.27800。
该链霉菌
SCSIO K001
是从我国广东珠江口沉积物中分离得到，其菌株的分类学特征是：在
2216E
固体培养基上菌落黑褐色，基内菌丝深紫色，粉状孢子（如图1所示）；菌落干燥，单菌落一般呈圆形，较紧密，不易扩散，中间凸起，基内菌丝与气生菌丝结合紧密不易挑起，末期产孢子后，孢子易刮取
。
在
ISP2
培养基上，菌落灰白色，边缘稍微呈辐射状，菌落紧密，中间凸起，较厚，后期菌落灰色，向四周扩散，粉状孢子，基内菌丝颜色为紫色；在
ISP4
培养基上菌落白色，菌丝体较厚，中间凸起，基内菌丝周围灰褐色，后期菌落灰色，粉状孢子；在
Nutrient Agar
培养基上气生菌丝灰色，基内菌丝周围灰白色，粉状孢子；在
TSA
培养基上，菌落白色，菌落边缘出现灰白色，基内菌丝黄褐色，孢子产生较少
。
[0005]菌株
SCSIO K001
在
0~45℃、pH 5.0~11.0
和
0~10% (w/v) NaCl
条件下生长
。
吐温
80
，淀粉水解阳性，而吐温
20
，
40
，和
60
，纤维素水解，牛奶凝固和液化，明胶水解为阴性
。
[0006]6种指示菌的抗菌活性检测结果显示其对金黄色葡萄球菌
、
枯草芽孢杆菌和黑曲霉具有较强的抗菌活性，对铜绿假单胞菌
、TB
结核杆菌
、
白色念珠菌活性不显著或无活性
。
[0007]使用
EzTaxon
‑
e
服务器
(www.ezbiocloud.net/identify)
进行
16S rRNA
序列相似
性分析，菌株
SCSIO K001
与链霉菌
Streptomyces collinusCGMCC 4.1623
T
的相似性为
98.7%。
系统发育分析也显示菌株
SCSIO K001
与链霉菌
S. collinusCGMCC 4.1623
T
进化距离最近（如图2所示）
。
此外，菌株
SCSIO K001
与最相似菌种
S. collinusCGMCC 4.1623
T
的平均核苷酸同源性（
ANI
）和
DNA
‑
DNA
杂交值（
dDDH
）分别为
82.5%
和
26.2%
，远低于原核微生物物种划分的标准阈值（国际分类学公认的物种间区分阈值
ANI 95%~96%
；
dDDH 70%
）
。
因此可以确定其为一个链霉菌新物种
。
[0008]本专利技术的第二个目的是提供链霉菌（
Streptomycessp.
）
SCSIO K001
在生产炭疽霉素和
β
‑
玉红霉素中的应用
。
[0009]本专利技术的第三个目的是提供一种利用链霉菌（
Streptomycessp.
）
SCSIO K001
生产炭疽霉素和
β
‑
玉红霉素的方法，其包括以下步骤：制备链霉菌
SCSIO K001
的发酵培养物；将发酵培养物的发酵液和菌丝体分离，发酵液经丁酮萃取，丁酮萃取液经浓缩后得到浸膏
A
；菌丝体用丙酮浸取，丙酮浸取液经浓缩后得到浸膏
B
；将浸膏
A 与浸膏
B 合并的粗提物经硅胶柱层析和半制备
HPLC
纯化后，得到化合物炭疽霉素和
β
‑
玉红霉素
。
[0010]所述的发酵培养物是通过以下方法制备：将链霉菌
SCSIO K001
接入种子培养基中培养
24~48
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一株生产炭疽霉素和
β
‑
玉红霉素的新型海洋链霉菌（
Streptomyces sp.
）
SCSIO K001
，其保藏编号为：
CGMCC No.27800。2.
权利要求1所述的链霉菌（
Streptomyces sp.
）
SCSIO K001
在生产炭疽霉素和
β
‑
玉红霉素中的应用
。3.
一种利用权利要求1所述的链霉菌（
Streptomyces sp.
）
SCSIO K001
生产炭疽霉素和
β
‑
玉红霉素的方法，其特征在于，包括以下步骤：制备链霉菌
SCSIO K001
的发酵培养物；将发酵培养物的发酵液和菌丝体分离，发酵液经丁酮萃取，丁酮萃取液经浓缩后得到浸膏
A
；菌丝体用丙酮浸取，丙酮浸取液经浓缩后得到浸膏
B
；将浸膏
A 与浸膏
B 合并的粗提物经硅胶柱层析和半制备
HPLC
纯化后，得到化合物炭疽霉素和
β
‑
玉红霉素
。4.
根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的发酵培养物是通过以下方法制备：将链霉菌
SCSIO K001
接入种子培养基中培养
24~48
小时，获得种子液，将种子液接入发酵培养基中培养
144~240
小时，得到发酵培养物
。5.
根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述链霉菌
SCSIO K001
的最佳培养温度为
28℃
；所述种子液是按
1:20
的体积比接种
。6.
根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的种子培养基的配方为：...

【专利技术属性】
技术研发人员：张敬，张坤，丁文平，尹浩，凌娟，杨键，
申请(专利权)人：三亚海洋生态环境工程研究院，
类型：发明
国别省市：