一种提高宠物免疫力的植物乳植杆菌King07及菌剂、制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及微生物应用领域，具体涉及一种提高宠物免疫力的植物乳植杆菌King07及菌剂、制备方法和应用。植物乳植杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)King07于2022年8月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.25555。该菌株有较强的过胃肠存活率和肠道定植能力，制成植物乳植杆菌King07菌剂，便于宠物服用。经过实验验证，服用植物乳植杆菌King07菌剂能够增强宠物机体对外界环境的抵抗能力，提高宠物的自身免疫力，减少宠物伤口感染，促进宠物伤口愈合；同时，服用该菌剂还能有效提高宠物体内的抗体水平。有效提高宠物体内的抗体水平。

【技术实现步骤摘要】
一种提高宠物免疫力的植物乳植杆菌King07及菌剂、制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及微生物应用领域，具体涉及一种提高宠物免疫力的植物乳植杆菌King07及菌剂、制备方法和应用。

技术介绍

[0002]随着生活水平的提高，宠物逐渐成为许多家庭的重要一员。在日常生活中，宠物出现伤口、感染细菌或病毒的可能性很大。在宠物身体出现伤口时，如果宠物自身免疫力较强，可以依靠机体自身的免疫系统，产生免疫细胞或抗体将外界侵入的细菌或病毒清除。如果宠物免疫力较低，无法完全清除入侵的细菌或病毒，会导致伤口感染化脓、难以愈合，甚至导致宠物患病以至死亡。
[0003]为了提高宠物自身免疫力，对宠物定期进行体检、注射疫苗是必需的。除此之外，多使用宠物保健品或功能性宠物粮提高宠物自身免疫力。宠物保健品是根据宠物的生理状况等制定的营养调理品，这种食品虽说有利于宠物的健康发育和成长，但是保健品中所添加的营养成分较为复杂，不能明确说明添加成分的作用原理，缺乏理论指导，且保健品价格昂贵，当不再服用后宠物容易恢复至以前免疫力低下的状态。功能性宠物粮产品，营养全面、配方科学、饲喂方便，但宠物粮中基本为高蛋白高能量成分，这些成分在消化道中需要长时间才能被分解吸收，甚至排出体外都不能完全被分解，增加肠胃负担，长时间服用容易造成宠物消化不良、软便等负面影响，不但不能提高宠物免疫力，而且容易引起其它肠胃问题。

技术实现思路

[0004]针对宠物机体免疫力低而导致伤口愈合慢的问题，本专利技术提供一种提高宠物免疫力的植物乳植杆菌King07及菌剂、制备方法和应用，可以有效提高宠物的免疫力，促进宠物伤口愈合，避免使用宠物保健品及喂食功能性宠物粮出现的肠胃健康等负面问题，同时减轻宠物饲养者因购买宠物专用食品造成的经济负担。
[0005]第一方面，本专利技术提供的一种提高宠物免疫力的植物乳植杆菌King07，植物乳植杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)King07于2022年8月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCCNo.25555。
[0006]第二方面，本专利技术提供一种植物乳植杆菌King07菌剂，包括上述植物乳植杆菌King07的菌体。
[0007]第三方面，本专利技术提供一种上述植物乳植杆菌King07菌剂的制备方法，具体包括以下步骤：
[0008](1)取植物乳植杆菌King07在MRS平板培养基上活化，将活化后的菌接种于MRS液体培养基中，培养获得菌液；
[0009](2)将菌液离心后，收集菌体，使用无菌生理盐水洗涤后，重悬于复原脱脂乳中，获得悬浊液；调整悬浊液的浓度，获得菌悬液，将菌悬液冷冻干燥后，获得菌粉；
[0010](3)将菌粉与葡萄糖混合，制成植物乳植杆菌King07菌剂。
[0011]进一步的，步骤(1)中，MRS液体培养基的制备方法为：蛋白胨10g、牛肉粉5g、三水醋酸钠5g、七水磷酸氢二钾2g、吐温80 1mL、四水硫酸锰0.05g、柠檬酸三铵2g、葡萄糖20g、七水硫酸镁0.2g、琼脂15g、蒸馏水1000mL；将上述原料混合后，自然pH，搅拌菌液后，在121℃、0.1MPa下灭菌20min，即可。
[0012]进一步的，步骤(1)中，活化后的菌接种于MRS液体培养基的接种量为1％～2％。
[0013]进一步的，步骤(1)中，培养温度为35～38℃，培养时间为24～48h。
[0014]进一步的，步骤(2)中，复原脱脂乳的质量浓度为15％。
[0015]进一步的，步骤(2)中，调整悬浊液的浓度为1.0～2.0
×
10
10
cfu/mL。
[0016]进一步的，植物乳植杆菌King07菌剂中菌体数量为100～150亿/g。
[0017]第四方面，本专利技术提供上述植物乳植杆菌King07在制备提高宠物免疫力、促进宠物伤口愈合的产品方面的应用。
[0018]本专利技术的有益效果在于：
[0019]本专利技术提供的一种植物乳植杆菌King07有较强的过胃肠存活率和肠道定植能力，将该菌株制成菌剂，便于宠物服用。经过实验验证，服用植物乳植杆菌King07菌剂能够增强宠物机体对外界环境的抵抗能力，提高宠物的自身免疫力，减少宠物伤口感染，促进宠物伤口愈合；同时，服用该菌剂还能有效提高宠物体内的抗体水平。
具体实施方式
[0020]为了使本
的人员更好地理解本专利技术中的技术方案，下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本专利技术保护的范围。
[0021]实施例1菌种的分离鉴定
[0022]1、菌株来源：酸煎饼糊糊，2022年1月29日采集于山东省聊城市辛县河店镇。
[0023]2、菌株筛选及纯化
[0024](1)取样：取酸煎饼糊糊1ml作为样品，备用；
[0025](2)制备样品：
[0026]①
取灭菌后的生理盐水(0.85％)至于无菌三角瓶中，然后将步骤(1)的样品加入其中，振荡，待用；
[0027]②
对步骤
①
的溶液稀释制成不同浓度梯度的样品，分别为10
‑1、10
‑2、10
‑3、10
‑4、10
‑5、10
‑6、10
‑7，标号分别为1#、2#、3#、4#、5#、6#、7#，待用；
[0028](3)制备MRS平板培养基；
[0029]培养基的组成及制备方法如下：
[0030]蛋白胨10g、牛肉粉5g、三水醋酸钠5g、七水磷酸氢二钾2g、吐温80 1mL、四水硫酸锰0.05g、柠檬酸三铵2g、葡萄糖20g、七水硫酸镁0.2g、琼脂15g、蒸馏水1000mL；将上述原料混合后，自然pH，搅拌菌液后，在121℃、0.1MPa下灭菌20min，将灭菌后的培养基倒入平皿
中，放凉后待用；
[0031](4)培养：将步骤
②
的1#、2#、3#、4#、5#、6#、7#溶液分别使用涂布器涂布在MRS平板培养基中，于37℃培养48h；
[0032](5)按照以下菌落特征挑选菌落：
[0033]菌落直径1～2mm，菌落白色圆润、边缘整齐、不透明。
[0034](6)分离纯化
[0035]挑取5个单菌落，采用划线法接种在MRS平板培养基上，于37℃培养48h，挑取单菌落，置于甘油管中
‑
70℃保藏。
[0036]3、鉴定
[0037]将步骤(6)分离纯化后单菌落送去鉴定，鉴定单位：中国工业微生物菌种保藏管理中心，鉴定过程中，使用的引物如下：
[00本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种提高宠物免疫力的植物乳植杆菌King07，其特征在于，植物乳植杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)King07于2022年8月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCCNo.25555。2.一种植物乳植杆菌King07菌剂，其特征在于，包括如权利要求1所述植物乳植杆菌King07的菌体。3.一种如权利要求2所述植物乳植杆菌King07菌剂的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：(1)取植物乳植杆菌King07在MRS平板培养基上活化，将活化后的菌接种于MRS液体培养基中，培养获得菌液；(2)将菌液离心后，收集菌体，使用无菌生理盐水洗涤后，重悬于复原脱脂乳中，获得悬浊液；调整悬浊液的浓度，获得菌悬液，将菌悬液冷冻干燥后，获得菌粉；(3)将菌粉与葡萄糖混合，制成植物乳植杆菌King07菌剂。4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，MRS液体培养基的制备方法为：蛋白胨10g、牛肉粉5g、三水醋酸钠...

【专利技术属性】
技术研发人员：侯建亮，梁萌，郄璐，郭玉秋，李翠华，刘继明，
申请(专利权)人：山东威曼宠物食品有限公司，
类型：发明
国别省市：