改善宠物毛发的嗜酸乳杆菌King45及其菌剂和应用制造技术

本发明专利技术涉及微生物应用技术领域，具体涉及一种改善宠物毛发的嗜酸乳杆菌King45及其菌剂和应用。嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus）King45于2022年8月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.25558。该菌株可在宠物肠道内长久定植，通过代谢不断生成蛋氨酸，使得宠物不需要额外补充其它营养物质在正常进食的情况下能够做到长时间保持毛色艳亮，减少了宠物掉毛现象，增强了宠物毛发韧性。通过服用嗜酸乳杆菌King45菌剂维护宠物毛发健康，有助于减轻宠物饲养者的经济负担，同时不会出现高蛋白饮食引起的宠物排便困难、便臭等负面作用。便臭等负面作用。

【技术实现步骤摘要】
改善宠物毛发的嗜酸乳杆菌King45及其菌剂和应用


[0001]本专利技术涉及微生物应用
，具体涉及一种改善宠物毛发的嗜酸乳杆菌King45及其菌剂和应用。

技术介绍

[0002]动物毛发的主要成分是角蛋白，角蛋白含量的高低是影响毛发浓密、韧性及艳亮的关键因素。角蛋白是所有蛋白质中为数不多的含硫元素成分的蛋白质，组成了毛发的绝大成分，而构成角蛋白的蛋氨酸又是机体必须的氨基酸，它无法在体内合成，所以如果不通过饮食摄取，就会造成制造氨基酸的原料不足，让毛发稀疏、脱落、生长变慢。因此，摄取蛋氨酸对毛发的持久鲜亮具有重要生物意义。
[0003]目前市面上可以维持宠物毛色发亮的方法主要包括外用洗液和饮食补充。外用洗液以护发素为主，但其治标不治本，可能还会存在不良商家将工业色素添加至护发素中，影响宠物健康。饮食补充主要包括摄入高蛋白食品或额外补充营养强化剂。通过摄入大量高蛋白高营养食品可以补充宠物体内的生物基硫元素，促进角蛋白合成，从而促使毛色光亮，但高蛋白高营养食品不利于宠物消化吸收，长期喂养高蛋白食物容易出现消化不良、便秘、粪便恶臭等负面作用。通过额外补充卵磷脂、海藻粉等营养强化剂等膳食营养补充剂也可以增进宠物的毛色发亮，但一旦停止服用，宠物的毛发又会回归到干燥、暗淡的状态，同时这些营养添加剂价格昂贵，成本较高。

技术实现思路

[0004]针对市面上改善宠物毛发的产品负面作用大、效果不持久、成本高的问题，本专利技术提供一种改善宠物毛发的嗜酸乳杆菌King45及其菌剂和应用。
[0005]第一方面，本专利技术提供一种改善宠物毛发的嗜酸乳杆菌King45，嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus）King45于2022年8月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.25558。
[0006]第二方面，本专利技术提供一种嗜酸乳杆菌King45菌剂，包括上述嗜酸乳杆菌King45的菌体。
[0007]进一步的，其制备方法具体包括以下步骤：（1）制备MRS液体培养基和MRS平板培养基；（2）取保藏的嗜酸乳杆菌King45在MRS平板培养基上活化，将活化后菌接种于MRS液体培养基中，然后培养获得菌液；（3）将菌液离心后，收集菌体，使用无菌生理盐水洗涤后，重悬于复原脱脂乳中，获得悬浊液；调整悬浊液的浓度为1.0
×
10
10
~2.0
×
10
10
cfu/mL，获得菌悬液，将菌悬液冷冻干燥后，获得菌粉；（4）将菌粉与低聚异麦芽糖混合，制成菌剂。
[0008]进一步的，步骤（1）中，MRS液体培养基的制备方法为：蛋白胨10g、牛肉粉5g、三水醋酸钠5g、七水磷酸氢二钾2g、吐温80 1mL、四水硫酸锰0.05g、柠檬酸三铵2g、葡萄糖20g、七水硫酸镁0.2g、蒸馏水1000mL；将上述原料混合后，调pH为6.8，搅拌菌液后，在121℃、0.1MPa下灭菌20min。
[0009]进一步的，步骤（1）中，MRS平板培养基的制备方法为：蛋白胨10g、牛肉粉5g、三水醋酸钠5g、七水磷酸氢二钾2g、吐温80 1mL、四水硫酸锰0.05g、柠檬酸三铵2g、葡萄糖20g、七水硫酸镁0.2g、琼脂15g、蒸馏水1000mL；将上述原料混合后，自然pH，搅拌菌液后，在121℃、0.1MPa下灭菌20min，将灭菌后的培养基倒入平皿中，放凉后待用。
[0010]进一步的，步骤（2）中，活化后菌接种于MRS液体培养基的接种量为1%~2%。
[0011]进一步的，步骤（2）中，培养温度为35~38℃，培养时间为24~36h。
[0012]进一步的，步骤（3）中，复原脱脂乳的质量浓度为15%。
[0013]第三方面，本专利技术提供一种上述嗜酸乳杆菌King45在制备改善宠物毛发的产品中的应用。
[0014]本专利技术的有益效果在于：本专利技术提供的改善宠物毛发的嗜酸乳杆菌King45可在宠物肠道内长久定植，通过代谢不断生成蛋氨酸，使得宠物不需要额外补充其它营养物质在正常进食的情况下能够做到长时间保持毛色艳亮，减少了宠物掉毛现象，增强了宠物毛发韧性。通过服用嗜酸乳杆菌King45菌剂维护宠物毛发健康，有助于减轻宠物饲养者的经济负担，同时不会出现高蛋白饮食引起的宠物排便困难、便臭等负面作用。
具体实施方式
[0015]为了使本
的人员更好地理解本专利技术中的技术方案，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本专利技术保护的范围。
[0016]实施例1 菌种的分离鉴定1、菌株筛选及纯化（1）菌株来源：健康犬粪便，2021年6月采集于山东省青州市。
[0017]（2）制备样品：
①
取灭菌后的生理盐水（0.85%）至于无菌三角瓶中，然后将步骤（1）的健康犬粪便1g加入其中，振荡，待用；
②
对步骤
①
的溶液稀释制成不同浓度梯度的样品，分别为10
‑1、10
‑2、10
‑3、10
‑4、10
‑5、10
‑6、10
‑7，标号分别为1#、2#、3#、4#、5#、6#、7#，待用。
[0018]（3）制备MRS平板培养基：蛋白胨10g、牛肉粉 5g、三水醋酸钠5g、七水磷酸氢二钾2g、吐温80 1mL、四水硫酸锰0.05g、柠檬酸三铵2g、葡萄糖20g、七水硫酸镁0.2g、琼脂15g、蒸馏水1000mL；将上述原料混合后，自然pH，搅拌菌液后，在121℃、0.1MPa下灭菌20min，将灭菌后的培养基倒入平皿中，放凉后待用。
[0019]（4）培养菌株：将1#、2#、3#、4#、5#、6#、7#号溶液分别使用涂布器涂布在MRS平板培
养基中，于37℃、厌氧条件下培养48h；（5）按照以下菌落特征挑选菌落：菌落直径1~2mm，菌落圆润、边缘整齐、微白色中间有凸起。
[0020]（6）分离纯化根据步骤（5）的菌落特征挑取5个单菌落，采用划线法接种至MRS平板培养基上，于37℃、厌氧条件下培养48h，挑取单菌落，置于甘油管中
‑
70℃保藏。
[0021]2、鉴定将分离纯化后得到的单菌落送去鉴定，鉴定单位：中国工业微生物菌种保藏管理中心；检测方法：FMIC
‑
QO01
‑
001
‑
2015微生物学检测 细菌多相鉴定检测方法；鉴定结果为：该菌株为Lactobacillus acidophilus。
[0022]鉴定过程中得到的菌株的基因序列为：TGAACCAACAGATTCACTTCGGTGATGACGTTGGGAACGCGAGC本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1. 一种改善宠物毛发的嗜酸乳杆菌King45，其特征在于，嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus）King45于2022年8月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.25558。2.一种嗜酸乳杆菌King45菌剂，其特征在于，包括如权利要求1所述的嗜酸乳杆菌King45的菌体。3.如权利要求2所述的嗜酸乳杆菌King45菌剂，其特征在于，其制备方法具体包括以下步骤：（1）制备MRS液体培养基和MRS平板培养基；（2）取保藏的嗜酸乳杆菌King45在MRS平板培养基上活化，将活化后菌接种于MRS液体培养基中，然后培养获得菌液；（3）将菌液离心后，收集菌体，使用无菌生理盐水洗涤后，重悬于复原脱脂乳中，获得悬浊液；调整悬浊液的浓度为1.0
×
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~2.0
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cfu/mL，获得菌悬液，将菌悬液冷冻干燥后，获得菌粉；（4）将菌粉与低聚异麦芽糖混合，制成菌剂。4. 如权利要求3所述的嗜酸乳杆菌King45菌剂，其特征在于，步骤（1）中，MRS液体培养基的制备方法为：将原料蛋...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁萌，隋梦琪，门晓东，田华，房钰，刘道中，杨志强，
申请(专利权)人：山东威曼宠物食品有限公司，
类型：发明
国别省市：