表达外源引入的细胞因子的工程化免疫效应细胞制造技术

本申请提供了一种免疫效应细胞，该免疫效应细胞表达：外源引入的IL

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】表达外源引入的细胞因子的工程化免疫效应细胞
1.相关申请的交叉引用
[0001]本申请要求于2021年2月26日提交的国际专利申请号PCT/CN2021/078227的优先权权益，其内容通过援引以其全文并入本文。2.序列表
[0002]本申请通过援引并入了与本申请一起提交的序列表，该序列表为文本格式，标题为“14651
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039
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228_SEQ_LISTING.txt”，创建于2022年2月18日，大小为145,395字节。


[0003]本披露涉及包含功能性外源受体(诸如嵌合抗原受体)的多肽、工程化免疫效应细胞、及其使用方法。本披露进一步涉及用于治疗用途的细胞的活化和扩增，特别涉及基于嵌合抗原受体的T细胞免疫疗法。

技术介绍

[0004]工程化免疫效应细胞的过继转移代表一种新兴的创新治疗策略。例如，用嵌合抗原受体(CAR)工程化的T细胞诱导血癌患者产生有效的临床反应，证明了与常规疗法相比具有良好的预后。然而，体内存活效率低、内源免疫细胞活化不足、免疫抑制微环境、T细胞耗竭和难以浸润疾病组织是CAR
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T细胞对某些疾病而言具有挑战性的常见原因。因此，本领域仍然需要改进的构建体或工程化免疫效应细胞，例如，CAR
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T细胞，以治疗疾病或病症。

技术实现思路

[0005]在一方面，本文提供了一种免疫效应细胞，该免疫效应细胞表达：外源引入的IL
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12的p40亚基；外源引入的CCR7的配体(例如CCL
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19和CCL
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21)；和功能性外源受体，该功能性外源受体包含胞外抗原结合结构域、跨膜结构域和胞内信号传导结构域。
[0006]在一些实施例中，本文提供了一种免疫效应细胞，该免疫效应细胞表达：外源引入的IL
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12的p40亚基；外源引入的CCL
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19；和功能性外源受体，该功能性外源受体包含胞外抗原结合结构域、跨膜结构域和胞内信号传导结构域。
[0007]在一些实施例中，本文提供了一种免疫效应细胞，该免疫效应细胞表达：外源引入的IL
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12的p40亚基；外源引入的CCL
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21；和功能性外源受体，该功能性外源受体包含胞外抗原结合结构域、跨膜结构域和胞内信号传导结构域。
[0008]在一些实施例中，p40是人p40或其片段或变体。在一些实施例中，p40包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列。在其他实施例中，p40包含与SEQ ID NO:5的氨基酸序列具有至少75％、80％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。在一些实施例中，本文提供的p40多肽是分泌的多肽。在一些实施例中，本文提供的p40多肽是膜结合的多肽(例如，MB12)。
[0009]在一些实施例中，CCL
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19是人CCL
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19或其片段或变体。在一些实施例中，CCL
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19包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列。在其他实施例中，CCL
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19包含与SEQ ID NO:6的氨基酸序列
具有至少75％、80％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。
[0010]在一些实施例中，CCL
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21是人CCL
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21或其片段或变体。在一些实施例中，CCL
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21包含SEQ ID NO:22的氨基酸序列。在其他实施例中，CCL
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21包含与SEQ ID NO:22的氨基酸序列具有至少75％、80％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。
[0011]在一些实施例中，功能性外源受体是T细胞受体(TCR)、嵌合抗原受体(CAR)、嵌合TCR(cTCR)、或T细胞抗原偶联物(TAC)样嵌合受体。在一些实施例中，功能性外源受体是CAR。
[0012]在一些实施例中，跨膜结构域源自选自由CD8α、CD4、CD28、CD137、CD80、CD86、CD152和PD1组成的组的分子。在一些实施例中，跨膜结构域来自CD8α或CD28。
[0013]在一些实施例中，胞内信号传导结构域包含免疫效应细胞的初级胞内信号传导结构域。在一些实施例中，该初级胞内信号传导结构域来自CD3ζ。
[0014]在一些实施例中，该胞内信号传导结构域包含共刺激信号传导结构域。在一些实施例中，该共刺激信号传导结构域源自共刺激分子，该共刺激分子选自由CD27、CD28、CD137、OX40、CD30、CD40、CD3、LFA
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1、ICOS、CD2、CD7、LIGHT、NKG2C、B7
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H3、CD83的配体以及它们的组合组成的组。在一些实施例中，该共刺激信号传导结构域包含CD28的胞内结构域和/或CD137的胞内结构域。
[0015]在一些实施例中，功能性外源受体进一步包含位于胞外抗原结合结构域的C末端与跨膜结构域的N末端之间的铰链结构域。在一些实施例中，该铰链结构域来自CD8α。
[0016]在一些实施例中，功能性外源受体包含位于多肽的N末端的信号肽。在一些实施例中，该信号肽来自CD8α。
[0017]在一些实施例中，免疫效应细胞是T细胞。
[0018]在另一方面，本文提供了多肽，该多肽包含：外源引入的IL
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12的p40亚基；外源引入的CCR7的配体(诸如CCL
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19和CCL
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21)；和功能性外源受体，该功能性外源受体包含胞外抗原结合结构域、跨膜结构域和胞内信号传导结构域。
[0019]在一些实施例中，本文提供了多肽，该多肽包含：外源引入的IL
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12的p40亚基；外源引入的CCL
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19；和功能性外源受体，该功能性外源受体包含胞外抗原结合结构域、跨膜结构域和胞内信号传导结构域。
[0020]在其他实施例中，本文提供了多肽，该多肽包含：外源引入的IL
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12的p40亚基；外源引入的CCL
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21；和功能性外源受体，该功能性外源受体包含胞外抗原结合结构域、跨膜结构域和胞内信号传导结构域。
[0021]在一些实施例中，p40是人p40或其片段或变体。在一些实施例中，p40包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列。在其他实施例中，p40包含与SEQ ID NO:5的氨基酸序列具有至少75％、80％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。在一些实施例中，本文提供的p40多肽是分泌的多肽。在一些实施例中，本文提供的p40多肽是膜结合的多肽(例如，MB12本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种免疫效应细胞，其表达：(i)外源引入的IL
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12的p40亚基；(ii)外源引入的CCR7的配体；以及(iii)功能性外源受体，所述功能性外源受体包含：(a)胞外抗原结合结构域、(b)跨膜结构域、和(c)胞内信号传导结构域，其中所述CCR7的配体是CCL
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19，或其中所述CCR7的配体是CCL
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21。2.如权利要求1所述的免疫效应细胞，其中所述p40是人p40或其片段或变体。3.如权利要求2所述的免疫效应细胞，其中所述p40包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列。4.如权利要求2所述的免疫效应细胞，其中所述p40包含与SEQ ID NO:5的氨基酸序列具有至少75％、80％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。5.如权利要求1至4中任一项所述的免疫效应细胞，其中所述CCL
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19是人CCL
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19或其片段或变体；和/或其中CCL
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21是人CCL
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21或其片段或变体。6.如权利要求5所述的免疫效应细胞，其中所述CCL
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19包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列，或其中所述CCL
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19包含与SEQ ID NO:6的氨基酸序列具有至少75％、80％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。7.如权利要求5所述的免疫效应细胞，其中所述CCL
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21包含SEQ ID NO:22的氨基酸序列，或其中所述CCL
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21包含与SEQ ID NO:22的氨基酸序列具有至少75％、80％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。8.如权利要求1至7中任一项所述的免疫效应细胞，其中所述功能性外源受体是T细胞受体(TCR)、嵌合抗原受体(CAR)、嵌合TCR(cTCR)、或T细胞抗原偶联物(TAC)样嵌合受体。9.如权利要求8所述的免疫效应细胞，其中所述功能性外源受体是CAR。10.如权利要求1至9中任一项所述的免疫效应细胞，其中所述跨膜结构域源自选自由CD8α、CD4、CD28、CD137、CD80、CD86、CD152和PD1组成的组的分子。11.如权利要求10所述的免疫效应细胞，其中所述跨膜结构域来自CD8α或CD28。12.如权利要求1至11中任一项所述的免疫效应细胞，其中所述胞内信号传导结构域包含免疫效应细胞的初级胞内信号传导结构域。13.如权利要求12所述的免疫效应细胞，其中所述初级胞内信号传导结构域来自CD3ζ。14.如权利要求1至13中任一项所述的免疫效应细胞，其中所述胞内信号传导结构域包含共刺激信号传导结构域。15.如权利要求14所述的免疫效应细胞，其中所述共刺激信号传导结构域源自共刺激分子，所述共刺激分子选自由CD27、CD28、CD137、OX40、CD30、CD40、CD3、LFA
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1、ICOS、CD2、CD7、LIGHT、NKG2C、B7
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H3、CD83的配体以及它们的组合组成的组。16.如权利要求15所述的免疫效应细胞，其中所述共刺激信号传导结构域包含CD28的胞内结构域和/或CD137的胞内结构域。17.如权利要求1至16中任一项所述的免疫效应细胞，其进一步包含位于所述胞外抗原结合结构域的C末端和所述跨膜结构域的N末端之间的铰链结构域。
18.如权利要求17所述的免疫效应细胞，其中所述铰链结构域来自CD8α。19.如权利要求1至18中任一项所述的免疫效应细胞，其进一步包含位于多肽的N末端的信号肽。20.如权利要求19所述的免疫效应细胞，其中所述信号肽来自CD8α。21.如权利要求1至20中任一项所述的免疫效应细胞，其中所述免疫效应细胞是T细胞。22.一种多肽，其包含：(i)外源引入的IL
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12的p40亚基；(ii)外源引入的CCR7的配体；以及(iii)功能性外源受体，所述功能性外源受体包含：(a)胞外抗原结合结构域、(b)跨膜结构域、和(c)胞内信号传导结构域，其中所述CCR7的配体是CCL
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19，或其中所述CCR7的配体是CCL
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21。23.如权利要求22所述的多肽，其中所述p40是人p40或其片段或变体。24.如权利要求22所述的多肽，其中所述p40包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列。25.如权利要求22所述的多肽，其中所述p40包含与SEQ ID NO:5的氨基酸序列具有至少75％、80％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。26.如权利要求22至25中任一项所述的多肽，其中所述CCL
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19是人CCL
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19或其片段或变体；和/或其中所述CCL
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21是人CCL
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21或其片段或变体。27.如权利要求26所述的多肽，其中所述CCL
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19包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列，或其中所述CCL
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19包含与SEQ ID NO:6的氨基酸序列具有至少75％、80％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的氨基酸序列。28.如权利要求26...

【专利技术属性】
技术研发人员：范晓虎，毛杰，庄秋传，张长江，
申请(专利权)人：南京传奇生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：