【技术实现步骤摘要】
一种适用于流感病毒大规模培养的无血清全悬浮MDCK细胞系及其制备方法和应用
[0001]本专利技术涉及流感疫苗
，具体涉及一种适用于流感病毒大规模培养的无血清全悬浮MDCK细胞系及其制备方法和应用。
技术介绍
[0002]目前，全球已上市的流感疫苗分为流感灭活疫苗(裂解、亚单位)、流感减毒活疫苗和重组流感疫苗。根据生产工艺，可分为基于鸡胚、基于细胞培养和重组流感疫苗。细胞基质流感疫苗规避了使用鸡胚基质时鸡胚短缺和有适应性变化的可能等问题。常用来培养流感病毒的哺乳动物细胞包括MDCK、Vero、PER.C6等细胞，其中由于MDCK细胞对于流感病毒更加易感，产量为Vero细胞的10倍，已被各疫苗企业作为细胞流感疫苗研发的的首选细胞。采用MDCK细胞培养流感病毒的上游生产工艺分为贴壁和悬浮培养工艺。贴壁培养的操作相对繁琐，使用胰酶及动物血清增加了外源因子污染的可能，并且规模不易放大。无血清悬浮培养工艺操作简单，无需添加血清和胰酶，无外源因子污染，生产规模容易放大，可满足流感大流行时的疫苗需求。因此无血清悬浮培养工艺是细胞流感
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种适用于流感病毒大规模培养的无血清全悬浮MDCK细胞系，其特征在于，已于2023年6月29日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCCNO:C2023190。2.如权利要求1所述的一种适用于流感病毒大规模培养的无血清全悬浮MDCK细胞系的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)在T瓶中逐步增加无血清培养基的比例并降低含血清培养基的比例直至完全将含血清培养基替换为无血清培养基，以传代的方式驯化原始MDCK细胞，即初始含血清培养基的比例为10％，2
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3天传代，传代2
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4次后，降低含血清培养基的比例，增加无血清培养基的比例，继续传代并观察细胞状态，待其适应时再次降低含血清培养基的比例，增加无血清培养基的比例，继续传代，并重复此逐渐传代并减少含血清培养基比例的步骤最终使MDCK细胞完全适应无血清培养；(2)将MDCK细胞转移至摇瓶中，继续进行悬浮驯化，筛选适应于悬浮培养的细胞，并建立一定规模的细胞库。3.根据权利要求2所述的一种适用于流感病毒大规模培养的无血清全悬浮MDCK细胞系的制备方法，其特征在于，所述原始MDCK细胞的来源及编号为ATCCCCL
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34。4.利用权利要求1所述的一种适用于流感病毒大规模培养的无血清全悬浮MDCK...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴业红，李爽，隋立娜，李臣锋，徐军，迟祥，吕原，尚琼，孙立影，
申请(专利权)人：长春生物制品研究所有限责任公司，
类型：发明
国别省市：
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