一种用于肿瘤诊断与治疗的人辅助转录因子4泛素化位点及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种用于肿瘤诊断与治疗的人辅助转录因子4泛素化位点及其应用。本发明专利技术研究得到，PC4蛋白的Lys68位点泛素化水平在肿瘤细胞或组织中显著升高，可作为诊断靶点与指标；并且Lys68位点泛素化会增强PC4与RNA结合能力，进而促进肿瘤细胞的细胞周期进展、促进肿瘤细胞生长和增殖，显著促进肿瘤的恶性表型转化、促进肿瘤恶性进展，抑制该位点泛素化的方案可用于开发肿瘤治疗药物。因此PC4蛋白的Lys68位点可作为关键的靶点应用于开发肿瘤诊断产品和靶向治疗药物。进一步本发明专利技术开发了PC4蛋白Lys68泛素化抗原肽，以及能特异性识别PC4蛋白Lys68泛素化位点的抗体，可应用于调控肿瘤细胞增殖或生长，可用于开发临床肿瘤疾病的诊断与治疗产品。本发明专利技术具有重要的应用价值。值。值。

【技术实现步骤摘要】
一种用于肿瘤诊断与治疗的人辅助转录因子4泛素化位点及其应用


[0001]本专利技术属于生物医药
更具体地，涉及一种用于肿瘤诊断与治疗的人辅助转录因子4(人PC4蛋白)泛素化位点及其应用。

技术介绍

[0002]在医学上，癌(cancer)是指起源于上皮组织的恶性肿瘤，临床表现因其所在的器官、部位以及发展程度不同而不同，但恶性肿瘤早期多无明显症状，即便有症状也常无特异性，等患者出现特异性症状时，肿瘤常已经属于晚期。该类疾病已经成为人类生命和健康的重大疾病之一，且死亡率高，越来越年轻化。癌症重在早发现早治疗，然而目前十分缺乏高效特异的早期诊断指标和治疗方法。
[0003]多项研究证明，泛素
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蛋白酶体途径及去泛素化在肿瘤发生发展过程起重要作用，使肿瘤发病机制的研究进入一个新的深度，也为肿瘤的临床防治开拓了新的领域和思路，目前对泛素化与去泛素的研究已成为新的研究热点，对其机制深入的探讨将为肿瘤发病机制的研究、肿瘤的治疗开辟一条新的道路。
[0004]辅助转录因子4(Positive Cofactor 4，PC4)是一种功能强大且结构高度保守的核蛋白，广泛存在于生物组织细胞中。其除了参与RNA聚合酶Ⅱ介导的基础转录，PC4还可以调控DNA复制、染色质重塑、DNA修复以及RNA代谢等分子生物学过程。本课题组最早报道了PC4在正常细胞恶性转化后的模型以及肺癌、骨肉瘤等多种肿瘤临床标本中异常高表达，并且调控肿瘤的恶性进展(Shi CM，2007，In vitro cell dev biol；Peng Y，2012，Cancer gene ther；Luo P，2019，cell commun signal)。但PC4蛋白泛素化及其与肿瘤的关系如何尚不得而知。

技术实现思路

[0005]本专利技术旨在研究PC4蛋白泛素化及其与肿瘤的关系，提供一种能够用于肿瘤诊断与靶向治疗的新方案。
[0006]本专利技术第一目的是提供PC4蛋白Lys68位点在作为肿瘤诊断靶点，PC4蛋白Lys68位点泛素化水平在作为肿瘤诊断指标，以及检测PC4蛋白Lys68位点泛素化水平的试剂在制备肿瘤诊断产品中的应用。
[0007]本专利技术第二目的是提供PC4蛋白Lys68位点在作为肿瘤治疗靶点或肿瘤细胞增殖调控靶点中的应用，或作为靶点在筛选、开发和/或设计预防和/或治疗肿瘤产品中的应用，以及能够抑制PC4蛋白Lys68位点泛素化的试剂在制备肿瘤治疗产品中的应用。
[0008]本专利技术第三目的是提供一种PC4蛋白Lys68泛素化(ubPC4
k68
)抗原肽。
[0009]本专利技术第四目的是提供一种特异性识别PC4蛋白Lys68泛素化位点的抗体。
[0010]本专利技术第五目的是提供所述抗原肽或所述抗体在作为或制备肿瘤检测/诊断/筛查、治疗或预后判定产品中的应用。
[0011]本专利技术上述目的通过以下技术方案实现：
[0012]我们研究发现，PC4氨基酸序列中的Lys68位点是其蛋白泛素化修饰的位点，然而该修饰是否能通过影响PC4蛋白功能来影响肿瘤细胞生长还不清楚。我们进一步研究显示：PC4蛋白的Lys68位点泛素化在肿瘤细胞或组织的表达水平比正常细胞或组织的表达水平高；并且PC4蛋白的Lys68位点泛素化能够明显增强PC4蛋白与RNA结合的能力，进而增强PC4对下游RNA稳定性的调控，并促进对细胞周期相关RNA的代谢调控，进而促进肿瘤细胞的细胞周期进展、促进肿瘤细胞生长和增殖，显著促进肿瘤的恶性表型转化、促进肿瘤恶性进展，抑制该位点泛素化的方案可用于开发肿瘤治疗药物。因此PC4的Lys68可作为关键的靶点应用于开发肿瘤诊断产品或肿瘤靶向治疗药物。因此可以针对该位点开发肿瘤筛查、诊断与治疗疗效的监测产品，以及靶向治疗肿瘤的药物。进一步地，本专利技术还开发了针对人PC4蛋白Lys68泛素化(ubPC4
k68
)抗原肽，以及能特异性识别PC4蛋白Lys68泛素化位点的抗体，可应用于肿瘤等疾病的诊断、治疗及预后判定等。
[0013]基于本专利技术的研究成果，本专利技术要求保护如下方案：
[0014]PC4蛋白Lys68位点在作为肿瘤诊断靶点中的应用。
[0015]PC4蛋白Lys68位点泛素化水平在作为肿瘤诊断指标中的应用。
[0016]检测PC4蛋白Lys68位点泛素化水平的试剂在制备肿瘤诊断产品中的应用。
[0017]PC4蛋白Lys68位点在作为肿瘤治疗靶点或肿瘤细胞增殖调控靶点中的应用。所述调控是抑制肿瘤细胞增殖、生长和恶性进展。调控手段是通过抑制PC4蛋白Lys68位点泛素化，进而可明显减弱PC4蛋白与RNA结合的能力，导致细胞周期阻滞，抑制肿瘤细胞生长和恶性进展。
[0018]PC4蛋白Lys68位点在作为靶点在筛选、开发和/或设计预防和/或治疗肿瘤产品中的应用。
[0019]能够抑制PC4蛋白Lys68位点泛素化的试剂在制备肿瘤靶向治疗产品中的应用。
[0020]另外，本专利技术还进一步开发了一种PC4蛋白Lys68泛素化(ubPC4
k68
)抗原肽，序列为：CMFQIGK(STLHLVLRLRGG)MRYVS，其中的赖氨酸被泛素化修饰。该抗原肽既能解决PC4蛋白泛素化修饰有效研究的问题，又能用于肿瘤等疾病的诊断、治疗及预后判定。
[0021]更进一步地，利用所述抗原肽作为免疫原免疫动物，制备了一种特异性识别PC4蛋白Lys68泛素化位点(ubPC4
k68
)的多克隆抗体(命名为ubPC4
K68
抗体)。该抗体既能解决PC4蛋白泛素化修饰有效研究的问题，又能用于肿瘤等疾病的诊断、治疗及预后判定。
[0022]因此，所述抗原肽在制备特异性识别PC4蛋白Lys68泛素化位点(ubPC4
k68
)的多克隆抗体中的应用，也应在本专利技术保护范围之内。
[0023]所述抗原肽或所述抗体在作为或制备肿瘤检测/诊断/筛查、靶向治疗或预后判定产品中的应用，也应在本专利技术保护范围之内。
[0024]其中抗体用于诊断或靶向治疗药物开发，包括将抗体与药物链接开展肿瘤靶向治疗、将抗体与放射性标记物链接进行放射性免疫显像来协助肿瘤的诊断。
[0025]本专利技术方案中所述肿瘤包括肝癌、宫颈癌、结直肠癌、乳腺癌和前列腺癌。
[0026]本专利技术方案中所述包括药物等。
[0027]PC4蛋白作为一种RNA结合蛋白，通过调控肝癌细胞周期相关基因的mRNA稳定性和蛋白表达水平，加快细胞周期G1/S期的转化同时确保细胞有丝分裂有序进行，进而促进肝
癌细胞的增殖、迁移和转移。本专利技术的方案针对PC4蛋白的Lys68位点泛素化，从而促进肿瘤细胞的发生、发展和转移。这对于肿瘤的发生发展研究、治疗方案研究均有非常高的价值。
[0028]本专利技术制备得到的高特异性的针对人PC蛋白Lys68位点泛素化抗体可用Western blot实验可本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.PC4蛋白Lys68位点在作为肿瘤诊断靶点中的应用。2.PC4蛋白Lys68位点泛素化水平在作为肿瘤诊断指标中的应用。3.检测PC4蛋白Lys68位点泛素化水平的试剂在制备肿瘤诊断产品中的应用。4.PC4蛋白Lys68位点在作为肿瘤治疗靶点或肿瘤细胞增殖调控靶点中的应用。5.PC4蛋白Lys68位点在作为靶点在筛选、开发和/或设计预防和/或治疗肿瘤产品中的应用。6.能够抑制PC4蛋白Lys68位点泛素化的试剂在制备肿瘤治疗产品中的...

【专利技术属性】
技术研发人员：史春梦，罗鹏，潘绮湄，
申请(专利权)人：中国人民解放军陆军军医大学，
类型：发明
国别省市：