本发明专利技术提供了一种抗慢性髓系白血病耐药的药物组合物及其应用。所述药物组合物包括哇巴因和伊马替尼或其药学上可接受的盐。哇巴因对伊马替尼耐药CML细胞株K562/G01细胞的具有抑制增殖和促凋亡的作用，并且哇巴因与IM联用比单用IM对K562/G01细胞的生长抑制和促凋亡作用更显著，这表明哇巴因是增加CML耐药细胞对IM敏感性的潜在药物。并且，长期应用哇巴因对正常小鼠无明显毒性。对正常小鼠无明显毒性。对正常小鼠无明显毒性。
【技术实现步骤摘要】
一种抗慢性髓系白血病耐药的药物组合物及其应用
[0001]本专利技术涉及药物组合物
，尤其涉及一种抗慢性髓系白血病耐药的药物组合物及其应用。
技术介绍
[0002]慢性髓系白血病(CML)是一种以费城染色体为特征的克隆性造血干细胞恶性肿瘤，2017年(Lin et al,2020)报告的病例估计为34179例，死亡24054例。CML常伴有9号染色体上的ABL1基因和22号染色体上的BCR基因融合，从而产生BCR
‑
ABL1融合蛋白，该蛋白具有高度酪氨酸激酶活性，是CML的关键驱动因子。尽管酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitors，TKIs)如甲磺酸伊马替尼(imatinibmesylate，IM)可显著提高早期患者的生存率，但仍有约40％的慢性期患者因失败和/或不耐受而不得不放弃IM，且IM相关的耐药不能阻止疾病的复发和进展，已成为CML患者最重要的死亡原因之一。因此，迫切需要一种能够逆转IM耐药的新药。
[0003]哇巴因(G毒毛旋花苷,ouabain)是从箭毒毛旋花的种子中分离得到的一种速效的强心苷(CG)。关于CGs安全性的争议由来已久，主要是由于其治疗窗窄和心脏毒性。哇巴因通过抑制Na
+
/K
+
ATP酶增加细胞内Ca
2+
浓度，从而改善心肌收缩力。除了传统作用外，近年来的研究证明哇巴因还具有抗炎作用、抗冠状病毒作用、抗癌作用、逆转耐药作用等。有报道称哇巴因可以靶向人白血病细胞，包括干扰淋巴细胞白血病细胞的细胞内氧化还原稳态和调节体内免疫细胞的活性。尽管如此，哇巴因对IM耐药的CML的治疗作用尚未见报道。
技术实现思路
[0004]针对现有技术中所存在的不足，本专利技术提供了一种抗慢性髓系白血病耐药的药物组合物及其应用，其解决了现有技术中存在的IM耐药的问题。
[0005]本专利技术一方面，提供一种抗慢性髓系白血病耐药的药物组合物，包括以下成分：哇巴因、伊马替尼或其药学上可接受的盐。
[0006]进一步地，哇巴因:伊马替尼或其药学上可接受的盐的摩尔比为为0.01
‑
1:10，优选0.05
‑
1:10，更优选为1:10。
[0007]进一步地，所述药物组合物以制剂的形式存在。
[0008]进一步地，所述哇巴因、伊马替尼或其药学上可接受的盐分别溶解在溶剂中形成制剂，所述溶剂包括DMSO、水。
[0009]进一步地，所述制剂中，哇巴因的浓度为0.01
‑
1μM，优选地，所述哇巴因的浓度为0.05
‑
1μM，更优选地，所述哇巴因的浓度为1μM；伊马替尼或其药学上可接受的盐的浓度为10μM。
[0010]进一步地，所述药物组合物进一步包括佐剂。
[0011]本专利技术另一方面，提供一种药物组合物的制备方法，包括将哇巴因、伊马替尼或其药学上可接受的盐混合，即得。
[0012]进一步地，包括以下步骤：
[0013]S1：将哇巴因、伊马替尼或其药学上可接受的盐分别溶解于溶剂中，得到哇巴因溶液、伊马替尼溶液；
[0014]S2：将哇巴因溶液和伊马替尼溶液混合；
[0015]优选地，所述溶剂为DMSO、水。
[0016]本专利技术再一方面，提供所述药物组合物或哇巴因在制备药物中的应用，所述药物具有如下作用：
[0017](1)治疗慢性髓系白血病耐药；
[0018](2)促进伊马替尼耐药白血病细胞的凋亡；
[0019](3)抑制伊马替尼耐药白血病细胞的增殖；
[0020]优选地，所述伊马替尼耐药白血病细胞为K562/G01细胞。
[0021]进一步地，哇巴因:伊马替尼或其药学上可接受的盐的摩尔比为0.01
‑
1:10，优选0.05
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1:10；
[0022]所述药物组合物以制剂的形式存在；
[0023]优选地，所述哇巴因、伊马替尼或其药学上可接受的盐分别溶解在溶剂中形成制剂，所述溶剂包括DMSO、水；
[0024]更优选地，所述制剂中，哇巴因的浓度为0.01
‑
1μM，优选地，所述哇巴因的浓度为0.05
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1μM，更优选地，所述哇巴因的浓度为1μM；伊马替尼或其药学上可接受的盐的浓度为10μM。
[0025]本专利技术的技术原理为：现有技术中，哇巴因可通过诱导白血病细胞凋亡、影响氧化还原稳态和靶向相关信号通路发挥抗白血病作用，但哇巴因在伊马替尼耐药CML中的作用尚不清楚。专利技术人经过反复大量的试验研究发现，哇巴因能以时间和剂量依赖的方式抑制细胞活力，即使低浓度的哇巴因(0.01μM和0.1μM)也能对IM耐药的CML细胞株K562/G01细胞产生细胞毒性作用，表明哇巴因具有显著的抑制K562/G01细胞增殖的能力。进一步，专利技术人比较了单独用药和联合用药对K562/G01细胞增殖和凋亡的影响，结果发现，高浓度(1μM)的哇巴因联合IM对细胞增殖的抑制作用明显强于单独的IM和哇巴因，并可诱导细胞凋亡。这说明哇巴因和IM在促进细胞凋亡方面具有协同增效作用。并且，耐药逆转系数RF随着浓度的增加而增加，说明哇巴因可以浓度依赖性地抑制K562/G01细胞的IM耐药。
[0026]相比于现有技术，本专利技术具有如下有益效果：本专利技术中哇巴因对伊马替尼耐药CML细胞株K562/G01细胞具有抗增殖和促凋亡作用，并且哇巴因与IM联用比单用IM对K562/G01细胞的生长抑制和促凋亡作用更显著，这表明哇巴因是增加耐药细胞对IM敏感性的潜在药物，哇巴因和IM联合应用具有协同增效的作用。并且，长期应用哇巴因对正常小鼠无明显毒性。
附图说明
[0027]图1为哇巴因及其联合IM对K562/G01细胞增殖的影响，其中，a为哇巴因的化学结构，b为K562/G01细胞经哇巴因作用24h和48h后，CCK
‑
8法检测细胞毒性的浓度
‑
效应曲线，c为24h后CCK
‑
8细胞毒性实验检测哇巴因联合IM对K562/G01细胞增殖的影响，数据以mean
±
SD(n＝3).***p<0.001表示，与对照组或10μM IM组相比。
[0028]图2为哇巴因联合IM对K562/G01细胞细胞凋亡和细胞周期的影响，其中，a为流式细胞术检测哇巴因联合IM作用24h后对K562/G01细胞细胞凋亡的影响，b为哇巴因与IM单独或联合作用于K562/G01细胞24h后细胞周期情况，*p<0.05。
[0029]图3为哇巴因对正常小鼠体重的影响，其中，a为雄性KM小鼠体重比，b为雌性KM小鼠体重比。
[0030]图4为哇巴因对正常小鼠血常规的影响，其中，a为白细胞计数(WBC)，b为红细胞计数(RBC)，c为血红蛋白(Hb)，d为平均红细胞体积(MCV)，e为平均红细本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种抗慢性髓系白血病耐药的药物组合物，其特征在于：包括以下成分：哇巴因、伊马替尼或其药学上可接受的盐。2.如权利要求1所述的一种抗慢性髓系白血病耐药的药物组合物，其特征在于：哇巴因:伊马替尼或其药学上可接受的盐的摩尔比为0.01
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1:10，优选0.05
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1:10，更优选为1:10。3.如权利要求1所述的一种抗慢性髓系白血病耐药的药物组合物，其特征在于：所述药物组合物以制剂的形式存在。4.如权利要求3所述的一种抗慢性髓系白血病耐药的药物组合物，其特征在于：所述哇巴因、伊马替尼或其药学上可接受的盐分别溶解在溶剂中形成制剂，所述溶剂包括DMSO、水。5.如权利要求4所述的一种抗慢性髓系白血病耐药的药物组合物，其特征在于：所述制剂中，哇巴因的浓度为0.01
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1μM，优选地，所述哇巴因的浓度为0.05
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1μM，更优选地，所述哇巴因的浓度为1μM；伊马替尼或其药学上可接受的盐的浓度为10μM。6.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：所述药物组合物进一步包括佐剂。7.权利要求1
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6任一项所述药物组合物的制备方法，其特征在于：包括将哇巴因、伊马替尼或其药学上...
【专利技术属性】
技术研发人员：胡晶，孙畅，翟诗绮，刘家辉，冯敏，张明昊，陈要灿，
申请(专利权)人：重庆医科大学国际体外诊断研究院，
类型：发明
国别省市：
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