一种动物胚胎素活性检测方法及制备方法技术

本发明专利技术涉及胚胎素技术领域，尤其涉及动物胚胎素活性检测方法，包括，步骤S1，提取待评价胚胎组织样本，进行粉碎、重复冰冻缓解、离心、超滤，获取水溶性胚胎素；步骤S2，将获取的水溶性胚胎素一分三份，分别进行多肽含量测定、高分子物质测定和生物活性测定；步骤S3，统计三项测定的结果，综合分析胚胎素活性，并对胚胎素活性进行评级；在所述步骤S3中，通过计算胚胎素的活性评分对胚胎素活性进行评级，计算胚胎素的活性评分时设置有评分系统，本发明专利技术通过进行多肽含量测定、高分子物质测定和生物活性测定多角度评判制作的胚胎素的活性，并对活性等级进行分级，有利于胚胎素的应用，更能够适应当前的对胚胎素活性的需求。应当前的对胚胎素活性的需求。应当前的对胚胎素活性的需求。

【技术实现步骤摘要】
一种动物胚胎素活性检测方法及制备方法


[0001]本专利技术涉及胚胎素
，尤其涉及一种动物胚胎素活性检测方法及制备方法。

技术介绍

[0002]自上世纪50年代至今，，全球数十万人进行过动物胚胎素的相关治疗，
[0003]动物胚胎素含有多种能够调节人体组织器官机能的活性成分，其中包括表皮生长因子(EGF)、透明质酸刺激因子(HASF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)等具有美化肌肤功效的成分。特别是动物胚胎素中的EGF,作为一种新兴的美容护肤因子正成为时尚；最新研究表明人的角质层细胞和纤维细胞等均有特异性EGF受体存在，为人体皮肤细胞具有吸收EGF的能力提供了理论依据。另外,动物胚胎素中还含有多种小分子活性肽、核酸、维生素、多种矿物元素和丰富的氨基酸等活性成分,在促进皮肤细胞更新的同时,还能增加其内源性生长因子的含量，促进细胞分泌透明质酸和糖蛋白，具有调整皮肤结构,延缓衰老，减少皱纹,抑制粉刺和防治青春痘生长的作用。因此，动物胚胎素作为一种具有独特生物学效应的化妆品添加剂将具有越来越强的生命力和良好的发展前景。
[0004]中国专利公开号：CN109602685A,公开了一种羊胚胎素的提取方法，包括如下步骤：步骤S1：选取怀孕4
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6周的羊胚胎，洗净后采用常用食物绞碎机进行初步绞碎，绞碎1～2h，将羊胚胎绞碎至糊状，并加入所处理羊胚胎重量10倍以上的蒸馏水浸泡，使细胞吸足水分，处于膨胀状态，后续研磨时细胞能破碎均匀，充分保护其中活性物质；步骤S2：将经过步骤S1处理得到的胚胎糊置于
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30℃下冷冻21～22h，羊胚胎细胞位置迅速固定，细胞破裂少细胞液流失少，待羊胚胎完全冻住，再取出冻住的羊胚胎在室温下溶解，后采用胶体磨进行研磨；步骤S3：在经过步骤S2处理得到的胚胎糊中加入所处理羊胚胎重量1倍的蒸馏水离心，整个离心过程中溶液温度为
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15～
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10℃以下；步骤S4：取离心后的上清液在无菌条件下采用10万分子量的超滤膜进行过滤，进行初步除杂；之后还需采用1万分子量的超滤膜进行过滤，此时能将提取物中大分子蛋白质除去，而分子量小于1万的活性物质，具有抗衰老作用，可得到保留；所得提取物置于
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10℃下保存，以抑制其中分解酶的活性。其中，只公布了如何对羊胚胎素进行提取，但并为公布如何检测判断羊胚胎素的活性，贸然应用到产品中极易产生效果不达预期的现象。
[0005]由此可见，当前胚胎素的产品存在胚胎素提取后活性评价标准不明确，导致产品效果容易不达预期的问题。

技术实现思路

[0006]为此，本专利技术提供一种动物胚胎素活性检测方法及胚胎素制备方法，用以克服现有技术中当前胚胎素的产品存在胚胎素提取后活性评价标准不明确，导致产品效果容易不达预期的问题。
[0007]为实现上述目的，本专利技术提供一种动物胚胎素活性检测方法，包括，
[0008]步骤S1，提取待评价胚胎组织样本，进行粉碎、重复冰冻缓解、离心、超滤，获取水溶性胚胎素；
[0009]步骤S2，将获取的水溶性胚胎素一分三份，分别进行多肽含量测定、高分子物质测定和生物活性测定；
[0010]步骤S3，统计三项测定的结果，综合分析胚胎素活性，并对胚胎素活性进行评级；
[0011]在所述步骤S3中，通过计算胚胎素的活性评分对胚胎素活性进行评级，计算胚胎素的活性评分时设置有评分系统。
[0012]在步骤S3中，所述评分系统中设置样品活力值对活性基础评分的矫正参数与肽含量对活性基础评分的矫正参数，样品活力值对活性基础评分的矫正参数的数值由样品活力值确定，肽含量对活性基础评分的矫正参数的数值由肽含量确定。
[0013]进一步地，在所述步骤S3中，所述生物活性测定采用T细胞活性测定法，测定的样品活力值为B；所述多肽含量测定采用福林酚测定法，检测到的多肽含量为A；
[0014]所述评分系统计算胚胎素活性的基础评分Fj，Fj＝A
×
a+B
×
b，其中，a为多肽含量对活性基础评分的矫正参数，b为样品活力值对活性基础评分的矫正参数；
[0015]在进行高分子物质测定时，通过高效液相色谱法，根据检测结果判定胚胎素中高分子物质的主要种类，并根据高分子物质种类对胚胎素活性的基础评分进行矫正，得到活性总评分Fz，所述评分系统根据活性总评分Fz对胚胎素的活性进行评级。
[0016]进一步地，所述评分系统内设置有第一预设多肽含量参数A1，第二预设多肽含量参数A2，第一预设多肽含量对活性基础评分的矫正参数值a1，第二预设多肽含量对活性基础评分的矫正参数值a2，第三预设多肽含量对活性基础评分的矫正参数值a3，所述评分系统将检测到的多肽含量A与第一预设多肽含量参数A1，第二预设多肽含量参数A2进行对比，确定多肽含量对活性基础评分的矫正参数a的数值；
[0017]当A≤A1时，所述评分系统选取第一预设多肽含量对活性基础评分的矫正参数值a1的数值作为a的数值；
[0018]当A1＜A≤A2时，所述评分系统选取第二预设多肽含量对活性基础评分的矫正参数值a2的数值作为a的数值；
[0019]当A＞A2时，所述评分系统选取第三预设多肽含量对活性基础评分的矫正参数值a3的数值作为a的数值。
[0020]进一步地，所述评分系统内设置有第一预设样品活性值参数B1，第二预设样品活性值参数B2，第一预设样品活性值对活性基础评分的矫正参数值b1，第二预设样品活性值对活性基础评分的矫正参数值b2，第三预设样品活性值对活性基础评分的矫正参数值b3，所述评分系统将检测到的样品活性值B与第一预设样品活性值参数B1，第二预设样品活性值参数B2进行对比，确定样品活性值对活性基础评分的矫正参数b的数值；
[0021]当B≤B1时，所述评分系统选取第一预设样品活性值对活性基础评分的矫正参数值b1的数值作为b的数值；
[0022]当B1＜B≤B2时，所述评分系统选取第二预设样品活性值对活性基础评分的矫正参数值b2的数值作为b的数值；
[0023]当B＞B2时，所述评分系统选取第三预设样品活性值对活性基础评分的矫正参数值b3的数值作为b的数值。
[0024]进一步地，所述评分系统内第一预设高分子物质含量参数D1,第二预设高分子物质含量参数D2，第一预设高分子物质含量对活性评分评价参数d1，第二预设高分子物质含量对活性评分评价参数d2，第三预设高分子物质含量对活性评分评价参数d3；
[0025]所述评分系统将检测到的胚胎素中高分子物质含量D与第一预设高分子物质含量参数D1,第二预设高分子物质含量参数D2进行对比，
[0026]当D≤D1时，所述评分系统选取第一预设高分子物质含量对活性评分评价参数d1作为基础评分调节参数；
[0027]当D1＜D≤D2时，所述评分系统选取第二预设高分子物质含量对活性评分评价参数d2作为基础评分调节参数；
[0028]当D＞D2本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种动物胚胎素活性检测方法，其特征在于，包括，步骤S1，提取待评价胚胎组织样本，进行粉碎、重复冰冻缓解、离心、超滤，获取水溶性胚胎素；步骤S2，将获取的水溶性胚胎素一分三份，分别进行多肽含量测定、高分子物质测定和生物活性测定；步骤S3，统计三项测定的结果，综合分析胚胎素活性，并对胚胎素活性进行评级；在所述步骤S3中，通过计算胚胎素的活性评分对胚胎素活性进行评级，计算胚胎素的活性评分时设置有评分系统，通过对胚胎素进行评分确定胚胎素活性进行的评级；在步骤S3中，所述评分系统中设置样品活力值对活性基础评分的矫正参数与多肽含量对活性基础评分的矫正参数，样品活力值对活性基础评分的矫正参数的数值由样品活力值确定，多肽含量对活性基础评分的矫正参数的数值由肽含量确定。2.根据权利要求1所述的动物胚胎素活性检测方法，其特征在于，在所述步骤S3中，所述生物活性测定采用T细胞活性测定法，测定的样品活力值为B；所述多肽含量测定采用福林酚测定法，检测到的多肽含量为A；所述评分系统计算胚胎素活性的基础评分Fj，Fj＝A
×
a+B
×
b，其中，a为多肽含量对活性基础评分的矫正参数，b为样品活力值对活性基础评分的矫正参数；在进行高分子物质测定时，通过高效液相色谱法，根据检测结果判定胚胎素中高分子物质的主要种类，并根据高分子物质种类对胚胎素活性的基础评分进行矫正，得到活性总评分Fz，所述评分系统根据活性总评分Fz对胚胎素的活性进行评级。3.根据权利要求2所述的动物胚胎素活性检测方法，其特征在于，所述评分系统内设置有第一预设多肽含量参数A1，第二预设多肽含量参数A2，第一预设多肽含量对活性基础评分的矫正参数值a1，第二预设多肽含量对活性基础评分的矫正参数值a2，第三预设多肽含量对活性基础评分的矫正参数值a3，所述评分系统将检测到的多肽含量A与第一预设多肽含量参数A1，第二预设多肽含量参数A2进行对比，确定多肽含量对活性基础评分的矫正参数a的数值；当A≤A1时，所述评分系统选取第一预设多肽含量对活性基础评分的矫正参数值a1的数值作为a的数值；当A1＜A≤A2时，所述评分系统选取第二预设多肽含量对活性基础评分的矫正参数值a2的数值作为a的数值；当A＞A2时，所述评分系统选取第三预设多肽含量对活性基础评分的矫正参数值a3的数值作为a的数值。4.根据权利要求2所述的动物胚胎素活性检测方法，其特征在于，所述评分系统内设置有第一预设样品活性值参数B1，第二预设样品活性值参数B2，第一预设样品活性值对活性基础评分的矫正参数值b1，第二预设样品活性值对活性基础评分的矫正参数值b2，第三预设样品活性值对活性基础评分的矫正参数值b3，所述评分系统将检测到的样品活性值B与第一预设样品活性值参数B1，第二预设样品活性值参数B2进行对比，确定样品活性值对活性基础评分的矫正参数b的数值；当B≤B1时，所述评分系统选取第一预设样品活性值对活性基础评分的矫正参数值b1的数值作为b的数值；
当B1＜B≤B2时，所述评分系统选取第二预设样品活性值对活性基础评分的矫正参数值b2的数值作为b的数值；当B＞B2时，所述评分系统选取第三预设...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢成，邓寅，谢培增，
申请(专利权)人：广东新征程生命科学有限公司广州新征程生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：