一种培养厌氧脱卤菌剂的方法及其在污染修复中的应用技术

本发明专利技术公开了一种培养厌氧脱卤菌剂的方法及其在污染修复中的应用，所述厌氧脱卤菌同时包含脱卤单胞菌属Dehalogenimonas和脱卤拟球菌属Dehalococcoides，其特征在于培养基中含有柠檬酸盐。本发明专利技术的方法中，柠檬酸盐作为营养助剂在污染场地中的应用，可较长时间持续发挥作用，不用频繁添加，大大节省了修复工程费用，并使得脱卤单胞菌属Dehalogenimonas和脱卤拟球菌属Dehalococcoides这两类脱卤菌属均衡生长，一并发挥降解作用，从而达到了持久高效地降解土壤或地下水中氯代烃类污染物的目的。目的。

【技术实现步骤摘要】
一种培养厌氧脱卤菌剂的方法及其在污染修复中的应用


[0001]本专利技术属于受污染场地生物降解处理
，主要涉及一种培养厌氧脱卤菌剂的方法及其在污染修复中的应用，具体涉及柠檬酸盐用于培养厌氧脱卤菌剂及其在污染修复中的应用。

技术介绍

[0002]氯代烃，包括氯代烷烃和氯代烯烃，是优良的清洁剂和有机溶剂，广泛应用于机械、化工、电子和清洗等行业，在生产和使用过程中易通过泄露和排放等途径进入土壤和地下水环境，已成为国内污染场地中常见的挥发性有机污染物，严重威胁人体健康和生态环境安全。氯代烃污染物毒性大、粘度低、极性小，进入含水层后容易形成大范围污染羽，风险控制值严格和难以自然降解均是氯代烃污染场地的重要特征。
[0003]大部分氯代烃难以好氧生物降解，但可高效地被厌氧生物降解。由于土壤和地下水环境通常是厌氧条件，原位厌氧生物修复技术是解决土壤和地下水氯代烃污染最经济、绿色的修复技术。
[0004]脱卤单胞菌属Dehalogenimonas和脱卤拟球菌属Dehalococcoides是降解氯代烃类污染物的主要专性厌氧脱卤呼吸菌株。当这两种菌属同时存在时，可高效地厌氧脱卤降解氯代烃污染物，且可降解的氯代烃污染物范围较广。
[0005]用于厌氧脱卤生物修复的常用营养助剂有乳酸盐、丙酮酸盐和植物油。这些营养助剂被厌氧菌分解，为厌氧脱卤菌提供碳源和电子供体氢气。丙酮酸盐可使得脱卤单胞菌属Dehalogenimonas和脱卤拟球菌属Dehalococcoide均衡生长，但在7天内基本被厌氧菌分解完毕。乳酸盐和植物油持续分解时间较长，但不能使得脱卤单胞菌属Dehalogenimonas和脱卤拟球菌属Dehalococcoide均衡生长，脱卤单胞菌属Dehalogenimonas数量将大大减少，甚至灭失。脱卤单胞菌属Dehalogenimonas缺失时，将较大影响可厌氧降解氯代烃的种类和效率，如Dehalococcoide菌属不能降解1,1,2
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三氯乙烷、1,1,2,2
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四氯乙烷和1,2,3
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三氯丙烷。找到一种既能长效发挥作用，又能使得脱卤单胞菌属Dehalogenimonas和脱卤拟球菌属Dehalococcoide均衡生长的营养助剂，对于土壤和地下水氯代烃污染修复很有价值。

技术实现思路

[0006]本专利技术的第一个目的是提供柠檬酸盐作为营养助剂，用于培养包含脱卤单胞菌属Dehalogenimonas和脱卤拟球菌属Dehalococcoides的厌氧脱卤菌剂，使得这两类脱卤菌属均衡生长，为氯代烃类污染场地的修复提供高效的生物菌剂。
[0007]本专利技术一方面涉及一种培养厌氧脱卤菌剂的方法，所述厌氧脱卤菌同时包含脱卤单胞菌属Dehalogenimonas和脱卤拟球菌属Dehalococcoides，其特征在于培养基中含有柠檬酸盐。对于柠檬酸盐在培养基中的浓度没有特别的限定，但出于有利于脱卤单胞菌属Dehalogenimonas和脱卤拟球菌属Dehalococcoides均衡生长的考虑，所述柠檬酸盐在培养基中的浓度优选为0.1
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10mM。
[0008]在本专利技术的一个优选实施方式中，所述培养基中还含有N源和P源。
[0009]在本专利技术的一个优选实施方式中，所述柠檬酸盐包括柠檬酸钠、柠檬酸钾、柠檬酸钙和柠檬酸镁中的的一种或两种或两种以上。
[0010]在本专利技术的一个优选实施方式中，所述方法培养15天之后脱卤单胞菌属Dehalogenimonas和脱卤拟球菌属Dehalococcoides的数量之比为1
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5：1
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5。
[0011]本专利技术的另一目的是柠檬酸盐作为营养助剂应用于氯代烃类有机物污染土壤或地下水修复，可较长时间持续发挥作用，使得脱卤单胞菌属Dehalogenimonas和脱卤拟球菌属Dehalococcoides这两类脱卤菌属均衡生长，最终达到持久长效地降解土壤或地下水中氯代烃类污染物的效果。
[0012]优选地，所述氯代烃类有机物为四氯乙烯、三氯乙烯、1,1
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二氯乙烯、反
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1,2
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二氯乙烯、顺
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1,2
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二氯乙烯、氯乙烯、1,2
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二氯乙烷、1,1,2
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三氯乙烷、1,1,2,2
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四氯乙烷、1,2
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二氯丙烷和1,2,3
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三氯丙烷中的一种或两种或两种以上。
[0013]与常用的乳酸盐、丙酮酸盐和植物油等营养助剂相比，本专利技术具有如下优势：
[0014](1)乳酸盐、丙酮酸盐和植物油等营养助剂被厌氧菌分解，为厌氧脱卤菌提供碳源和电子供体氢气。丙酮酸盐可使得脱卤单胞菌属Dehalogenimonas和脱卤拟球菌属Dehalococcoide均衡生长，但在7天内基本被厌氧菌分解完毕。乳酸盐和植物油持续分解时间较长，但不能使得脱卤单胞菌属Dehalogenimonas和脱卤拟球菌属Dehalococcoide均衡生长，脱卤单胞菌属Dehalogenimonas数量将大大减少，甚至灭失。柠檬酸盐有六个碳原子，可较长时间持续发挥作用，被厌氧菌分解为甲酸盐、乙酸盐和氢气，为厌氧脱卤菌提供电子供体和碳源，可使得脱卤单胞菌属Dehalogenimonas和脱卤拟球菌属Dehalococcoides这两类脱卤菌属均衡生长。
[0015](2)柠檬酸盐作为营养助剂在污染场地中的应用，可较长时间持续发挥作用，不用频繁添加，大大节省了修复工程费用，并使得脱卤单胞菌属Dehalogenimonas和脱卤拟球菌属Dehalococcoides这两类脱卤菌属均衡生长，一并发挥降解作用，从而达到了持久高效地降解土壤或地下水中氯代烃类污染物的目的。
[0016]需要说明的是，本专利技术的技术在国家重点研发计划“场地地下水卤代烃污染修复材料和技术”项目支持下，已将柠檬酸钠柠作为营养助剂应用于实际污染场地厌氧脱卤生物修复中试中，并取得了很好的修复效果，高浓度氯代烃在四个月内经厌氧脱卤降解达到地下水IV类标准，去除率达99％以上。
具体实施方式
[0017]为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。
[0018]因此，以下对本专利技术的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本专利技术的范围，而是仅仅表示本专利技术的选定实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0019]实施例1柠檬酸钠用于扩大培养厌氧脱卤菌剂
[0020](1)1000ml液体培养基制备：
[0021]去离子水1000ml、1g NaCl、0.5g MgCl2·
6H2O、0.2g 本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种培养厌氧脱卤菌剂的方法，所述厌氧脱卤菌同时包含脱卤单胞菌属Dehalogenimonas和脱卤拟球菌属Dehalococcoides，其特征在于培养基中含有柠檬酸盐。2.根据权利要求1所述的方法，所述培养基中还含有N源和P源。3.根据权利要求1所述的方法，所述柠檬酸盐包括柠檬酸钠、柠檬酸钾、柠檬酸钙和柠檬酸镁中的的一种或两种或两种以上。4.根据权利要求1所述的方法，所述方法培养15天之后脱卤单胞菌属Dehalogenimonas和脱卤拟球菌属Dehalococcoides的数量之比为1
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5：1
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5。5.一种氯代烃类有机物污染土壤或地下水修复方法，所述方法包括加入脱卤单胞菌属Dehalog...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈波洋，
申请(专利权)人：北京博诚立新环境科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：