一种具有Cr(制造技术

本发明专利技术属于微生物及环境保护技术领域，具体涉及一种具有Cr(

【技术实现步骤摘要】
No.26390，保藏日期为2023年1月6日。
[0011]本专利技术还公开了一种具有Cr(
Ⅵ
)还原性能的复合微生物菌剂，包括所述粪产碱杆菌F和所述细长赖氨酸芽孢杆菌Y的菌体、灭活物和/或代谢物的混合物。
[0012]具体的，所述具有Cr(
Ⅵ
)还原性能的复合微生物菌剂，所述粪产碱杆菌F和所述细长赖氨酸芽孢杆菌Y的质量白为1
‑
3：1
‑
3。
[0013]本专利技术还公开了一种制备所述具有Cr(
Ⅵ
)还原性能的复合微生物菌剂的方法，包括分别将所述粪产碱杆菌F和所述细长赖氨酸芽孢杆菌Y进行活化并接种至含有Cr(
Ⅵ
)的增殖培养基中进行培养的步骤；
[0014]优选的，所述增殖培养基中，Cr(
Ⅵ
)的浓度为0.05
‑
0.15mM。
[0015]本专利技术还公开了所述粪产碱杆菌F、所述细长赖氨酸芽孢杆菌Y或所述复合微生物菌剂用于制备具有如下(1)
‑
(4)中至少一项功效的功能性制剂的用途：
[0016](1)Cr尤其是Cr(
Ⅵ
)还原剂；
[0017](2)含Cr重金属去除剂；
[0018](3)重金属拮抗剂；
[0019](4)含Cr重金属污染土壤修复剂。
[0020]本专利技术还公开了所述粪产碱杆菌F、所述细长赖氨酸芽孢杆菌Y或所述复合微生物菌剂在重金属污染修复尤其是含Cr重金属污染修复领域的应用。
[0021]本专利技术还公开了一种含Cr重金属污染修复方法，包括将所述粪产碱杆菌F、所述细长赖氨酸芽孢杆菌Y或所述复合微生物菌剂接种至待处理的含Cr重金属污染样品中进行修复培养的步骤。
[0022]具体的，所述含Cr重金属污染修复方法，所述含Cr重金属污染样品中的Cr(
Ⅵ
)浓度为0.1
‑
0.2mM。
[0023]具体的，所述含Cr重金属污染修复方法，所述修复培养步骤中，还包括加入乙酸钠作为碳源的步骤。
[0024]本专利技术筛选得到具有高效Cr(
Ⅵ
)还原能力的粪产碱杆菌F和细长赖氨酸芽孢杆菌Y，所述菌株均具有较好的Cr(
Ⅵ
)还原能力，可以高效还原Cr(
Ⅵ
)，形成稳定、低毒害的Cr(Ⅲ)，有效降低重金属尤其是Cr的污染，进而实现重金属污染的修复。
[0025]本专利技术所述复合微生物菌剂，以所述粪产碱杆菌F和细长赖氨酸芽孢杆菌Y进行复合，所述复合微生物菌剂能够在pH为5
‑
10范围，2d内保持不低于80％的还原能力，不仅具有更高的Cr(
Ⅵ
)转化率，且相较于单菌株，其具有更高的Cr(
Ⅵ
)还原率和pH适应性，有效解决了单菌株Cr(
Ⅵ
)还原稳定性差、难以与土著微生物竞争、修复效率效果不明显的不足，为实现微生物Cr(
Ⅵ
)还原提供技术支持。
[0026]本专利技术所述复合微生物菌剂，优选该复合菌剂由粪产碱杆菌：赖氨酸芽孢杆菌＝1：1组成，该混合菌群相较于单菌株Cr(
Ⅵ
)还原效率高，且有更好的pH适应性，在种子液OD600＝1.0左右、总菌量为5mL时，对0.2mM的Cr(
Ⅵ
)还原2d，混合微生物菌群的还原率达到97％左右，高于只添加粪产碱杆菌F的80.9％还原率和只添加细长赖氨酸芽孢杆菌Y的57.6％还原率。本专利技术所述复合微生物菌剂，还原效率高，且有更好的pH适应性，用于环境Cr(
Ⅵ
)污染的修复，不产生二次污染，具有安全、经济、操作简单的优势。
附图说明
[0027]为了使本专利技术的内容更容易被清楚的理解，下面根据本专利技术的具体实施例并结合附图，对本专利技术作进一步详细的说明，其中，
[0028]图1为所述粪产碱杆菌F的系统发育树；
[0029]图2为所述细长赖氨酸芽孢杆菌Y的系统发育树；
[0030]图3为初始Cr(
Ⅵ
)浓度对粪产碱杆菌F生长量和Cr(
Ⅵ
)还原率的影响结果；
[0031]图4为初始Cr(
Ⅵ
)浓度对细长赖氨酸芽孢杆菌Y生长量和Cr(
Ⅵ
)还原率的影响结果；
[0032]图5为pH对粪产碱杆菌F生长量和Cr(
Ⅵ
)还原率的影响结果；
[0033]图6为pH对细长赖氨酸芽孢杆菌Y生长量和Cr(
Ⅵ
)还原率的影响结果；
[0034]图7为pH对所述混合菌群生长量和Cr(
Ⅵ
)还原率的影响结果；
[0035]图8为初始Cr(
Ⅵ
)浓度对所述混合菌群生长量和Cr(
Ⅵ
)还原率的影响结果；
[0036]图9为初始NaCl浓度对所述混合菌群生长量和Cr(
Ⅵ
)还原率的影响结果；
[0037]图10为碳源对所述混合菌群生长量和Cr(
Ⅵ
)还原率的影响结果；
[0038]图11为重金属离子对所述混合菌群生长量和Cr(
Ⅵ
)还原率的影响结果。
具体实施方式
[0039]本专利技术如下实施例中，涉及的培养基包括：
[0040]LB液体培养基配方为：牛肉膏3g/L，蛋白胨5g/L，氯化钠5g/L，pH＝7；
[0041]LB固体培养基配方为：牛肉膏3g/L，蛋白胨5g/L，氯化钠5g/L，琼脂8g/L，pH＝7。
[0042]实施例1粪产碱杆菌和赖氨酸芽孢杆菌的筛选及混菌系统构建
[0043]菌株筛选
[0044]土壤样品来源：不同As
‑
Cr驯化梯度的混菌系统
[0045]取5g土壤加到50ml生理盐水中震荡，制备土壤浸出液，土壤浸出液以10％的接种量接种于90mL含0.1mM Cr(VI)的无菌LB培养基中，37℃、160rpm条件下活化2
‑
3d。以上述培养液为母液，将其转接至90mL含更高浓度Cr(VI)的无菌LB液体培养基中，并以此为一个周期逐步增加LB液体培养基中Cr(VI)的浓度至0.1mM，并在37℃、160rpm条件下富集培养。
[0046]以上述富集培养物为分离母液，用稀释平板法逐步稀释至10
‑1、10
‑2、10
‑3、10
‑4、10
‑5、10
‑6，取10
‑4、10
‑5、10
‑6三个稀释梯度的菌液0.2μl涂布于LB固体培养基上，37℃倒置于恒温培养箱培养3
‑
4d，每个稀释度设置3个重复。从平板上挑取不同形态的单菌落，在LB固板上反复划线3
‑
4次，获得纯菌株。
[0047]选出6株能够在含铬1mM的LB平板上生长的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种粪产碱杆菌F，其分类命名为Alcaligenes faecalis，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.26489，保藏日期为2023年1月16日。2.一种细长赖氨酸芽孢杆菌Y，其分类命名为Lysinibacillus macroides，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.26390，保藏日期为2023年1月6日。3.一种具有Cr(
Ⅵ
)还原性能的复合微生物菌剂，其特征在于，包括权利要求1所述粪产碱杆菌F和权利要求2所述细长赖氨酸芽孢杆菌Y的菌体、灭活物和/或代谢物的混合物。4.根据权利要求3所述具有Cr(
Ⅵ
)还原性能的复合微生物菌剂，其特征在于，所述粪产碱杆菌F和所述细长赖氨酸芽孢杆菌Y的质量白为1
‑
3：1
‑
3。5.一种制备权利要求3或4所述具有Cr(
Ⅵ
)还原性能的复合微生物菌剂的方法，其特征在于，包括分别将所述粪产碱杆菌F和所述细长赖氨酸芽孢杆菌Y进行活化并接种至含有Cr(
Ⅵ
)的增殖培养基中进行培养的步骤；优选的，所述增殖培养基...

【专利技术属性】
技术研发人员：于彩虹，何邦华，李静茹，刘晓霞，胡雪松，
申请(专利权)人：中国矿业大学北京，
类型：发明
国别省市：