【技术实现步骤摘要】
一种人源SARS
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CoV
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2单克隆抗体的制备及其应用
[0001]本专利技术涉及医疗
,尤其涉及一种人源SARS
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CoV
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2单克隆抗体的制备及其应用。
技术介绍
[0002]新型冠状病毒感染患者发病后轻则发烧无力、嗅觉味觉障碍,重则呼吸困难,最后发展为多器官功能衰竭。新型冠状病毒,属冠状病毒科冠状病毒属β亚属,具有包膜,刺突蛋白位于包膜上。病毒利用刺突蛋白结合于细胞表面的血管紧张素转化酶 2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)进入细胞。因此刺突蛋白是新型冠状病毒肺炎疫苗或单克隆抗体制备的重要靶点。单克隆抗体由于其特异性好,在科研、诊断有着广泛的应用。近年来,单细胞PCR 技术制备单克隆抗体技术兴起,可以大批量筛选特异性单克隆抗体。本研究基于单细胞 PCR 技术制备新型冠状病毒刺突蛋白单克隆抗体。
[0003]冠状病毒属于套式病毒目(Nidovirales)、冠状病毒科(Coronaviridae)、冠状病毒属(Coronavirus),是目前人类已知的RNA病毒中基因组最大的病毒,其长度为27至32 kb。冠状病毒有至少4个主要结构蛋白,包括刺突蛋白(S),膜蛋白(M),包膜蛋白(E)和核衣壳(N)蛋白,这些蛋白对于病毒与细胞受体结合至关重要,都是构成病毒完成结构所必需的。其中核衣壳蛋白(N)是一种碱性磷蛋白,其中央区与病毒基因组RNA结合,形成卷曲的核衣壳螺旋,是包裏病毒遗传物质的核 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种人源抗SARS
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CoV
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2单克隆抗体,其特征在于:以新冠疫苗志愿者的外周血记忆B细胞进行单细胞PCR得到抗体可变区序列,然后再体外表达纯化获得;所述抗体可变区序列分为抗体轻链可变区和抗体重链可变区,抗体轻链可变区如下(a)或(b):(a)序列表的序列1自5
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末端第1
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312位核苷酸所示的DNA分子和序列2自5
’
末端第1
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369位核苷酸所示的DNA分子;(b)序列表的序列1和2所对应的蛋白质即序列5自N端第1
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104位氨基酸所示的蛋白质分子和序列6自N端第1
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123位氨基酸所示的蛋白质分子;所述的抗体重链可变区为如下(c)或(d):(c)序列表的序列3自5
’
末端第1
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420位核苷酸所示的DNA分子和序列4自5
’
末端第1
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417位核苷酸所示的DNA分子;(d)序列表的3和4所对应的蛋白质即序列7自N端第1
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140位氨基酸所示的蛋白质分子和序列8自N端第1
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139位氨基酸所示的蛋白质分子。2.一种编码人源抗SARS
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CoV
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2单克隆抗体的基因的方法,其特征在于:包括有编码轻链的基因和编码重链的基因,具体如下:编码轻链的基因为如下(1)或(2):(1)序列表的序列1所示的DNA分子;(2)序列表的序列2所示的DNA分子;编码重链的基因为如下(3)或(4):(3)序列表的序列3所示的DNA分子;(4)序列表的序列4所示的DNA分子。3.一种人...
【专利技术属性】
技术研发人员:葛宏华,王博文,缪连军,周琴,秦曦明,
申请(专利权)人:安徽环球基因科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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