包含磺基葡糖胺磺基水解酶的融合蛋白和其方法技术

本文提供了能够转运跨过血脑屏障(BBB)并包含磺基葡糖胺磺基水解酶(SGSH)酶

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】包含磺基葡糖胺磺基水解酶的融合蛋白和其方法
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2020年10月14日提出的美国临时申请序列号63/091,800的优先权。以上提及的申请的全部内含以引用的方式并入本文中。

技术介绍

[0003]圣菲利波综合征(Sanfilippo syndrome)或MPS III是一种罕见的神经退行性病症，由溶酶体功能的某些缺陷引起。圣菲利波综合征最常见的类型是A型，由SGSH基因的基因突变引起。N
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磺基葡糖胺磺基水解酶(SGSH)的活性不足会导致硫酸乙酰肝素衍生的寡糖积聚，并导致多个器官和组织，尤其是脑和脊髓中的溶酶体功能障碍。圣菲利波综合征的治疗仍然主要是支持性的；虽然缺乏的酶可以经静脉内注射，但由于重组酶难以穿过血脑屏障(BBB)，因此它对大脑的影响很小。因此，需要更有效的疗法来治疗A型圣菲利波综合征的周围和中枢神经系统(CNS)症状。

技术实现思路

[0004]因此，本文提供了一种特定酶替代疗法，所述疗法能够跨过BBB并治疗A型圣菲利波综合征的周围与CNS表现。具体地说，某本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种蛋白质，所述蛋白质包含：a.第一Fc多肽，所述第一Fc多肽连接于第一N
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磺基葡糖胺磺基水解酶(SGSH)氨基酸序列、SGSH变体氨基酸序列或其催化活性片段；和b.第二Fc多肽，所述第二Fc多肽连接于第二SGSH氨基酸序列、SGSH变体氨基酸序列或其催化活性片段，其中所述第二Fc多肽能够特异性结合于运铁蛋白受体(TfR)；并且其中所述第二Fc多肽包含与SEQ ID NO:37具有至少80％同一性的序列并具有根据EU编号在位置389处的Ala。2.如权利要求1所述的蛋白质，其中根据EU编号，所述第二Fc多肽还包含：在位置380处的Glu；和在位置390处的Asn。3.如权利要求2所述的蛋白质，其中根据EU编号，所述第二Fc多肽在以下位置处还包含：i.在位置384处的Tyr；ii.在位置386处的Thr；iii.在位置387处的Glu；iv.在位置388处的Trp；v.在位置413处的Thr；vi.在位置415处的Glu；vii.在位置416处的Glu；以及viii.在位置421处的Phe。4.如权利要求1
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3中任一项所述的蛋白质，其中所述蛋白质能够转运跨过受试者的血脑屏障。5.如权利要求1
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4中任一项所述的蛋白质，其中所述蛋白质以约100nM至约500nM或任选地约150nM至约400nM的亲和力结合于TfR。6.如权利要求1
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5中任一项所述的蛋白质，其中所述第二Fc多肽结合于所述TfR的顶端结构域。7.如权利要求1
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6中任一项所述的蛋白质，其中所述蛋白质与所述TfR的结合基本上不抑制运铁蛋白与所述TfR的结合。8.如权利要求1
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7中任一项所述的蛋白质，其中所述第一SGSH氨基酸序列包含与SEQ ID NO:58
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60中的任一者具有至少80％、85％、90％或95％同一性的氨基酸序列。9.如权利要求8所述的蛋白质，其中所述第一SGSH氨基酸序列包含SEQ ID NO:58
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60中的任一者的氨基酸序列。10.如权利要求1
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9中任一项所述的蛋白质，其中所述第二SGSH氨基酸序列包含与SEQ ID NO:58
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60中的任一者具有至少80％、85％、90％或95％同一性的氨基酸序列。11.如权利要求10所述的蛋白质，其中所述第二SGSH氨基酸序列包含SEQ ID NO:58
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60中的任一者的氨基酸序列。12.如权利要求1
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11中任一项所述的蛋白质，其中所述第一Fc多肽通过肽键或通过多肽接头连接于所述第一SGSH氨基酸序列、SGSH变体氨基酸序列或其催化活性片段。13.如权利要求1
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12中任一项所述的蛋白质，其中所述第二Fc多肽通过肽键或通过多肽接头连接于所述第二SGSH氨基酸序列、SGSH变体氨基酸序列或其催化活性片段。
14.如权利要求12或13所述的蛋白质，其中所述多肽接头是柔性多肽接头。15.如权利要求14所述的蛋白质，其中所述柔性多肽接头是富甘氨酸接头。16.如权利要求12
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15中任一项所述的蛋白质，其中所述多肽接头是GS(SEQ ID NO:7)、G4S(SEQ ID NO:8)或(G4S)2(SEQ ID NO:9)。17.如权利要求1
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16中任一项所述的蛋白质，其中所述第一Fc多肽的N端连接于所述第一SGSH氨基酸序列、SGSH变体氨基酸序列或其催化活性片段。18.如权利要求1
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16中任一项所述的蛋白质，其中所述第一Fc多肽的C端连接于所述第一SGSH氨基酸序列、SGSH变体氨基酸序列或其催化活性片段。19.如权利要求1
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18中任一项所述的蛋白质，其中所述第二Fc多肽的N端连接于所述第二SGSH氨基酸序列、SGSH变体氨基酸序列或其催化活性片段。20.如权利要求1
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18中任一项所述的蛋白质，其中所述第二Fc多肽的C端连接于所述第二SGSH氨基酸序列、SGSH变体氨基酸序列或其催化活性片段。21.如权利要求1
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16中任一项所述的蛋白质，其中所述第一Fc多肽的N端连接于所述第一SGSH氨基酸序列、SGSH变体氨基酸序列或其催化活性片段；并且其中所述第二Fc多肽的N端连接于所述第二SGSH氨基酸序列、SGSH变体氨基酸序列或其催化活性片段。22.如权利要求1
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16中任一项所述的蛋白质，其中所述第一Fc多肽的C端连接于所述第一SGSH氨基酸序列、SGSH变体氨基酸序列或其催化活性片段；并且其中所述第二Fc多肽的C端连接于所述第二SGSH氨基酸序列、SGSH变体氨基酸序列或其催化活性片段。23.如权利要求1
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22中任一项所述的蛋白质，其中所述第一Fc多肽和所述第二Fc多肽各自含有促进异二聚合的修饰。24.如权利要求23所述的蛋白质，其中根据EU编号，所述Fc多肽中的一者具有T366W取代并且另一Fc多肽具有T366S、L368A和Y407V取代。25.如权利要求24所述的蛋白质，其中所述第一Fc多肽含有T366S、L368A和Y407V取代并且所述第二Fc多肽含有T366W取代。26.如权利要求25所述的蛋白质，其中所述第一Fc多肽包含与SEQ ID NO:12
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19和28
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31中的任一者具有至少80％、85％、90％、95％或100％同一性的氨基酸序列；并且所述第二Fc多肽包含与SEQ ID NO:34
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41和54
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57中的任一者具有至少80％、85％、90％、95％或100％同一性的氨基酸序列。27.如权利要求24所述的蛋白质，其中所述第一Fc多肽含有T366W取代并且所述第二Fc多肽含有T366S、L368A和Y407V取代。28.如权利要求27所述的蛋白质，其中所述第一Fc多肽包含与SEQ ID NO:24
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27中的任一者具有至少80％、85％、90％、95％或100％同一性的氨基酸序列；并且所述第二Fc多肽包含与SEQ ID NO:48
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53中的任一者具有至少80％、85％、90％、95％或100％同一性的氨基酸序列。29.如权利要求1
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28中任一项所述的蛋白质，其中所述第一Fc多肽和/或所述第二Fc多肽包含天然FcRn结合位点。30.如权利要求1
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28中任一项所述的蛋白质，其中所述第一Fc多肽和所述第二Fc多肽不具有效应功能。31.如权利要求1
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28中任一项所述的蛋白质，其中所述第一Fc多肽和/或所述第二Fc多
肽包括降低效应功能的修饰。32.如权利要求31所述的蛋白质，其中所述降低效应功能的修饰是根据EU编号在位置234处的Ala和在位置235处的Ala的取代。33.如权利要求32所述的蛋白质，其中所述第一Fc多肽包含与SEQ ID NO:14
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19和26
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31中的任一者具有至少80％、85％、90％、95％或100％同一性的氨基酸序列。34.如权利要求33所述的蛋白质，其中所述第一Fc多肽包含与SEQ ID NO:14、15、28和29中的任一者具有至少80％、85％、90％、95％或100％同一性的氨基酸序列。35.如权利要求33所述的蛋白质，其中所述第一Fc多肽包含与SEQ ID NO:18、19、30和31中的任一者具有至少80％、85％、90％、95％或100％同一性的氨基酸序列。36.如权利要求32所述的蛋白质，其中连接于所述第一SGSH氨基酸序列的所述第一Fc多肽包含与SEQ ID NO:61
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88和117
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118中的任一者具有至少80％、85％、90％、95％或100％同一性的氨基酸序列。37.如权利要求36所述的蛋白质，其中连接于所述第一SGSH氨基酸序列的所述第一Fc多肽包含与SEQ ID NO:61
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68、73
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76、81
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84和117
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118中的任一者具有至少80％、85％、90％、95％或100％同一性的氨基酸序列。38.如权利要求32
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37中任一项所述的蛋白质，其中所述第二Fc多肽包含与SEQ ID NO:36
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41和50
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57中的任一者具有至少80％、85％、90％、95％或100％同一性的氨基酸序列。39.如权利要求38所述的蛋白质，其中所述第二Fc多肽包含与SEQ ID NO:36、37、54和55中的任一者具有至少80％、85％、90％、95％或100％同一性的氨基酸序列。40.如权利要求38所述的蛋白质，其中所述第二Fc多肽包含与SEQ ID NO:40、41、56和57中的任一者具有至少80％、85％、90％、95％或100％同一性的氨基酸序列。41.如权利要求32
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37中任一项所述的蛋白质，其中连接于所述第二SGSH氨基酸序列的所述第二Fc多肽包含与SEQ ID NO:89
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116和119
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120中的任一者具有至少80％、85％、90％、95％或100％同一性的氨基酸序列。42.如权利要求41所述的蛋白质，其中连接于所述第二SGSH氨基酸序列的所述第二Fc多肽包含与SEQ ID NO:89
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96、101
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104、109
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112和119
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120中的任一者具有至少80％、85％、90％、95％或100％同一性的氨基酸序列。43.如权利要求1
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42中任一项所述的蛋白质，其中相对于天然Fc序列，所述第一Fc...

【专利技术属性】
技术研发人员：T，
申请(专利权)人：戴纳立制药公司，
类型：发明
国别省市：