一种透明化胶原蛋白膜的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种透明化胶原蛋白膜的制备方法，所述方法包括如下步骤：(a)获得动物源性脱细胞胶原蛋白膜；(b)对胶原蛋白膜进行至少三次透明化。本发明专利技术使用动物源性材料经脱细胞获得胶原蛋白膜，使其三螺旋结构更贴近于组织本身，具有良好的力学性能和降解性能。同时，根据本发明专利技术的方法制备的胶原蛋白膜经过三次透明化处理，胶原蛋网状结构均匀，且稳定呈均匀透明的色泽，不会受pH的变化而影响材料的透光度，能够在加速创口修复愈合过程的同时保持愈合后组织的美观。合后组织的美观。合后组织的美观。

【技术实现步骤摘要】
一种透明化胶原蛋白膜的制备方法


[0001]本专利技术涉及生物医用材料领域，特别是涉及一种透明化胶原蛋白膜的制备方法。

技术介绍

[0002]角膜皮样瘤是眼部良性肿瘤中最常见的，是一种类似肿瘤的先天性异常，在组织学上并非真正的肿瘤，而属典型的迷芽瘤。角膜皮样瘤通常在出生时就存在，随年龄增长和眼球发育略有增大，约占儿童外眼肿瘤的20％。角膜皮样瘤常发生在角巩膜缘颞下及颞侧，也可发生在角膜的任意位置，角巩膜缘常为皮样瘤的中心，皮样瘤一半在角膜上，另一半在巩膜表面；皮样瘤为一圆形、扁平、黄色或粉红色，像小山丘状的肿物，表面可见毛发。角膜皮样瘤不仅影响外观，随年龄增长还可侵犯瞳孔区角膜而影响视力，造成角膜散光，散光逐渐增大，就会造成视力下降，由此形成弱视。
[0003]由于角膜皮样瘤是先天性的角膜良性肿瘤，药物治疗无效。如果肿瘤较小，不影响视功能和外貌，可暂时观察；如果肿瘤增大影响视力或影响外观，且较为表浅的肿物应尽早手术切除，但切除后创伤部分若不进行修复会留有疤痕。现有的补片类材料大多为脱细胞基质材料，如真皮、小肠粘膜等；或合成高分子材料，如PGA、PLGA、PCL、透明质酸等物质聚合而成，这些补片材料通过工艺合成后会显现出乳白色或微黄色，若用于创伤区域修复则会导致创伤区与正常角膜、巩膜颜色产生较大差别，会影响美观；每个人的巩膜颜色也有细微的差别，为美观而定制化生产的补片成本高昂，色泽却难以长期控制。同时，人工合成的胶原蛋白螺旋结构较差，部分螺旋结构不完整，表现为力学性能差，降解速度过快。
[0004]因此，本领域迫切需要一种具有良好的力学性能、降解性能，并能够保持愈合后组织美观的补片类材料。

技术实现思路

[0005]专利技术要解决的问题
[0006]基于现有技术中存在的上述问题，本专利技术的目的是提供一种透明化胶原蛋白膜，具有良好的力学性能和降解性能，并且可以体现出创伤处原本的组织颜色和形态。
[0007]用于解决问题的方案
[0008]本专利技术提供了一种透明化胶原蛋白膜的制备方法，其中，所述方法包括如下步骤：
[0009](a)获得动物源性脱细胞胶原蛋白膜；
[0010](b)对胶原蛋白膜进行至少三次透明化。
[0011]优选地，所述步骤(a)包括：
[0012](a1)取动物组织，去除表面的脂肪和杂质；
[0013](a2)处理去除了表面的脂肪和杂质的动物组织；
[0014](a3)使用冷冻干燥机冻干步骤(a2)处理后的动物组织，获得干态的脱细胞胶原蛋白膜。
[0015]优选地，所述处理包括：使用氯化钠溶液清洗；
[0016]更优选地，所述处理包括：使用氯化钠溶液清洗后，使用盐酸处理，再使用纯化水清洗；
[0017]进一步优选地，所述处理包括：使用氯化钠溶液清洗后，使用盐酸处理，再使用纯化水清洗，然后使用SDS溶液处理，再使用纯化水清洗。
[0018]优选地，所述动物组织包括猪皮和/或猪小肠粘膜层；更优选地，所述动物组织为猪皮或猪小肠粘膜层中的一种。
[0019]优选地，所述氯化钠溶液为0.1％
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3％的氯化钠溶液；更优选地，所述氯化钠溶液为0.9％的氯化钠溶液。
[0020]优选地，所述盐酸为1％
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5％的盐酸；更优选地，所述盐酸为2％的盐酸。
[0021]优选地，所述SDS溶液为1％
‑
5％的SDS溶液；更优选地，所述SDS溶液为1％的SDS溶液。
[0022]优选地，所述至少三次透明化包括五次透明化；
[0023]更优选地，所述至少三次透明化包括四次透明化；
[0024]进一步优选地，所述至少三次透明化包括三次透明化；
[0025]最优选地，所述至少三次透明化包括第一次透明化、第二次透明化和第三次透明化。
[0026]优选地，所述第一次透明化包括：将步骤(a)制备得到的干态的脱细胞胶原蛋白膜水化透明，并使用氢氧化钠溶液处理。
[0027]优选地，所述第二次透明化包括：纯化水清洗后，使用乙酸溶液浸泡处理。
[0028]优选地，所述第三次透明化包括：纯化水清洗后，将胶原蛋白膜水浴加热，然后将胶原蛋白膜置于氢氧化钠溶液中快速降温。
[0029]优选地，所述步骤(b)还包括：将降温后的胶原蛋白膜使用纯化水清洗后，加纯化水至没过胶原蛋白膜，并使用盐酸调节pH值，再次使用纯化水清洗后，即获得透明化胶原蛋白膜。
[0030]优选地，所述氢氧化钠溶液为0.3％
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10％的氢氧化钠溶液；更优选地，所述氢氧化钠溶液为1％的氢氧化钠溶液。
[0031]优选地，所述乙酸溶液为1％
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5％的乙酸溶液；更优选地，所述乙酸溶液为1％的乙酸溶液。
[0032]优选地，所述水浴加热是在30℃
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70℃水中加热5
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15分钟；更优选地，所述水浴加热是在50℃水中加热10分钟。
[0033]优选地，所述氢氧化钠溶液为0℃
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20℃的氢氧化钠溶液；更优选地，所述氢氧化钠溶液为0℃的氢氧化钠溶液。
[0034]优选地，所述盐酸为0.1％
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10％的盐酸；更优选地，所述盐酸为1％的盐酸。
[0035]优选地，所述调节pH值为调节pH值至6
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7；更优选地，所述调节pH值为调节pH值至7。
[0036]本专利技术还提供了一种根据所述方法制备的胶原蛋白膜，其中，所述胶原蛋白膜为透明化胶原蛋白膜。
[0037]本专利技术还提供了一种根据所述方法制备得到的胶原蛋白膜在制备人或动物的组织器官修复产品中的应用。
[0038]优选地，所述组织器官为角膜。
[0039]专利技术的效果
[0040]本专利技术提供了一种透明化胶原蛋白膜的制备方法，使用动物源性材料经脱细胞获得胶原蛋白膜，使其三螺旋结构更贴近于组织本身，具有良好的力学性能和降解性能。根据本专利技术的方法制备的胶原蛋白膜经过三次透明化处理后的胶原蛋网状结构均匀，且稳定呈均匀透明的色泽，不会受pH的变化而影响材料的透光度，能够在加速创口修复愈合过程的同时保持愈合后组织的美观。
附图说明
[0041]图1为产品透光度随处理步骤的变化数据。
[0042]图2为处理后产品浸泡入不同pH溶液中，产品的透光度随pH值的变化数据。
[0043]图3为水化的猪小肠粘膜脱细胞胶原蛋白膜。
[0044]图4为透明化的猪小肠粘膜脱细胞胶原蛋白膜。(A)透明化猪小肠粘膜脱细胞胶原蛋白膜放置于培养皿上的透明状态；(B)透明化猪小肠粘膜脱细胞胶原蛋白膜放置于手套上的透明状态。
[0045]图5为水化的猪真皮基质脱细胞胶原蛋白膜。
[0046]图6为透明化的猪真皮基质脱细胞胶原蛋白膜。(A)透明化猪真皮基质脱细胞胶原蛋白膜放置于培养皿上的透明状态；(B)透明化猪真皮本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种透明化胶原蛋白膜的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：(a)获得动物源性脱细胞胶原蛋白膜；(b)对胶原蛋白膜进行至少三次透明化。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(a)包括：(a1)取动物组织，去除表面的脂肪和杂质；(a2)处理去除了表面的脂肪和杂质的动物组织；(a3)使用冷冻干燥机冻干步骤(a2)处理后的动物组织，获得干态的脱细胞胶原蛋白膜。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(a2)中所述处理包括：使用氯化钠溶液清洗；优选地，步骤(a2)中所述处理包括：使用氯化钠溶液清洗后，使用盐酸处理，再使用纯化水清洗；更优选地，步骤(a2)中所述处理包括：使用氯化钠溶液清洗后，使用盐酸处理，再使用纯化水清洗，然后使用SDS溶液处理，再使用纯化水清洗。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：优选地，所述动物组织包括猪皮和/或猪小肠粘膜层，更优选地，所述动物组织为猪皮或猪小肠粘膜层中的一种；优选地，所述氯化钠溶液为0.1％
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3％的氯化钠溶液，更优选地，所述氯化钠溶液为0.9％的氯化钠溶液；优选地，所述盐酸为1％
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5％的盐酸，更优选地，所述盐酸为2％的盐酸；优选地，所述SDS溶液为1％
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5％的SDS溶液，更优选地，所述SDS溶液为1％的SDS溶液。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述至少三次透明化包括五次透明化；优选地，所述至少三次透明化包括四次透明化；更优选地，所述至少三次透明化包括三次透明化；进一步优选地，所述至少三次透明化包括第一次透明化、第二次透明化和第三次透明化。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述第一次透明化包括：将步骤(a...

【专利技术属性】
技术研发人员：李啸宏，陈维明，刘昌俊，肖志恒，
申请(专利权)人：诺一迈尔苏州医学科技有限公司，
类型：发明
国别省市：