一株抑制解脂耶氏酵母菌的戊糖乳植物杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株抑制解脂耶氏酵母菌的戊糖乳植物杆菌及其应用。该戊糖乳植物杆菌保藏于中国典型培养物保藏中心；保藏地址：湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内；保藏日期：2022年4月20日；保藏编号为CCTCC NO：M 2022431；分类学命名为戊糖乳杆菌Lactiplantibacillus pentosus L14。其具有明显抑制解脂耶氏酵母Yar.lipolytica生长的作用，将其应用于泡菜发酵中能够强化泡菜风味、促进泡菜发酵过程、降低泡菜中亚硝酸盐含量以及预防或减少泡菜液面生花。及预防或减少泡菜液面生花。及预防或减少泡菜液面生花。

【技术实现步骤摘要】
一株抑制解脂耶氏酵母菌的戊糖乳植物杆菌及其应用


[0001]本专利技术涉及微生物
，具体而言，涉及一株抑制解脂耶氏酵母菌的戊糖乳植物杆菌及其应用。

技术介绍

[0002]泡菜是家喻户晓的佐餐佳肴，其清脆爽口、风味独特、营养丰富，还具有促进消化、降低胆固醇、抗肿瘤等作用。泡菜在自然发酵过程中受氧气和温度的影响较大，一旦发酵条件不适(如温度升高或氧气进入等)，腐败微生物便有机可乘，致使泡菜产生不同程度的腐败。“生花”是常见的泡菜腐败现象，表现为泡菜液面出现白膜、泡菜水浑浊、泡菜质地变软、甚至伴有馊臭味等，造成严重经济损失。有研究表明，解脂耶氏酵母是泡菜膜醭中的主要微生物。
[0003]食品工业上使用的抑菌剂多为苯甲酸及其盐类、山梨酸及其盐类等，这些工业抑菌剂对食品本身的风味特征有一定影响，另外，若实际使用浓度超过限制则会造成安全隐患。因此，筛选出能抑制解脂耶氏酵母生长且具有提高风味品质作用的有益菌，将其应用于泡菜发酵中，预防生花现象的产生，从而提高泡菜产品的质量是具有重要意义的。
[0004]鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一株抑制解脂耶氏酵母菌的戊糖乳植物杆菌及其应用。该戊糖乳植物杆菌能够有效抑制解脂耶氏酵母的生长，并且能够预防或减少泡菜液面生花、强化泡菜风味。
[0006]本专利技术是这样实现的：
[0007]第一方面，本专利技术提供了一株戊糖乳植物杆菌，命名为L14，已保藏于中国典型培养物保藏中心；保藏地址：湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内；保藏日期：2022年4月20日；保藏编号为CCTCC NO：M2022431；分类学命名为戊糖乳杆菌Lactiplantibacillus pentosus L14。
[0008]本专利技术的戊糖乳植物杆菌Lactiplantibacillus pentosus L14(简写为Lb.pentosus L14)从四川省成都市某厂的泡青菜中筛选获得。
[0009]其中，Lb.pentosus L14的16S rRNA基因序列如SEQ ID NO.1所示。扩增所述Lb.pentosus L14的16S rRNA基因序列的PCR引物为细菌通用引物27F(SEQ ID NO.3)5
’
AGAGTTTGATCMTGGCTCAG3
’
和1492R(SEQ ID NO.4)5
’
GGTTACCTTGTTACGACTT3
’
。
[0010]将Lb.pentosus L14接种在MRS固体培养基中生长，其菌落特征为：呈乳白色，圆形，表面光滑，边缘整齐。
[0011]第二方面，本专利技术提供了上述戊糖乳植物杆菌在抑制酵母菌生长中的应用。
[0012]在一些实施例中，上述酵母菌包括解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica，简写为Yar.lipolytica)，其为造成泡菜液面生花的主要微生物。
[0013]第三方面，本专利技术提供了上述戊糖乳植物杆菌在强化泡菜风味中的应用。
[0014]第四方面，本专利技术提供了上述戊糖乳植物杆菌在预防或减少泡菜液面生花中的应用。
[0015]第五方面，本专利技术提供了上述戊糖乳植物杆菌在促进泡菜发酵中的应用。
[0016]第六方面，本专利技术提供了上述戊糖乳植物杆菌在降低泡菜中亚硝酸盐含量中的应用。
[0017]第七方面，本专利技术提供了一种含有上述戊糖乳植物杆菌和/或上述戊糖乳植物杆菌的发酵产物的微生物菌剂。
[0018]第八方面，本专利技术提供了一种解脂耶氏酵母抑制剂，该解脂耶氏酵母抑制剂含有上述戊糖乳植物杆菌和/或上述戊糖乳植物杆菌的发酵产物。
[0019]在本专利技术中，上述戊糖乳植物杆菌的发酵产物的制备步骤如下：将上述戊糖乳植物杆菌Lb.pentosus L14接种于MRS液体培养基中，于37℃下震荡培养24
‑
48h；将培养后所得培养液在5000rpm下离心，获得上清液；上清液经0.45μm滤膜过滤，获得无菌发酵产物。
[0020]在制备上述微生物菌剂和解脂耶氏酵母抑制剂时，Lb.pentosus L14发酵产物的添加量≥100μL。
[0021]第九方面，本专利技术提供了一种抑制泡菜生花的方法，其包括：将上述戊糖乳植物杆菌Lb.pentosus L14接种于泡菜中，于25℃下密封发酵7天；
[0022]上述戊糖乳植物杆菌在泡菜中的活菌数≥106CFU/mL。
[0023]本专利技术具有以下有益效果：
[0024]本专利技术从四川泡青菜中筛选出一株戊糖乳植物杆菌Lb.pentosus L14，该Lb.pentosus L14具有明显抑制解脂耶氏酵母Yar.lipolytica生长的作用，将其应用于泡菜发酵中能够强化泡菜风味、促进泡菜发酵过程、降低泡菜中亚硝酸盐含量以及预防或减少泡菜液面生花。
附图说明
[0025]为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
[0026]图1为戊糖乳植物杆菌Lb.pentosus L14的系统发育树分析；
[0027]图2为戊糖乳植物杆菌Lb.pentosus L14及其无菌发酵产物对解脂耶氏酵母Yarrowia lipolytica生长的抑制活性。
[0028]图3为戊糖乳植物杆菌Lb.pentosus L14及其无菌发酵产物对解脂耶氏酵母Yarrowia lipolytica生物膜形成的抑制活性。
[0029]图4为戊糖乳植物杆菌Lb.pentosus L14对泡菜发酵过程中pH(A)、可滴定酸度(B)和亚硝酸盐(C)的影响。
[0030]图5为戊糖乳植物杆菌Lb.pentosus L14对泡菜发酵过程中挥发性风味物质含量的影响。
具体实施方式
[0031]为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
[0032]以下结合实施例对本专利技术的特征和性能作进一步的详细描述。
[0033]下述实施例中所涉及的培养基如下：
[0034]MRS液体培养基：蛋白胨10g/L，牛肉浸粉8g/L，酵母提取物4g/L，葡萄糖20g/L，无水山梨醇单油酸酯1ml/L，磷酸氢二钾2g/L，三水醋酸钠5g/L，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁7H2O 0.2g/L，硫酸锰4H2O 0.05g/L。121℃灭菌15分钟。
[0035]YPD液体培养基：酵母提取物10g/L，蛋白胨20g/L，葡萄糖20g/L。1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株戊糖乳植物杆菌(Lactiplantibacillus pentosus)，其特征在于，所述戊糖乳植物杆菌命名为Lactiplantibacillus pentosus L14，保藏编号为CCTCC NO：M 2022431。2.如权利要求1所述的戊糖乳植物杆菌在抑制酵母菌生长中的应用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述酵母菌包括解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)。4.如权利要求1所述的戊糖乳植物杆菌在强化泡菜风味中的应用。5.如权利要求1所述的戊糖乳植物杆菌在预防或减少泡菜液面生花中的应用。6.如权利要求1所述的戊糖...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴重德，米婷，徐步青，金垚，黄钧，周荣清，
申请(专利权)人：四川大学，
类型：发明
国别省市：