一种L-岩藻糖修饰的原地衣硬酸阳离子纳米脂质体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供一种L

【技术实现步骤摘要】
一种L
‑
岩藻糖修饰的原地衣硬酸阳离子纳米脂质体及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及抗菌药物
，尤其涉及一种L
‑
岩藻糖修饰的原地衣硬酸阳离子纳米脂质体及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]白色念珠菌(Candida albicans，C.albicans)是一种条件致病菌，全国每年由其引发的各类感染性疾病高达千万例，是医院第四种最常见的病原菌。C.albicans坚固的生物被膜和不断增强的耐药率使得C.albicans感染的治疗愈加困难，目前药物是治疗C.albicans感染的主要手段，但是传统抗真菌药物种类很少，具有毒副作用强、价格昂贵的缺点。
[0003]随着抗真菌药物的广泛使用，真菌的多药耐药性也日趋严重。研究表明，白色念珠菌被膜的形成是其对多种抗真菌药物耐受的原因之一，菌群与上皮细胞表面的受体结合并分泌出胞外多糖或蛋白，形成膜状物，即白色念珠菌生物被膜。生物被膜将自身包裹在自发粘附的多糖和蛋白质层中，从而抵抗药物的杀菌作用，这便是白色念珠菌对常用治疗药物产生耐受性的机理。因此可见，抑制白色念珠菌被膜对于抑制白色念珠菌活性及逆转多药耐药性的产生具有十分重要的意义。
[0004]原地衣硬酸是从地衣中分离出的一种有机酸，已有研究证明将原地衣硬酸作为药物对白色念珠菌具有较好的抑制作用，同时能够逆转白色念珠菌耐药性的产生，但是原地衣硬酸与白色念珠菌的亲和性较差，无法穿透白色念珠菌被膜，起到抑制白色念珠菌的作用。
[0005]因此急需对原地衣硬酸进行改性，提高其对白色念珠菌被膜的穿透性，进而提高对白色念珠菌的抑制作用。

技术实现思路

[0006]为了解决上述现有技术中的技术难题，本专利提供一种使用L
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岩藻糖修饰的原地衣硬酸阳离子纳米脂质体及其制备方法和应用，该纳米脂质体可以高度亲和白色念珠菌，表现出较好的抑菌效果。
[0007]本专利技术的技术方案为：
[0008]本专利技术提供一种L
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岩藻糖修饰的原地衣硬酸阳离子纳米脂质体，其特征在于，采用L
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岩藻糖/油酸胺耦合物对原地衣硬酸阳离子脂质体表面进行修饰，经处理后得到粒径在135nm～165nm范围内的L
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岩藻糖修饰的原地衣硬酸阳离子纳米脂质体。
[0009]本专利技术还提供一种L
‑
岩藻糖修饰的原地衣硬的酸阳离子纳米脂质体的制备方法，具体包括以下步骤：
[0010]S1制备L
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岩藻糖/油酸胺耦合物：
[0011]称取一定配比的L
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岩藻糖和油酸胺，溶解于无水乙醇中得到混合液，将混合液置
于圆底烧瓶中加热反应，旋转蒸发除去无水乙醇后，得到L
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岩藻糖/油酸胺耦合物；
[0012]S2制备L
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岩藻糖修饰的原地衣硬酸阳离子脂质体悬液：
[0013]称取一定配比的大豆磷脂、阳离子脂质、胆固醇硫酸钠、L
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岩藻糖/油酸胺耦合物和原地衣硬酸，溶解于无水乙醇中得到混合液，将混合液置于圆底烧瓶中旋转蒸发形成薄膜，加入缓冲液洗膜得到L
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岩藻糖修饰的原地衣硬酸阳离子脂质体悬液；
[0014]S3制备L
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岩藻糖修饰的原地衣硬酸阳离子纳米脂质体:
[0015]将L
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岩藻糖修饰的原地衣硬酸阳离子脂质体悬液经超声波细胞破碎仪处理后通过微孔滤膜过滤，冷冻干燥保存，得到L
‑
岩藻糖修饰的原地衣硬酸阳离子纳米脂质体。
[0016]具体地，步骤S1中所述L
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岩藻糖和油酸胺按照质量比为1:0.5～1:2的配比混合。
[0017]具体地，步骤S1中所述加热反应，反应时间为4～6h，加热温度为80℃～90℃。
[0018]具体地，步骤S2中所述大豆磷脂、阳离子脂质体、胆固醇硫酸钠、L
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岩藻糖
‑
油酸胺耦合物和原地衣硬酸按照质量比为1:0.01:0.05:0.05:0.01～1:0.01:0.05:0.05:0.1的配比混合。
[0019]具体地，步骤S2中所述阳离子脂质体为DOTMA(1,2
‑
双十八烯氧基
‑3‑
甲基铵丙烷)或DOTAP((1,2
‑
二油氧基丙基)三甲基氯化铵)中的任一种。
[0020]具体地，步骤S2中所述缓冲液为PBS缓冲液或Tris
‑
HCl缓冲液中的任一种，缓冲液的pH值为6.0
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8.0。
[0021]具体地，步骤S3中超声波细胞破碎仪处理时间为1
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5min。
[0022]本专利技术还提供了一种L
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岩藻糖修饰的原地衣硬酸阳离子纳米脂质体在抑制白色念珠菌的皮肤喷剂药物中的应用。
[0023]本专利技术还提供了一种L
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岩藻糖修饰的原地衣硬酸阳离子纳米脂质体在抑制白色念珠菌的腔道混合凝胶或软膏药物中的应用。
[0024]本专利技术采用L
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岩藻糖与油酸胺耦合物，装载入原地衣硬酸的阳离子脂质体表面，L
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岩藻糖是一种多糖，能够与白念珠菌表面的鲨烷醇类脂质层结合形成特殊的复合物，该复合物为两者提供了更多的结合位点，大大提高对白色念珠菌的亲和性和渗透性；此外该复合物的形成还会导致白念珠菌表面脂质层的变性，从而使其对白念珠菌的渗透性更高；而油酸胺对白色念珠菌被膜具有较好渗透性，以L
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岩藻糖与油酸胺耦合物作为白色念珠菌的粘附受体，其修饰在原地衣硬酸阳离子纳米脂质体的表面，提高了纳米脂质体对白色念珠菌的渗透性，有助于原地衣硬酸发挥抑制白色念珠菌被膜的作用，增强抑菌效果。
[0025]本专利技术的有益效果：
[0026](1)本专利技术提供的L
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岩藻糖修饰的原地衣硬酸阳离子的纳米脂质体粒径在150nm左右，具有较大的比表面积，粒径小，且表面带正电荷，可以与白色念珠菌表面负电荷相互吸引，更易渗透到细胞内发挥抑制白色念珠菌的作用；
[0027](2)本专利技术以L
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岩藻糖与油酸胺耦合物作为白色念珠菌的粘附受体，其修饰在原地衣硬酸阳离子纳米脂质体的表面，在表面提供更多的结合位点，提高了纳米脂质体对白色念珠菌的渗透性，有助于原地衣硬酸发挥抑制白色念珠菌被膜的作用。
附图说明
[0028]为了更清楚地说明本申请实施例的技术方案，下面将对本申请实施例中所需要使
用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本申请的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
[0029]图1为L
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岩藻糖修饰的原地衣硬酸阳离子纳本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种L
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岩藻糖修饰的原地衣硬酸阳离子纳米脂质体，其特征在于，采用L
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岩藻糖/油酸胺耦合物对原地衣硬酸阳离子脂质体表面进行修饰，经处理后得到粒径在135nm～165nm范围内的L
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岩藻糖修饰的原地衣硬酸阳离子纳米脂质体。2.根据权利要求1所述的L
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岩藻糖修饰的原地衣硬酸阳离子纳米脂质体的制备方法，其特征在于：S1制备L
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岩藻糖/油酸胺耦合物：称取一定配比的L
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岩藻糖和油酸胺，溶解于无水乙醇中得到混合液，将混合液置于圆底烧瓶中加热反应，旋转蒸发除去无水乙醇后，得到L
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岩藻糖/油酸胺耦合物；S2制备L
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岩藻糖修饰的原地衣硬酸阳离子脂质体悬液：称取一定配比的大豆磷脂、阳离子脂质、胆固醇硫酸钠、L
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岩藻糖/油酸胺耦合物和原地衣硬酸，溶解于无水乙醇中得到混合液，将混合液置于圆底烧瓶中旋转蒸发形成薄膜，加入缓冲液洗膜得到L
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岩藻糖修饰的原地衣硬酸阳离子脂质体悬液；S3制备L
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岩藻糖修饰的原地衣硬酸阳离子纳米脂质体:将L
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岩藻糖修饰的原地衣硬酸阳离子脂质体悬液经超声波细胞破碎仪处理后通过微孔滤膜过滤，冷冻干燥保存，得到L
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岩藻糖修饰的原地衣硬酸阳离子纳米脂质体。3.根据权利要求2所述的L
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岩藻糖修饰的原地衣硬酸阳离子纳米脂质体的制备方法，其特征在于，步骤S1中所述L
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岩藻糖和油酸胺按照质量比为1:0.5～1...

【专利技术属性】
技术研发人员：刁志超，常文强，张海娟，李海刚，张淳，
申请(专利权)人：山东仁瑞生物科技有限公司临沂大学，
类型：发明
国别省市：