抗血清淀粉样蛋白A抗体、检测血清淀粉样蛋白A的试剂和试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种抗血清淀粉样蛋白A抗体、检测血清淀粉样蛋白A的试剂和试剂盒，涉及抗体技术领域。本发明专利技术公开的抗血清淀粉样蛋白A抗体包括重链互补决定区和轻链互补决定区。该抗体为血清淀粉样蛋白A的检测提供了重要的原料来源。原料来源。

【技术实现步骤摘要】
抗血清淀粉样蛋白A抗体、检测血清淀粉样蛋白A的试剂和试剂盒


[0001]本专利技术涉及抗体
，具体而言，涉及一种抗血清淀粉样蛋白A抗体、检测血清淀粉样蛋白A的试剂和试剂盒。

技术介绍

[0002]血清淀粉样蛋白A(Serum amyloid A，SAA)是一种非特异性急性时相反应蛋白，由104个氨基酸组成，属于载脂蛋白家族中的异质类蛋白质。在急性时期反应中，经IL
‑
1、IL
‑
6和TNF刺激，SAA在肝脏中由被激活的巨噬细胞和纤维母细胞合成，可升高到最初浓度的100
‑
1000倍，但半衰期极短，只有50分钟左右。
[0003]SAA在病毒和细菌感染中均升高，而病毒感染中CRP几乎不升高或升高不明显。对于微弱的炎症刺激，SAA较CRP更灵敏，且超过参考范围上限时间早于CRP，升高更早，恢复时下降更快，幅度更大。因此，在CRP正常的病毒感染患者、非侵袭性或早期侵袭性细菌感染患者中，SAA是一个较为敏感的指标。在小儿感染性疾病早期，由于小儿患者的体征和症状不明确，很难鉴别小儿患者是细菌感染还是病毒感染。所以早期快速地鉴别小儿患者细菌感染和病毒感染，对于及时有效地治疗及预防各种并发症有着重要的意义。由于CRP对病毒感染缺乏敏感性，而SAA在细菌和病毒感染早期均可升高。两者的联合检测可提高病毒感染早期的诊断效率，并为病毒与细菌感染的鉴别及治疗方案的选择提供有价值的参考信息。另外，SAA和CRP的比值与小儿感染性疾病的严重程度存在相关性，监测SAA/CRP比单独检测SAA或CRP具有更大的应用价值。同时，研究表明，许多肿瘤如肝癌、肺癌、乳腺癌、前列腺癌、子宫内膜癌等患者体内的SAA均有不同程度升高，SAA水平与肿瘤的活动期、恶性程度及转移有明显的相关性，恶性肿瘤转移阶段SAA升高通常比肿瘤稳定期显示更高的数值。
[0004]目前，SAA的检测方法主要有荧光免疫层析法，其是基于抗体和抗原的特异性反应，同时利用荧光对被检测信号进行放大和显示的一种免疫学检测方法。类似的免疫学检测方法还有放射免疫法、酶联免疫分析法、化学发光法等。上述免疫学检测方法都需要针对于SAA的抗体。因此，本领域对于有效且结合SAA并对其进行检测的抗体存在着强烈需求。
[0005]鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0006]针对现有抗血清淀粉样蛋白A抗体来源少的问题，本申请提供一种亲和力、活性改善的抗血清淀粉样蛋白A抗体，为血清淀粉样蛋白A的检测提供重要的原料来源。
[0007]为了实现上述目的，根据本专利技术的一个方面，提供了一种抗体或其功能性片段，所述抗体或其功能性片段包括氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的HCDR1、SEQ ID NO:2所示的HCDR2、SEQ ID NO:3或15所示的HCDR3，和氨基酸序列如SEQ ID NO:4至SEQ ID NO:6所示的LCDR1、LCDR2、LCDR3。
[0008]为了实现上述目的，根据本专利技术的第二个方面，提供了一种抗血清淀粉样蛋白A抗
体或其功能性片段，所述抗体或其功能性片段包含重链可变区和/或轻链可变区，所述重链可变区含有HFR1
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HCDR1
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HFR2
‑
HCDR2
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HFR3
‑
HCDR3
‑
HFR4的序列结构，所述轻链可变区区含有LFR1
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LCDR1
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LFR2
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LCDR2
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LFR3
‑
LCDR3
‑
LFR4的序列结构，所述HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR 1、LCDR2、LCDR3的氨基酸序列为上述的HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2、LCDR3的氨基酸序列。
[0009]为了实现上述目的，根据本专利技术的第三个方面，提供了一种抗血清淀粉样蛋白A抗体，包括重链和/或轻链，所述重链包括上述的重链可变区，所述轻链包括上述的轻链可变区。
[0010]为了实现上述目的，根据本专利技术的第四个方面，提供了一种抗体偶联物，所述抗体偶联物包括上述的抗体或其功能性片段。
[0011]为了实现上述目的，根据本专利技术的第五个方面，提供了一种检测血清淀粉样蛋白A的试剂或试剂盒，所述试剂或试剂盒包括上述的抗体或其功能性片段或上述的抗体偶联物。
[0012]为了实现上述目的，根据本专利技术的第六个方面，提供了上述的抗体或其功能性片段、上述的抗体偶联物或上述的试剂或试剂盒在血清淀粉样蛋白A检测中的用途。
[0013]为了实现上述目的，本专利技术还提供了一种载体、一种细胞及一种制备上述抗体或其功能性片段的方法。
附图说明
[0014]为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
[0015]图1为Anti
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SAA
‑
11A4mut1至Anti
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SAA
‑
11A4mut3的还原性SDS
‑
PAGE的结果。
具体实施方式
[0016]本专利技术提供了一种抗体或其功能性片段，所述抗体或其功能性片段包括氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的HCDR1、SEQ ID NO:2所示的HCDR2、SEQ ID NO:3或15所示的HCDR3，和氨基酸序列如SEQ ID NO:4至SEQ ID NO:6所示的LCDR1、LCDR2、LCDR3。上述抗体具有改善的亲和力和活性。
[0017]在本专利技术中，术语“抗体”在最广义上使用，其可以包括全长单克隆抗体，双特异性或多特异性抗体，以及嵌合抗体，只要它们展示所需的生物学活性。
[0018]在本专利技术中，术语“互补性决定区”、“CDR”或“CDRs”是指免疫球蛋白的重链和轻链的高度可变区，指包含一种或多种或者甚至全部的对抗体或抗原结合片段与其识别的抗原或表位的结合亲和力起作用的主要氨基酸残基的区域。在本专利技术具体实施方式中，CDRs是指所述抗体的重链和轻链的高度可变区。
[0019]在本专利技术中，重链互补决定区用HCDR表示，其包括HCDR1、HCDR2和HCDR3；轻链互补决定区用LCDR表示，其包括LCDR1、LCDR2和LCDR3。本领域常用的CDR标示方法包括：Kabat编号方案、IMGT编号方案、Chothia和Lesk编号方案以及1997年Lefranc等人为免疫球蛋白超
家族的所有蛋白质序列引入的新的标准化编号系统。Kabat等人是第一个为免疫球蛋白可变区提出标准化编号方案的人。在过去的几十年中，序列的积累导致了KABATMAN数据库的创建，Kaba本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗血清淀粉样蛋白A抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段包括氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的HCDR1、SEQ ID NO:2所示的HCDR2、SEQ ID NO:3或15所示的HCDR3，和氨基酸序列如SEQ ID NO:4至SEQ ID NO:6所示的LCDR1、LCDR2、LCDR3。2.根据权利要求1所述的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段还包括氨基酸序列如SEQ ID NO:7至SEQ ID NO:10所示的HFR1、HFR2、HFR3、HFR4和氨基酸序列如SEQ ID NO:11至SEQ ID NO:14所示的LFR1、LFR2、LFR3和LFR4，或与所述各序列具有至少80％同源性的氨基酸序列；可选地，所述抗体或其功能性片段以KD≤10
‑8M的亲和力结合血清淀粉样蛋白A；可选地，所述抗体或其功能性片段的LFR4的氨基酸序列如SEQ ID NO:16所示。3.一种抗血清淀粉样蛋白A抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段包含重链可变区和/或轻链可变区，所述重链可变区含有HFR1
‑
HCDR1
‑
HFR2
‑
HCDR2
‑
HFR3
‑
HCDR3
‑
HFR4的序列结构，所述轻链可变区区含有LFR1
‑
LCDR1
‑
LFR2
‑
LCDR2
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LFR3
‑
LCDR3
‑
LFR4的序列结构，所述HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR 1、LCDR2、LCDR3的氨基酸序列为权利要求1所述的HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2、LCDR3的氨基酸序列，所述HFR1、HFR2、HFR3、HFR4、LFR1、LFR2、LFR3、LFR4的氨基酸序列为权利要求2所述的HFR1、HFR2、HFR3、HFR4、LFR1、LFR2、LFR3、LFR4的氨基酸序列；可选地，所述重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:17至18任一所示；可选地，所述轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:19至20任一所示。4.根据权利要求1至3任一所述的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段还包含恒定区；可选地，所述恒定区包括重链恒定区和/或轻链恒定区；可选地，所述重链恒定区选自IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgM、IgE或IgD的重链恒定区；所述轻链恒定区选自κ型或λ型轻链恒定区；可选地，所述恒定区的种属来源为牛、马、猪、羊、大鼠、小鼠、狗、猫、兔、驴、鹿、貂、鸡、鸭、鹅或人；可选地，所述恒定区的种属来源为小鼠；可选地，所述重链恒定区序列如SEQ ID NO:21所示或与其具有至少80％同源性；可选地，所述轻链恒定区序列如SEQ ID...

【专利技术属性】
技术研发人员：孟媛，钟冬梅，唐丽娜，曹慧方，
申请(专利权)人：东莞市朋志生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：