检测猫泛白细胞减少症病毒的抗体及其应用制造技术

本发明专利技术涉及生物检测技术领域，具体涉及检测猫泛白细胞减少症病毒的抗体及其应用。本发明专利技术提供了检测猫泛白细胞减少症病毒的抗体及其应用。本发明专利技术通过构建噬菌体展示文库筛选出猫泛白细胞减少症病毒的特异性抗体。与现有技术相比，本发明专利技术提供的猫泛白细胞减少症病毒的抗体特异性强、亲和力高、可与病毒结合，可用于FPV的特异性检测，具有很好的市场应用前景。具有很好的市场应用前景。

【技术实现步骤摘要】
检测猫泛白细胞减少症病毒的抗体及其应用


[0001]本专利技术涉及生物检测
，具体涉及检测猫泛白细胞减少症病毒的抗体及其应用。

技术介绍

[0002]猫泛白细胞减少症病毒(Felinepanleukopeniavirus，FPV)又称猫细小病毒、猫瘟病毒。猫传染性肠炎病毒，属于细小病毒科，细小病毒属，是一种单链线状DNA病毒。FPV感染在临床上以白细胞急剧减少、腹泻、出血性肠炎、突发双相型高热、脱水及呕吐为特征，是目前细小病毒中致病性最强、感染范围最宽的一种。病毒感染发病率高，死亡率可达90％，对全球宠物行业造成重大的危害和经济损失。
[0003]FPV基因组由非结构蛋白NS1、NS2和结构蛋白VP1、VP2构成，VP2蛋白是FPV中相对保守的抗原特异性衣壳蛋白，具有刺激病毒产生中和抗体的重要表位，并且VP2蛋白氨基酸关键位点的突变在病毒感染发病机制中起关键性作用，可以有效刺激机体产生中和抗体并影响其致病性、宿主范围及血凝性。
[0004]目前，本领域内检测感染FPV血清抗体的诊断抗体灵敏度及特异性尚不能满足市场检测需求。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，本专利技术要解决的技术问题在于提供检测猫泛白细胞减少症病毒的抗体及其应用，本专利技术提供了蛋白活性高且更加敏感特异的检测猫泛白细胞减少症病毒的抗体，可用于间接免疫荧光和间接ELISA等特异性检测。
[0006]本专利技术提供的猫泛白细胞减少症病毒的抗体，包含如下氨基酸序列：
[0007](1)其重链三个CDR区分别具有如SEQ ID NO:1～18中任一项所示的氨基酸序列；其轻链三个CDR区分别具有如SEQ ID NO:19～36中任一项所示的氨基酸序列；
[0008](2)与(1)所示的氨基酸序列中经过氨基酸的取代、添加或缺失一个或多个，但与(1)所示氨基酸功能相同或相似的氨基酸序列；或
[0009](3)与(1)或(2)所示的氨基酸序列具备至少80％同源性的氨基酸序列。
[0010]一些实施例中，所述猫泛白细胞减少症病毒的抗体重链的三个CDR区分别具有如SEQ IDNO:1、2和3所示的氨基酸序列；
[0011]一些实施例中，所述猫泛白细胞减少症病毒的抗体轻链的三个CDR区分别具有如SEQ ID NO:19、20和21所示的氨基酸序列。
[0012]本专利技术中，所述猫泛白细胞减少症病毒的抗体中：
[0013]Ⅰ、其重链的四个FR区分别具有如SEQ ID NO:37～60中任一项所示的氨基酸序列；其轻链的四个FR分别具有如SEQ ID NO:61～84中任一项所示的氨基酸序列；
[0014]Ⅱ、与Ⅰ所示的氨基酸序列中经过氨基酸的取代、添加或缺失一个或多个，但与Ⅰ所示氨基酸功能相同或相似的氨基酸序列；或
[0015]Ⅲ、与Ⅰ或Ⅱ所示的氨基酸序列具备至少80％同源性的氨基酸序列。
[0016]本专利技术中，所述具有至少80％同源性的序列为在原序列的基础上，经取代、添加或缺失一个或多个氨基酸获得的氨基酸序列中，所述多个为2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、30个、31个、32个、33个、34个、35个或36个。
[0017]一些实施例中，所述猫泛白细胞减少症病毒的抗体重链的四个FR区分别具有如SEQ ID NO:37、38、39和40所示的氨基酸序列；
[0018]一些实施例中，所述猫泛白细胞减少症病毒的抗体轻链的四个FR分别具有如SEQ ID NO:61、62、63和64所示的氨基酸序列。
[0019]一些具体实施例中，所述猫泛白细胞减少症病毒的抗体重链可变区包含SEQ ID NO:1、2和3所示的CDR区和SEQ ID NO:37、38、39和40所示的FR区。
[0020]一些具体实施例中，所述猫泛白细胞减少症病毒的抗体轻链可变区包含SEQ ID NO:19、20和21所示的CDR区和SEQ ID NO:61、62、63和64所示的FR区。
[0021]一些实施例中，所述猫泛白细胞减少症病毒的抗体重链可变区具有如SEQ ID NO:85～90任一项所示的氨基酸序列；
[0022]所述猫泛白细胞减少症病毒的抗体轻链可变区具有如SEQ ID NO:91～96任一项所示的氨基酸序列。
[0023]一些具体实施例中，所述猫泛白细胞减少症病毒的抗体重链可变区具有如SEQ ID NO:85所示的氨基酸序列；所述猫泛白细胞减少症病毒的抗体轻链可变区具有如SEQ ID NO:91所示的氨基酸序列。
[0024]一些实施例中，所述重链和轻链的连接肽linker具有如SEQ ID NO:97所示的氨基酸序列。
[0025]一些实施例中，所述猫泛白细胞减少症病毒的抗体还包括恒定区，所述重链的恒定区为IgGH，所述轻链的恒定区为κ链。
[0026]生物材料，其特征在于，包括以下Ⅰ～
Ⅵ
中至少一项：
[0027]Ⅰ、编码任一项所述猫泛白细胞减少症病毒的抗体的核酸；
[0028]Ⅱ、包含所述核酸的表达载体；
[0029]Ⅲ、转化或转染所述表达载体的宿主细胞；
[0030]Ⅳ、所述的猫泛白细胞减少症病毒的抗体与固体介质或半固体介质偶联制得的偶联物；
[0031]Ⅴ
、经化学标记或生物标记的所述猫泛白细胞减少症病毒的抗体；
[0032]Ⅵ
、经化学标记或生物的所述的猫泛白细胞减少症病毒的抗体与固体介质或半固体介质偶联制得的偶联物。
[0033]本专利技术所述的表达载体能够在宿主细胞体内表达产生所述猫泛白细胞减少症病毒的抗体，所述的宿主细胞选自大肠杆菌、酵母菌、昆虫细胞或哺乳动物细胞。
[0034]所述化学标记为同位素、免疫毒素和/或化学药物；所述生物标记为生物素、亲和素或酶标记。所述酶标记优选为辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶。所述免疫毒素优选为黄曲霉毒素、白喉毒素、绿脓杆菌外毒素、蓖麻毒蛋白、相思子毒蛋白、槲寄生凝集素、蒴莲根毒素、PAP、造草素、白树毒素或丝瓜毒素。
[0035]所述固相介质或半固体介质是指本专利技术所述的重组抗体、经标记的重组抗体能够附着至其上的任何支持物，包括但不限于硝酸纤维素膜、聚偏二氟乙烯(PVDF)膜、iPDMS芯片、微孔板、聚苯乙烯平板、微粒、微载体、凝胶等。
[0036]本专利技术提供了所述的抗体的制备方法，包括：所述生物材料中的宿主细胞，诱导所述猫泛白细胞减少症病毒的抗体的表达。
[0037]本专利技术提供了如下
ⅰ
～
ⅲ
所示中至少一项在制备猫泛白细胞减少症病毒的检测试剂或检测试剂盒中的应用：
[0038]ⅰ
、所述的猫泛白细胞减少症病毒的抗体；
[0039]ⅱ
、所述的生本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.猫泛白细胞减少症病毒的抗体，其特征在于，(1)其重链三个CDR区分别具有如SEQ ID NO:1～18中任一项所示的氨基酸序列；其轻链三个CDR区分别具有如SEQ ID NO:19～36中任一项所示的氨基酸序列；(2)与(1)所示的氨基酸序列中经过氨基酸的取代、添加或缺失一个或多个，但与(1)所示氨基酸功能相同或相似的氨基酸序列；或(3)与(1)或(2)所示的氨基酸序列具备至少80％同源性的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的抗体，其特征在于，其重链的三个CDR区分别具有如SEQ ID NO:1、2和3所示的氨基酸序列；其轻链的三个CDR区分别具有如SEQ ID NO:19、20和21所示的氨基酸序列。3.根据权利要求1或2所述的抗体，其特征在于，其重链的四个FR区分别具有如SEQ ID NO:37～60中任一项所示的氨基酸序列；其轻链的四个FR分别具有如SEQ ID NO:61～84中任一项所示的氨基酸序列。4.根据权利要求1～3任一项所述的抗体，其特征在于，其重链的四个FR区分别具有如SEQ ID NO:37、38、39和40所示的氨基酸序列；其轻链的四个FR分别具有如SEQ ID NO:61、62、63和64所示的氨基酸序列。5.根据权利要求1～4任一项所述的抗体，其特征在于，其重链可变区具有如SEQ ID NO:85～90任一项所示的氨基酸序列；其轻链可变区具有如SEQ ID NO:91～96任一项所示的氨基酸序列。6.根据权利要求1～5任一项所述的抗体，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：查丽莎，张宇航，周宇杭，郑琪，邓剑辉，
申请(专利权)人：深圳赫兹生命科学技术有限公司，
类型：发明
国别省市：