一种ODP4多肽及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种ODP4多肽及其在制备预防和/或治疗多囊卵巢综合征药物中的应用，属于生物医药技术领域。本发明专利技术提供了一种ODP4多肽，借助多肽检测技术筛选得到该棕色脂肪组织来源的分泌性多肽，通过细胞学实验显示该ODP4多肽可促进颗粒细胞的增殖、抑制其凋亡，调控排卵相关基因表达，并且调节激素合成，改善卵泡发育，并可作为PCOS的防治手段。本发明专利技术所述的小分子多肽具有分子量小、毒性低等优势，为PCOS的临床防治提供了新的思路及干预手段，具有重要的临床意义及潜在经济价值。有重要的临床意义及潜在经济价值。有重要的临床意义及潜在经济价值。

【技术实现步骤摘要】
一种ODP4多肽及其应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种ODP4多肽及其在制备预防和/或治疗多囊卵巢综合征药物中的应用。

技术介绍

[0002]多囊卵巢综合征(PCOS)，是一种常见的妇科内分泌紊乱性疾病，通常以排卵障碍、高雄激素血症及胰岛素抵抗为基本特征，是导致育龄期女性不孕的最重要的原因之一，在排卵障碍性不孕女性中，其发病率高达80％。PCOS尚无有效治愈方案，目前治疗PCOS排卵障碍最常用的手段为促排卵药物，甚至需行辅助生殖技术助孕，其排卵率均有限且伴有一定的副损伤，虽解决PCOS女性的生育需求，但卵泡发育受损导致卵细胞质量不佳问题未得到有效解决，即使妊娠后仍可能出现流产率增高，妊娠并发症风险增高如妊娠期糖尿病、子痫前期，远期并发症如子宫内膜癌等发病风险也远高于正常女性。
[0003]近年来，多肽组学的飞速发展使得内源性多肽成为药物研发领域的热点。多肽具有分子量小、靶向性好、容易进入细胞等特点及安全高效的优势，可作为多肽药物的良好分子基础，如：GLP可用于治疗II型糖尿病，替莫瑞林可用于治疗HIV相关的脂肪代谢异常及齐考诺肽可用于治疗慢性疼痛等。多肽在PCOS领域的研究如下：kisspeptin可一定程度上刺激PCOS患者激素分泌及排卵，且可用于卵泡刺激综合症(OHSS)的治疗；ANP能促进卵巢颗粒细胞增殖，抑制细胞凋亡，从而改善PCOS大鼠卵巢功能；脂肪组织来源的adiponectin可治疗PCOS大鼠代谢紊乱表型。此外，专利CN202010605265.X公开了一种治疗多囊卵巢综合征的多肽化合物及其应用。专利CN202110702717.0则公开了杜拉鲁肽在多囊卵巢综合征中的应用。
[0004]棕色脂肪组织(BAT)通过自分泌、旁分泌和复杂的内分泌网络参与细胞功能的调节。棕色脂肪组织通过释放蛋白质、脂质因子和代谢产物与肥胖和胰岛素抵抗相关。棕色脂肪因子被认为是多种代谢性疾病的潜在治疗因子。因此，基于多肽的独特优势，从棕色脂肪分泌多肽的角度深入研究预防和/或治疗PCOS患者排卵障碍的药物，同时寻找安全有效、低毒副作用的新治疗靶点和药物是解决PCOS女性生育需求的关键。

技术实现思路

[0005]针对上述不足，本专利技术提供了一种ODP4多肽及其在制备预防和/或治疗多囊卵巢综合征药物中的应用。本专利技术所述的ODP4多肽由棕色脂肪组织分泌，由于小分子多肽具有分子量小、毒性低等优势，其可用于预防和/或治疗PCOS，为PCOS排卵障碍的患者提供一种新的治疗选择，具有巨大的应用价值和社会意义。
[0006]为了实现上述专利技术目的，本专利技术的技术方案如下：
[0007]一方面，本专利技术提供了一种ODP4多肽，所述的多肽的氨基酸序列为SEQ ID NO:1所示的序列。
[0008]另一方面，本专利技术提供了一系列编码所述多肽的核酸分子。
[0009]具体地，所述的核酸分子包含一种或多种经密码子优化的核酸分子。
[0010]又一方面，本专利技术提供了一系列载体，所述的载体包含本申请所述的一个或多个核酸分子。
[0011]具体地，所述的载体包括但不限于质粒、病毒、噬菌体。
[0012]又一方面，本专利技术提供了一系列包含上述核酸分子或上述载体的宿主细胞。
[0013]具体地，所述的宿主细胞包括但不限于微生物、植物或动物细胞，可通过本领域技术人员已知的方法将本专利技术所述的载体引入所述宿主细胞中，例如电穿孔、lipofectine转染、lipofectamin转染等方法。
[0014]又一方面，本专利技术提供了上述多肽、核酸分子、载体或宿主细胞在制备治疗和/或预防多囊卵巢综合征药物中的应用。
[0015]又一方面，本专利技术提供了一种多囊卵巢综合征药物，所述的药物包含上述多肽、核酸分子、载体或宿主细胞。
[0016]具体地，所述的药物还包含任选的药学上可接受的载体。
[0017]进一步具体地，所述的药学上可接受的载体包括但不限于：稀释剂、赋形剂、填充剂、润湿剂、崩解剂、矫味剂和粘合剂。
[0018]与现有技术相比，本专利技术的积极和有益效果在于：
[0019]本专利技术提供了一种ODP4多肽，借助多肽检测技术筛选得到该棕色脂肪组织来源的分泌性多肽，通过细胞学实验显示该ODP4多肽可促进颗粒细胞的增殖、抑制其凋亡，调控排卵相关基因表达，并且调节激素合成，改善卵泡发育，并可作为PCOS的防治手段。本专利技术所述的小分子多肽具有分子量小、毒性低等优势，为PCOS的临床防治提供了新的思路及干预手段，具有重要的临床意义及潜在经济价值。
附图说明
[0020]图1为实施例1检测结果图，其中，A为造模及棕色脂肪移植流程图，为葡萄糖耐量试验及胰岛素耐量试验，C为大鼠动情周期阴道涂片，D为大鼠卵巢组织化学切片。
[0021]图2为实施例2检测结果图，其中，A为所有表达肽的火山图，B为各组差异多肽的韦恩图，C为差异多肽的热图，D为差异多肽的长度，E为差异多肽的分子量，F为差异多肽的氨基酸等电点，G为差异多肽的分子量/氨基酸等电点，H为差异多肽前体蛋白的GO通路分析，I为差异多肽前体蛋白的KEGG通路分析。
[0022]图3为实施例3检测结果图，其中，A
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J为代表差异多肽相对表达量，K
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T为在KGN细胞中代表差异多肽在细胞活力中的作用。
[0023]图4为实施例4检测结果图，其中，A为在KGN细胞DHEA不同浓度细胞活力情况，B为构建DHEA细胞模型后添加多肽ODP6细胞活力情况，C为构建DHEA细胞模型后添加多肽ODP4细胞活力情况，D为构建DHEA细胞模型后添加多肽ODP4细胞凋亡情况代表图，E为对照组、ODP4组、DHEA组、DHEA+ODP4组四组蛋白表达代表图，包括凋亡相关基因(cleaved
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Caspase9/Caspase9，Bax/Bcl
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2)，增值相关基因(PCNA)，排卵相关基因(MMP
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9,COX
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2)，F为对照组、ODP4组、DHEA组、DHEA+ODP4组细胞上清雄激素含量，G为对照组、ODP4组、DHEA组、DHEA+ODP4组细胞上清孕激素含量。
具体实施方式
[0024]下面结合具体实施例，对本专利技术作进一步详细的阐述，下述实施例不用于限制本专利技术，仅用于说明本专利技术。以下实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，下述实施例中所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0025]实施例1.棕色脂肪移植改善多囊卵巢综合征多种生殖代谢表型
[0026]取28天龄雌性Spragu Dawley(SD)大鼠，随机分为“对照组”、“PCOS造模组”。PCOS造模组每日皮下注射雄激素DHEA(Cat.No.SJ
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HS0488，剂量：6mg/100g)，持续20天，期间大鼠每天正常进本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种ODP4多肽，其特征在于：所述的多肽的氨基酸序列为SEQ ID NO:1所示的序列。2.一系列编码权利要求1所述的多肽的核酸分子。3.一系列包含权利要求2所述的一个或多个核酸分子的载体。4.根据权利要求3所述的载体，其特征在于：所述的载体包括质粒、病毒或噬菌体。5.一系列包含权利要求2所述的核酸分子或权利要求3所述的载体的宿主细胞。6.根据权利要求5所述的宿主细胞，其特征在于：所述的宿主细胞包括微生物、植物或动物细胞。7.权利要求1所述的多肽、权利要求2所述的核酸分子...

【专利技术属性】
技术研发人员：狄芳芳，丘瑾，张润洁，宋力雯，
申请(专利权)人：上海市同仁医院，
类型：发明
国别省市：