一种诱导细胞空泡化死亡的重组蛋白及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种诱导细胞空泡化死亡的重组蛋白及其应用，属于生物医药技术领域。本发明专利技术提供了一种诱导细胞死亡的重组蛋白，所述重组蛋白包括以下至少一个：PorV的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，Lipocalin的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，β

【技术实现步骤摘要】
一种诱导细胞空泡化死亡的重组蛋白及其应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种诱导细胞空泡化死亡的重组蛋白及其应用。

技术介绍

[0002]细胞的死亡方式有很多种，取决于细胞背景和触发刺激物。程序性细胞死亡(PCD，ProgrammedCellDeath)在机体组织稳态的正常发育和维持过程中，以及消除受损、感染或衰老的细胞过程中是必需的。目前已经发现的最经典的PCD类型有：细胞凋亡(Apoptosis)、程序性坏死(Necroptosis)和细胞焦亡(Pyroptosis)。近年，更多的PCD被发现，比如铁死亡(Ferroptosis)、溶酶体依赖性细胞死亡(Lysosome
‑
dependentcelldeath，LCD)、自噬依赖性细胞死亡(Autophagy
‑
dependentcelldeath)、铜死亡(Cuproptosis)和细胞质空泡化死亡(VacuolarPCD)等。PCD可以去除无用的细胞以及感染或具有潜在肿瘤性的细胞，在体内平衡、宿主防御病原体、癌症和一系列其他病理学中具有重要作用。通过靶向调控不同的程序性细胞死亡方式来治疗感染、衰老和癌症等相关疾病的药物研发越来越多。癌症细胞的新型死亡诱导药物在耐药癌症细胞以及凋亡抵抗的癌症细胞治疗中具有重要应用前景。
[0003]但是目前现有技术还没有关于PorV、Lipocalin和β
‑
barrel分子应用于制备细胞死亡的药物记载或报道。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种诱导细胞空泡化死亡的重组蛋白及其应用，重组蛋白可以诱导细胞空泡形成，可作为癌症、自身免疫病和慢性炎症的治疗靶点。
[0005]本专利技术提供了一种诱导细胞死亡的重组蛋白，所述重组蛋白包括以下至少一种：PorV、Lipocalin和β
‑
barrel；
[0006]所述PorV的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，所述Lipocalin的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，所述β
‑
barrel的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示。
[0007]优选的，所述细胞包括肿瘤细胞和正常免疫细胞。
[0008]优选的，所述细胞诱导的疾病包括癌症、自身免疫病和慢性炎症。
[0009]优选的，所述死亡包括细胞质空泡化死亡。
[0010]本专利技术还提供了编码上述重组蛋白的基因。
[0011]优选的，编码所述PorV的基因的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示，编码所述Lipocalin的基因的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示，编码所述β
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barrel的基因的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示。
[0012]本专利技术还提供了以上述重组蛋白或上述基因作为治疗靶点制备诱导细胞死亡的制剂中的应用。
[0013]优选的，所述治疗靶点还包括与细胞具有治疗作用的药物。
[0014]优选的，所述诱导细胞死亡包括诱导细胞质空泡化死亡。
[0015]本专利技术还提供了一种诱导细胞死亡的药物，包括上述重组蛋白和药学上可接受的辅料。
[0016]有益效果：本专利技术提供了一种诱导细胞死亡的重组蛋白，所述重组蛋白包括以下至少一种：PorV、Lipocalin和β
‑
barrel。本专利技术所述重组蛋白可诱导多种细胞和正常免疫细胞，如诱导癌症细胞、自身免疫疾病细胞和慢性炎症感染细胞产生细胞空泡，从而细胞程序性死亡。本专利技术首次证实所述重组蛋白分子在制备诱导细胞空泡化死亡制剂中的新用途，可作为癌症、免疫疾病和慢性炎症的治疗靶点，进而使所述重组蛋白分子在作为癌症治疗和持续性感染疾病治疗靶点中具有潜在制药价值。
附图说明
[0017]图1为重组Lipocalin,β
‑
barrel和PorV蛋白的克隆结果(a)和Lipocalin,
[0018]‑
barrel和PorV蛋白诱导巨噬细胞空泡的形成图(b)；
[0019]图2为Lipocalin与β
‑
barrel一起共转染，以及Lipocalin、β
‑
barrel和PorV三种蛋白联合转染，在转染后12小时诱导细胞空泡的形成图；
[0020]图3为Lipocalin,β
‑
barrel和PorV蛋白诱导肝癌细胞(Huh
‑
7)空泡的形成图。
具体实施方式
[0021]本专利技术提供了一种诱导细胞死亡的重组蛋白，所述重组蛋白包括以下至少一种：PorV、Lipocalin和β
‑
barrel；
[0022]所述PorV的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示：MNLKSKLFVGLGLGLSLSAAAQEVKPVLTGAPFLRITPDARAAGMGDQGVATSTDAFSQFWNAAKYPFSKTTSAVAVNYTPYLSKLTSDVFLLYASYHQFLGQEERSTISASINYFNMGEVELNQLSGTQIVTTGKVKPNEFSVDVAYGLKLSDVYSMAVTGRYIRSDFGTFGDNSTIKPANTFAVDVSGFYQSEKHSSFGDYEGTARAGWAIQNLGPKLDYSGDENSRSYLPTTLRLGAGYDLYLDDMNKVGLSLEASKLLVPGSQLNNSDPANPKYEVPNVGVVEGIGKSFSNKKSVMLSGAVEYSYDDAFAVRGGYFHESDEQGGRRFATVGVGFKYQSFGLDISYLINTSKTNTALDNTLRFGLTWNIGGESSNANN；
[0023]所述Lipocalin的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示：MKNLFLIGALGSALAVASCSPTKIAQNKKNKTDFAKLKGNWQITSVDYDHNY RVKPFDEGIDAQCFVGSQWKLVPNNYSGTYALLGEGRCPSFSRVIKFELVDGA EFKFKKIVEGTKAKDNIAGYSLYLLDQTDTSFSLEQNVSGVRIVYNFQKTN；
[0024]所述β
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barrel的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示：MTKLISTALIGLSALVSAQVSFAGKAHLLFPTSSGSWKSLKDAGLKAYDKKGSNSVGYNVGVSAKVDLPGAFYVMPELYFTSFKNEFTDENTKTSLKAKSNRIDVPVLVGYKLLGDTASLFLGPVASYNLSTKESYQNFKEHATKDFTVGYQFGAQVQLSDFIINARYEGAFSNDQRNFINKHVVSGQEYEVQYDARPSLFMVGVGYKF。
[0025]本专利技术所述重组蛋白PorV、Lipocalin及β
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barrel优选均为从心内膜炎菌的基因组中克隆目的基因到表本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种诱导细胞死亡的重组蛋白，其特征在于，所述重组蛋白包括以下至少一种：PorV、Lipocalin和β
‑
barrel；所述PorV的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，所述Lipocalin的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，所述β
‑
barrel的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示。2.根据权利要求1所述重组蛋白，其特征在于，所述细胞包括肿瘤细胞和正常免疫细胞。3.根据权利要求2所述重组蛋白，其特征在于，所述细胞诱导的疾病包括癌症、自身免疫病和慢性炎症。4.根据权利要求1或2所述重组蛋白，其特征在于，所述死亡包括细胞质空泡化死亡。5.编码权利要求1～4任一项所述重组蛋白的基因。6...

【专利技术属性】
技术研发人员：齐晓朋，毛如迪，徐涛，潘宏伟，黄灿，李振，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：