一种与耐盐碱胁迫相关的抗坏血酸过氧化物酶基因及其用途制造技术

本发明专利技术提供了一种与耐盐碱胁迫相关的抗坏血酸过氧化物酶基因及其用途，属于基因工程技术领域。与耐盐碱胁迫相关的抗坏血酸过氧化物酶基因(HVUL2H16977.2基因)的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明专利技术研究发现在盐碱胁迫后，HVUL2H16977.2基因可显著调控青稞抗性品种中抗坏血酸的积累水平从而提高青稞的耐盐碱能力。将基因HVUL2H16977.2在烟草中进行过表达后，烟草叶片中抗坏血酸的含量显著增加，烟草耐盐碱能力提高。因此，HVUL2H16977.2基因在植物抵御盐碱胁迫中具有重要的意义。在植物抵御盐碱胁迫中具有重要的意义。在植物抵御盐碱胁迫中具有重要的意义。

【技术实现步骤摘要】
一种与耐盐碱胁迫相关的抗坏血酸过氧化物酶基因及其用途


[0001]本专利技术属于基因工程
，具体涉及一种与耐盐碱胁迫相关的抗坏血酸过氧化物酶基因及其用途。

技术介绍

[0002]盐胁迫是农业生产力中最有害的非生物胁迫之一。跟据统计，全球盐渍化土地的面积约为9.54
×
108hm2，约占世界陆地总面积的7％。由于灌溉土地排水不足，施肥管理不善和全球变暖，使得盐害农田的范围和严重程度将进一步恶化。盐胁迫的主要原因是钠离子(Na
+
)和氯离子(Cl
‑
)的增加，这是自然界中来源中最丰富的盐离子。高盐度会引起植物的水分胁迫、离子毒性、营养障碍、氧化应激、代谢过程的改变、膜破坏、细胞分裂和扩张的减少和遗传毒性等。这些效应共同影响了植物生长和生存。
[0003]与大麦属的其他植物物种相比，青稞(Hordeum vuglare L.var.nudum Hook.f)具有一套强大的耐受系统来应对环境胁迫。由于海拔极高，青藏高原的作物必须遭受各种类型的非生物胁迫，如寒冷，干旱和盐胁迫。青稞作为西藏及其附近地区人口最重要的主食和经济作物，提高其抗逆性和产量尤为重要。
[0004]抗坏血酸在植物抵御盐碱胁迫中发挥着至关重要的作用。抗性青稞在遭受盐碱胁迫后，抗坏血酸积累水平迅速得以富集，且含量显著高于敏感型青稞品种。但是有关青稞中抗坏血酸的积累的分子机制尚待进一步研究。对抗性品种响应盐碱胁迫的代谢途径解析，将会成为青稞抗性育种的亮点，且具有重要的市场应用价值。/>
技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供一种与耐盐碱胁迫相关的抗坏血酸过氧化物酶基因及其用途。
[0006]本专利技术提供了一种基因片段，所述基因片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0007]本专利技术还提供了一种重组载体，所述重组载体包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的基因片段。
[0008]进一步地，所述重组载体是重组pEAQ或重组pCXSN。
[0009]本专利技术还提供了一种重组菌，所述重组菌包含前述的重组载体。
[0010]进一步地，所述重组菌为转化农杆菌。
[0011]本专利技术还提供了一种抗坏血酸过氧化物酶，所述抗坏血酸过氧化物酶是序列如SEQ ID NO.1所示的基因片段表达而得。
[0012]本专利技术还提供了前述的基因片段、前述的重组载体、前述的重组菌或前述的抗坏血酸过氧化物酶在制备耐盐碱的植物的用途；
[0013]优选地，所述植物为青稞、烟草。
[0014]本专利技术还提供了一种表达抗坏血酸过氧化物酶的转基因植物的构建方法，取核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的基因片段，转入植物中，获得表达抗坏血酸过氧化物酶的植
株，即可。
[0015]进一步地，所述转基因植物为转基因烟草。
[0016]进一步地，所述转入植物的方法是农杆菌法、基因枪法、电转法、PEG介导法、脂质体法和磷酸钙
‑
DNA共沉淀法中的一种。
[0017]本专利技术研究发现在盐碱胁迫后，HVUL2H16977.2基因可显著调控青稞抗性品种中抗坏血酸的积累水平从而提高青稞的耐盐碱能力。将基因HVUL2H16977.2在烟草中进行过表达后，烟草叶片中抗坏血酸的含量显著增加，烟草耐盐碱能力提高。因此，HVUL2H16977.2基因在植物抵御盐碱胁迫中具有重要的意义。
[0018]显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
[0019]以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。
附图说明
[0020]图1为XL(左)和ZQ(右)在盐碱处理10天后的表型对比。
[0021]图2为盐碱胁迫下2、8、24、48和72h后，耐盐碱型青稞和盐碱敏感型青稞中HVUL2H16977.2基因表达与对照(未施加盐碱处理)植株中该基因表达倍数分析：A为耐盐碱型青稞；B为盐碱敏感型青稞。
[0022]图3为与野生型烟草株系(CK)和叶片中表达HVUL2H16977.2后的过表达烟草株系中抗坏血酸含量结果以及目标产物二级谱图分析结果图：A为抗坏血酸含量结果图；B为目标产物二级谱图分析结果图。
[0023]图4为HVUL2H16977.2过表达后相关生长指标分析结果图：A为正常和盐胁迫环境下野生型和T2代转基因种子萌发率统计结果图；B为在正常条件下和盐胁迫处理下的主根长统计数据结果图；数据为三个独立重复的平均
±
SD；*p<0.05，**p<0.01(t
‑
检验)。
具体实施方式
[0024]本专利技术所用原料与设备均为已知产品，通过购买市售产品所得。
[0025]青稞中与耐盐碱胁迫相关的抗坏血酸过氧化物酶基因(HVUL2H16977.2基因)，该基因序列如SEQ ID NO.1所示，该基因片段可以通过直接合成的方式获得，也可以通过其他本领域常规制备方法获得。
[0026]SEQ ID NO.1：
[0027]ATGGCNGCCATCCCGCTCTGCCTTCTTCCCCTCCTCATCCTCGTCCTCACCGGCTCTTCGCCTCGTCAGCCTCCGCACCGCGTCCTCTCGGCCCTCCCAGAAGGCCAGGTCAACGGGGAGGGGGCGATCGGTGAGGTGCATGGCGACGGCGTCGGACGCGGCACAGCTGAAGGCCGCGCGCGAGGACATCAGGGAGCTGCTCAAGACAACCCACTGCCACCCGATCCTGGTTTGGTAAATGCTCTAAAACTTGTGCAACCGATCAAGGACAAATACCCAAGTATCACTTATGCGGATTTATTCCAGTTGGCAAGTGCTACAGCAATTGAGGAAGCTGGTGGCCCAAAGATTCCAATGAAATATGGACGGGTTGATGTCACAGGACCTGAGCAGTGTCCACCTGAGGGGAAGCTTCCTGATGCTGGCCCGAGTGCTCCTGCTGACCACTTGAGGGTGGTATTCTACAGAATGGGCCTTGATGACAAGGAAATCGTTGCTTTGTCTGGGGCACATACACTTGGAAGGTCTAGG
CCTGAACGGAGTGGCTGGGGGAAACCTGAAACAAAATATACTAAAAATGGTCCTGGTGCACCTGGTGGACAATCATGGACAGCTGAATGGCTGAAGTTTGATAACAGTTACTTCAAGGAGATAAAAGAGAAAAGAGATCAGGATCTTCTGGTCTTGC本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基因片段，其特征在于：所述基因片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。2.一种重组载体，其特征在于：所述重组载体包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的基因片段。3.根据权利要求2所述的重组载体，其特征在于：所述重组载体是重组pEAQ或重组pCXSN。4.一种重组菌，其特征在于：所述重组菌包含权利要求2或3所述的重组载体。5.根据权利要求4所述的重组菌，其特征在于：所述重组菌为转化农杆菌。6.一种抗坏血酸过氧化物酶，其特征在于：所述抗坏血酸过氧化物酶是序列如SEQ ID NO.1所示的基因片段表达而得。7.权利要求1所述的基因片段、权利要求2或3...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨春葆，许从萍，羊海珍，旺姆，顿珠加布，巴桑玉珍，徐齐君，王玉林，原红军，曾兴权，
申请(专利权)人：武汉轻工大学，
类型：发明
国别省市：