一种庆笙红球菌SYF及其在降解有机污染物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种庆笙红球菌SYF及其在降解有机污染物中的应用，本发明专利技术庆笙红球菌SYF对于脂肪族酯类污染物特别是醋酸叔丁酯具有高效的降解能力，可以把污染物降解为CO2、H2O等无害物质，因而在工业废气废水的生物净化中具有广阔的应用前景。庆笙红球菌SYF能将醋酸叔丁酯完全降解为无机物和细胞生物质，对于浓度低于260mg/L的醋酸叔丁酯去除率达到100％。度低于260mg/L的醋酸叔丁酯去除率达到100％。

【技术实现步骤摘要】
一种庆笙红球菌SYF及其在降解有机污染物中的应用
(一)

[0001]本专利技术涉及一种庆笙红球菌(Rhodococcus qingshengii)SYF及其在降解醋酸叔丁酯等有机污染物中的应用。
(二)
技术介绍

[0002]醋酸叔丁酯是一种有机化合物，属于脂肪族酯类。醋酸叔丁酯又称乙酸叔丁酯，其合成一般采用叔丁醇与乙酸或乙酸酐反应而得，为无色透明有酯类气味的容易燃烧的液体。其具有挥发性，与水不溶，能与醇、醚混合，易溶于乙酸等一些有机溶剂。乙酸叔丁酯是硝化纤维的优良溶剂,也是汽油的防震添加剂,用途较为广泛。
[0003]醋酸叔丁酯虽属低毒类，但由于其具有高挥发性和高脂溶性，可在体内蓄积并产生神经毒性，而被认为高危险性毒物。醋酸叔丁酯是一种可导致神经纤维变性的神经类毒物。急性吸入高浓度的醋酸叔丁酯鼻出血、声音嘶哑、咳嗽、胸闷、头痛、头晕等症状，眼及皮肤接触有刺激性，反复长期接触可能引发皮疹。经口摄入可出现恶心、呕吐、支气管和胃肠道刺激症状，严重者发生中枢性呼吸抑制；人摄入约50g可致死。
[0004]因此研究环境中醋酸叔丁酯的高效降解对人类健康很有必要，通过文献检索，未发现有关庆笙红球菌以醋酸叔丁酯为唯一碳源来实现高效降解的报道。
(三)
技术实现思路

[0005]本专利技术目的是提供一种庆笙红球菌SYF及其在降解有机污染物中的应用，庆笙红球菌SYF能以醋酸叔丁酯等脂肪族酯类污染物为唯一碳源实现降解，特别是具有高效、较强的醋酸叔丁酯降解能力，并且生长环境温和，易扩大培养。该降解菌的发现对于工业废水废气中脂肪族酯类污染物的高效净化具有重要意义。
[0006]本专利技术采用的技术方案是：
[0007]本专利技术提供一种新的醋酸叔丁酯降解菌——庆笙红球菌(Rhodococcus qingshengii)SYF，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期：2023年05月10日，保藏编号：CCTCC NO:M 2023726，地址：中国，武汉，武汉大学，430072。
[0008]本专利技术庆笙红球菌SYF的基本特征为：菌落呈橙色、圆盘状、无芽孢、无鞭毛；边缘整齐，不透光，易挑取，菌苔沿划线生长；好氧，革兰氏染色阳性。
[0009]本专利技术还提供一种庆笙红球菌SYF在降解有机污染物中的应用，具体所述的应用是将庆笙红球菌SYF经扩大培养获得的菌液或菌液离心获得的静息细胞加入pH＝4
‑
9、含有机污染物的无机盐培养液中，在10
‑
35℃、100
‑
200rpm条件下进行培养，实现有机污染物的降解。
[0010]进一步，所述有机污染物包括醋酸叔丁酯、乙酸乙酯。
[0011]进一步，所述无机盐培养液中，静息细胞或菌液加入量以菌体干重计为20
‑
100mg/L，优选50mg/L。
[0012]进一步，所述无机盐培养液中有机污染物的初始浓度为52
‑
260mg/L，优选104mg/
L。
[0013]进一步，所述无机盐培养液组成为：K2HPO4·
3H2O 0.942g/L、KH2PO
4 0.234g/L、NaNO
3 1.7g/L、NH4Cl 0.98g/L、MgCl2·
6H2O 0.2033g/L、CaCl2·
2H2O 0.011g/L、FeCl30.0162g/L，微量元素母液5ml/L，溶剂为去离子水，pH 7.0；其中微量元素母液组成：CuSO4·
5H2O 0.02g/L、FeSO4·
7H2O 1.0g/L、MnSO4·
4H2O 0.1g/L、NaMoO4·
2H2O 0.02g/L、CoCl2·
6H2O 0.02g/L、H3BO
3 0.014g/L、ZnSO4·
7H2O 0.10g/L，溶剂为去离子水。
[0014]进一步，所述培养条件为15℃、160rpm。
[0015]进一步，所述庆笙红球菌SYF的静息细胞按如下步骤制备：
[0016](1)斜面培养：
[0017]将庆笙红球菌SYF接种于斜面LB固体培养基，30℃培养24～36h，获得斜面菌体，所述LB固体培养基终浓度组成为：NaCl 10g/L、胰蛋白胨10g/L、酵母粉5g/L，琼脂18～20g/L，溶剂为去离子水，pH值自然。
[0018](2)扩大培养
[0019]用接种环挑取步骤(1)获得的斜面菌体接种至LB液体培养基中，15℃，160rpm培养24～36h，获得OD
600
＝0.1～0.2的菌液，离心，收集湿菌体，无机盐培养液洗涤，获得庆笙红球菌SYF静息细胞；所述LB液体培养基终浓度组成为：NaCl 10g/L、蛋白胨10g/L、酵母粉5g/L，溶剂为去离子水，pH值自然。
[0020]与现有技术相比，本专利技术有益效果主要体现在：
[0021]本专利技术提供的庆笙红球菌SYF取自污水厂污泥，对于脂肪族酯类污染物特别是醋酸叔丁酯具有高效的降解能力，可以较为完全地把污染物转化为CO2、H2O等无害物质，因而在工业废气废水的生物净化中具有广阔的应用前景。
[0022]本专利技术所述的庆笙红球菌SYF能将醋酸叔丁酯完全降解为无机物(CO2、H2O)和细胞生物质，实现完全矿化，且对于260mg/L以内的醋酸叔丁酯的去除率高达100％。
(四)附图说明
[0023]图1为菌株SYF在LB培养基上菌落形态照片。
[0024]图2为菌株SYF的透射电子显微镜照片。
[0025]图3为菌株SYF的系统发育树图。
[0026]图4为菌株SYF对于不同浓度醋酸叔丁酯的降解曲线。
[0027]图5为菌株SYF在不同pH下对于104mg/L醋酸叔丁酯的降解曲线。
[0028]图6为菌株SYF在11h时不同pH下对于104mg/L醋酸叔丁酯的降解率。
(五)具体实施方式
[0029]下面结合具体实施例对本专利技术进行进一步描述，但本专利技术的保护范围并不仅限于此：
[0030]下述实施例中所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0031]所述无机盐培养液组成为：K2HPO4·
3H2O 0.942g/L、KH2PO
4 0.234g/L、NaNO
3 1.7g/L、NH4Cl 0.98g/L、MgCl2·
6H2O 0.2033g/L、CaCl2·
2H2O 0.011g/L、FeCl
3 0.0162g/L，微量元素母液5ml/L，溶剂为去离子水，pH 7.0；其中微量元素母液组成：CuSO4·
5H2O0.02g/L、FeSO4·
7H2O 1.0g/L、MnSO4·
4H2O 0.1g/L、NaMoO4·
2H2O 0.02g/L、CoCl2·
6H2O 0.02g/L、H3本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.庆笙红球菌(Rhodococcus qingshengii)SYF，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期：2023年05月10日，保藏编号：CCTCC NO:M 2023726，地址：中国，武汉，武汉大学，430072。2.一种权利要求1所述庆笙红球菌SYF在降解有机污染物中的应用。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的应用是将庆笙红球菌SYF经扩大培养获得的菌液或静息细胞加入pH＝4
‑
9、含有机污染物的无机盐培养液中，在10
‑
35℃、100
‑
200rpm条件下进行培养，实现有机污染物的降解。4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述有机污染物包括醋酸叔丁酯、乙酸乙酯。5.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述无机盐培养液中，静息细胞或菌液加入量以菌体干重计为20
‑
100mg/L。6.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述无机盐培养液中有机污染物的初始浓度为52
‑
260mg/L。7.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述无机盐培养液组成为：K2HPO4·
3H2O0.942g/L、KH2PO
4 0.234g/L、NaNO
3 1.7g/L、NH4Cl 0.98g/L、MgCl2·
6H2O 0.2033g/L、CaCl2·
2H2O 0....

【专利技术属性】
技术研发人员：孙志荣，苏云飞，成卓韦，陈建孟，陈东之，於建明，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：