本发明专利技术提供了一种新分离的杀香鱼假单胞菌噬菌体(Pseudomonas plecoglossicida phage)、其制备方法及应用。所述噬菌体于2023年2月15日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 2023124。本发明专利技术人筛选获得一种噬菌体可高效抑制杀香鱼假单胞菌的生长，只能感染杀香鱼假单胞菌，特异性高。本发明专利技术的噬菌体可被应用于农业、医学、环境等领域以对抗其细菌宿主，其作为抗生素替代物具有良好的发展前景。的发展前景。
【技术实现步骤摘要】
新分离的杀香鱼假单胞菌噬菌体、其制备方法及应用
[0001]本专利技术属于生物技术和微生物学领域，更具体地，本专利技术涉及一种新分离的杀香鱼假单胞菌噬菌体、其制备方法及应用。
技术介绍
[0002]噬菌体是一种能够感染细菌的病毒，在自然界中广泛存在。噬菌体作为病毒的一种，其结构与病毒类似，主要由核酸内核和蛋白质衣壳组成。噬菌体治疗是利用噬菌体杀灭或抑制病原菌的繁殖，从而治疗细菌感染性疾病。噬菌体只会侵染和裂解宿主细菌并自我繁殖，而不伤害到人体细胞和组织，因此其具有高特异性和低毒性的特点。此外，相比于传统抗生素疗法，噬菌体具有清除生物被膜的特点，对多重耐药菌具有很好的清除效果。由于噬菌体治疗在对抗各种耐药菌时能够发挥抑制的作用，因此被认为是潜在的抗生素替代疗法。目前噬菌体在人体、畜牧、水产和食品等领域中都有着很好的抗菌效果，呈现良好的应用前景。但是，筛选、分离鉴定获得对于致病病原菌的杀伤效果理想的、具有特异性杀伤作用的噬菌体在本领域中仍然存在瓶颈问题，这一过程依托于技术人员的研究设计、经验，需要大量的筛选和分析研究。同时，是否能够获得有应用价值的噬菌体也具有一定随机性，存在不确定因素。
[0003]杀香鱼假单胞菌是一种革兰氏阴性杆菌，具有周身鞭毛。杀香鱼假单胞菌是一类重要的鱼类病原菌，主要引起脾脏发黑肿大、有白色米粒状结节、肾脏水肿等症状，是内脏白点病的主要病原菌。杀香鱼假单胞菌能够感染的宿主范围非常广，包括大黄鱼、香鱼和鲷鱼等。杀香鱼假单胞菌的规模化感染可与造成大量鱼体死亡，给养殖产业带来极大损失。
[0004]本领域现有技术中，在鱼类、例如大黄鱼的养殖过程中，饲料中添加抗生素仍然是内脏白点病的主要防治手段。但是抗生素的滥用导致病原菌的耐药性不断提高，药物效力差且导致抗生素残留问题。
[0005]因此，本领域亟待开发新的细菌防控策略，以预防和治疗杀香鱼假单胞菌引起的内脏白点病，以及降低多重耐药菌的产生。
技术实现思路
[0006]本专利技术的目的在于提供一种新分离的杀香鱼假单胞菌噬菌体、其制备方法及应用。
[0007]在本专利技术的第一方面，提供一种分离的杀香鱼假单胞菌噬菌体，其在中国典型培养物保藏中心的保藏号为CCTCC NO:M 2023124。
[0008]在一种或多种实施方式中，其包括选自下组的特征：
[0009](a)包括头部和尾丝，头部呈二十面体；较佳地，所述噬菌体的头部直径为88
±
10nm，尾部长度为13
±
6nm；更佳地，所述噬菌体的头部长88
±
5nm，尾部长度为13
±
3nm；
[0010](b)属于有尾噬菌体目短尾噬菌体科；
[0011](c)噬菌斑呈透明圆形，直径约为0.7～1.1mm；
[0012](d)宿主内潜伏期为10～30分钟；较佳地15～25分钟；更佳地18～22分钟；
[0013](e)针对杀香鱼假单胞菌的裂解量为130～220PFU/细胞；较佳地150～190PFU/细胞；
[0014](f)针对杀香鱼假单胞菌的裂解率超过95％；较佳地超过98％。
[0015]在本专利技术的另一方面，提供所述的噬菌体的应用，用于：(1)抑制其细菌宿主；或(2)制备抑制其细菌宿主的组合物。
[0016]在一种或多种实施方式中，所述的噬菌体的细菌宿主包括：杀香鱼假单胞菌(Pseudomonas plecoglossicida)。
[0017]在一种或多种实施方式中，所述的应用为非治疗性的应用；例如针对环境中的所述噬菌体的宿主(如杀香鱼假单胞菌)进行抑制。
[0018]在一种或多种实施方式中，所述组合物为药物组合物、食品组合物、饲料组合物、清洁剂和/或消毒剂。
[0019]在一种或多种实施方式中，所述药物组合物为疫苗组合物；更佳地，该疫苗组合物预防所述噬菌体的细菌宿主感染相关的鱼类疾病。
[0020]在一种或多种实施方式中，所述药物组合物为治疗组合物。
[0021]在一种或多种实施方式中，该治疗组合物治疗所述噬菌体的细菌宿主感染相关的鱼类疾病。
[0022]在一种或多种实施方式中，所述鱼类疾病包括：内脏白点病。
[0023]在一种或多种实施方式中，所述饲料组合物中，所述噬菌体作为饲料添加剂。
[0024]在一种或多种实施方式中，所述清洁剂或消毒剂为环境清洁剂或环境消毒剂。
[0025]在一种或多种实施方式中，所述鱼类为海水鱼类。
[0026]在本专利技术的另一方面，提供一种用于抑制细菌的组合物，其包含前面任一所述的分离的噬菌体。
[0027]在一种或多种实施方式中，其还包含生物学可接受的载体。
[0028]在一种或多种实施方式中，所述组合物中噬菌体大于或等于103PFU/mL。
[0029]在一种或多种实施方式中，所述组合物中噬菌体为103～10
10
PFU/mL。
[0030]在一种或多种实施方式中，进一步更佳地为104～109PFU/mL(如105、106、107、108PFU/mL)。
[0031]在本专利技术的另一方面，提供一种应用前面任一所述的噬菌体制备组合物的方法，包括：扩增培养前面任一所述的噬菌体；将之与载体混合，所述的载体为生物学可接受的载体。
[0032]在一种或多种实施方式中，所述的载体包括但不限于：溶剂、佐剂、缓冲液、冻干保护剂、润湿剂、渗透剂、分散剂、乳化剂、稳定剂、粘附剂、充填剂、助剂、表面活性剂或控释剂。
[0033]在一种或多种实施方式中，所述扩增培养包括：将所述噬菌体接种至其细菌宿主培养物(培养液)，从而所述噬菌体侵染其宿主，进行复制。
[0034]在一种或多种实施方式中，所述细菌宿主包括：杀香鱼假单胞菌。
[0035]在一种或多种实施方式中，所述组合物为药物组合物、食品组合物、饲料组合物、清洁剂和/或消毒剂；
[0036]在一种或多种实施方式中，所述药物组合物为疫苗组合物；更佳地，该疫苗组合物预防所述噬菌体的细菌宿主感染相关的鱼类疾病。
[0037]在一种或多种实施方式中，所述药物组合物为治疗组合物；更佳地，该治疗组合物治疗所述噬菌体的细菌宿主感染相关的鱼类疾病；更佳地，所述鱼类疾病包括：炎症疾病。
[0038]在一种或多种实施方式中，所述饲料组合物中，所述噬菌体作为饲料添加剂。
[0039]在一种或多种实施方式中，所述清洁剂或消毒剂为环境清洁剂或环境消毒剂。
[0040]在一种或多种实施方式中，所述噬菌体制剂的剂型包括(但不限于)：液体制剂或固体制剂；更佳地包括：冻干剂，水溶液，乳液，可喷洒溶液，油性或水性分散系，悬浮剂，粉剂，颗粒剂，可湿粉剂，可乳化浓缩物或微胶囊。
[0041]在本专利技术的另一方面，提供一种抑制病原微生物的方法，所述方法包括：以前面任一所述的噬菌体或前面所述的组合物对需要进行细菌抑制的对象进行处理；所述本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种分离的杀香鱼假单胞菌噬菌体，其在中国典型培养物保藏中心的保藏号为CCTCC NO:M 2023124。2.如权利要求1所述的噬菌体，其特征在于，其包括选自下组的特征：(a)包括头部和尾丝，头部呈二十面体；较佳地，所述噬菌体的头部直径为88
±
10nm，尾部长度为13
±
6nm；更佳地，所述噬菌体的头部长88
±
5nm，尾部长度为13
±
3nm；(b)属于有尾噬菌体目短尾噬菌体科；(c)噬菌斑呈透明圆形，直径约为0.7～1.1mm；(d)宿主内潜伏期为10～30分钟；较佳地15～25分钟；更佳地18～22分钟；(e)针对杀香鱼假单胞菌的裂解量为130～220PFU/细胞；较佳地150～190PFU/细胞；(f)针对杀香鱼假单胞菌的裂解率超过95％；较佳地超过98％。3.权利要求1～2任一所述的噬菌体的应用，用于：(1)抑制其细菌宿主；或(2)制备抑制其细菌宿主的组合物；较佳地，其细菌宿主包括：杀香鱼假单胞菌(Pseudomonas plecoglossicida)。4.如权利要求3所述的噬菌体的应用，其特征在于，所述组合物为药物组合物、食品组合物、饲料组合物、清洁剂和/或消毒剂；较佳地，所述药物组合物为疫苗组合物；更佳地，该疫苗组合物预防所述噬菌体的细菌宿主感染相关的鱼类疾病；较佳地，所述药物组合物为治疗组合物；更佳地，该治疗组合物治疗所述噬菌体的细菌宿主感染相关的鱼类疾病；更佳地，所述鱼类疾病包括：内脏白点病；较佳地，所述饲料组合物中，所述噬菌体作为饲料添加剂；较佳地，所述清洁剂或消毒剂为环境清洁剂或环境消毒剂。5.一种用于抑制细菌的组合物，其包含权利要求1～2任一所述的分离的噬菌体；较佳地...
【专利技术属性】
技术研发人员：权利要求书二页说明书八页附图二页，
申请(专利权)人：上海纬中生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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