一种阴道分泌物荧光染色液及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种阴道分泌物荧光染色液及其制备方法，属于医学诊断技术领域，阴道分泌物荧光染色液包括以下重量份数的原料：荧光增白剂

【技术实现步骤摘要】
一种阴道分泌物荧光染色液及其制备方法


[0001]本专利技术属于医学诊断
，具体地，涉及一种阴道分泌物荧光染色液及其制备方法。

技术介绍

[0002]女性生殖道感染是全球性的重大社会及公共卫生问题，也是影响女性生殖道健康的常见妇科疾病之一，如不及时诊断和治疗，可引起阴道炎、淋病、宫颈炎、盆腔炎、不孕等并发症、并增加艾滋病感染和宫颈癌风险、其中阴道炎是妇科门诊最常见的疾病，它是阴道粘膜及粘膜结缔组织下的炎症，正常健康妇女由于解剖学及生物化学等特点，阴道对病原体的侵入有自然防御功能，当阴道的自然防御功能遭到破坏，病原体就易于侵入，导致阴道炎症；幼女及绝经后妇女由于雌激素缺乏，阴道上皮菲薄，细胞内糖原含量减少，阴道pH值升高，故阴道抵抗力低下，也较易受感染。
[0003]阴道分泌物常规检查是妇科患者的必检项目，通常检查病原体为：白细胞、线索细胞、滴虫、白色念珠菌、上皮细胞、乳酸杆菌、大肠杆菌及其他细菌等。传统的阴道分泌物检查方法主要有湿片法、革兰氏染色、干化学酶法、培养法以及PCR法。湿片法观察存在诸如经验要求高、主观性强等缺点，在显微镜质量及涂片的均匀度等方面受限，而且仅从形态学上来鉴别，在灵敏度和特异性方面也存在严重问题，现今已无法完全满足临床检测的需求；革兰氏染色法操作复杂，时间较长，滴虫不易检出；干化学酶法可搭配全自动设备，自动化程度高，但灵敏度相对较低，且试剂盒中的酶易受干扰，保存条件要求较高；培养法指对临床标本进行培养，目的在于分离致病菌，以明确是否存在感染，但培养法时间要求长，出报告时间较晚；PCR法具有特异、敏感、重复性好等优点，但操作要求高，步骤复杂，需要专门的PCR实验室以及专业检验医师，检测成本也高。近年来国内外出现的一些微生物荧光染液为阴道分泌物常规检测技术发展起到了巨大的推动作用，然而市面上大多数阴道分泌物染色液需2种染液配合使用，操作复杂，不易运输且染液成本较高，不易临床应用。另外，普通荧光染色液存在染色效果不佳，染色后荧光效果淬灭快，染色液长期存放不稳定，使得染色后荧光强度较低等问题。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种阴道分泌物荧光染色液及其制备方法，阴道分泌物荧光染色液中含有荧光增白剂
‑
碳点A复合材料、溴化乙锭
‑
碳点B复合材料和吖啶橙，将该阴道分泌物荧光染色液滴加至阴道分泌物样本上即可在紫外光下进行显微镜检，操作简便，可同时快速检测上皮细胞、白细胞、线索细胞、细菌、真菌和滴虫，灵敏度和准确率高。
[0005]本专利技术要解决的技术问题：市面上大多数阴道分泌物染色液需2种染液配合使用，操作复杂，不易运输且染液成本较高，不易临床应用。另外，普通荧光染色液存在染色效果不佳，染色后荧光效果淬灭快，染色液长期存放不稳定，使得染色后荧光强度较低等问题。
[0006]本专利技术的目的可以通过以下技术方案实现：
一种阴道分泌物荧光染色液，包括以下重量份数的原料：荧光增白剂
‑
碳点A复合材料0.005
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0.05%、溴化乙锭
‑
碳点B复合材料0.009
‑
0.08%、吖啶橙0.001
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0.004%、抗淬灭剂0.01
‑
0.1%、余量为水。
[0007]本专利技术提供的阴道分泌物荧光染色液组成简单，可快速检测，通过荧光增白剂
‑
碳点A复合材料、溴化乙锭
‑
碳点B复合材料和吖啶橙对阴道分泌物样本中的细胞和微生物进行特殊染色，容易观测识别上皮细胞、白细胞、线索细胞、细菌、真菌和滴虫。
[0008]进一步地，抗淬灭剂为没食子酸盐、甘油、丙二醇、对苯二胺或抗坏血酸中的一种或几种的组合。
[0009]进一步地，荧光增白剂
‑
碳点A复合材料的制备方法，包括以下步骤：将柠檬酸和叶酸溶于去离子水中，然后加入荧光增白剂，超声分散得到混合液a；将混合液转移至高压反应釜中进行水热反应，反应结束后取出经离心、纯化、干燥处理，得荧光增白剂
‑
碳点A复合材料。
[0010]上述制备过程中，以柠檬酸、叶酸和荧光增白剂为原料，通过水热反应制成碳点，在碳点上负载有荧光增白剂，得到荧光增白剂
‑
碳点A复合材料。荧光增白剂可与阴道分泌物中存在的真菌的细胞壁β
‑
多糖类物质特异性的结合，从而标记荧光进行检测。荧光增白剂是一种有机染料，在激发光的照射下，会被破坏和淬灭，从而影响检测结果。碳点具有独特的光学性质、优异的光稳定性和良好的生物相容性。本专利技术将荧光增白剂负载在碳点上，一方面可以利用碳点提高荧光增白剂的稳定性和抗淬灭性，另一方面，利用荧光增白剂的特异性结合，提高复合材料与真菌的结合能力。本专利技术制备的荧光增白剂
‑
碳点A复合材料，在紫外光的激发下呈现蓝色荧光，可以对真菌进行快速高效的染色。
[0011]进一步地，荧光增白剂包括荧光增白剂33、荧光增白剂71、荧光增白剂28中的至少一种。
[0012]进一步地，荧光增白剂优选荧光增白剂28。
[0013]进一步地，柠檬酸、叶酸、荧光增白剂和去离子水的用量比为(5
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7)g：(3
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4.5)g：(0.5
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0.9)g：(350
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600)mL。
[0014]进一步地，混合液a进行水热反应的温度为200
‑
220℃，水热反应的时间为4
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6h。
[0015]进一步地，超声分散时间为15
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25min。
[0016]进一步地，溴化乙锭
‑
碳点B复合材料的制备方法，包括以下步骤：将L
‑
络氨酸、邻苯二胺和溴化乙锭溶于去离子水和无水乙醇的混合溶液中，然后进行超声处理，得混合液b；将混合液放入高压反应釜中进行水热反应，反应结束后取出经离心、纯化、干燥处理，得溴化乙锭
‑
碳点B复合材料。
[0017]上述制备过程中，以L
‑
络氨酸、邻苯二胺和溴化乙锭为原料，通过水热反应制备了溴化乙锭
‑
碳点B复合材料，溴化乙锭负载在碳点B上。溴化乙锭是一种最常用的嵌入性荧光染料，活细胞或固定细胞均能从极稀溶液中摄取溴化乙锭，DNA螺旋暂时弯曲允许溴化乙锭荧光染料嵌入大分子疏水中心的碱基对之间。但是，溴化乙锭具有易光漂白的特点，无法满足长程追踪成像的需求。本专利技术将溴化乙锭负载在碳点上，可以提高溴化乙锭的抗光漂白性能，染色速度也得到提高。本专利技术制备的溴化乙锭
‑
碳点B复合材料在紫外光的激发下呈现橙红色荧光，荧光强度高。
[0018]进一步地，L
‑
络氨酸、邻苯二胺、溴化乙锭、去离子水和无水乙醇的用量比为(3.5
‑
5)g：(2.2
‑
2.9)g：(0.2
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种阴道分泌物荧光染色液，其特征在于：包括以下重量份数的原料：荧光增白剂
‑
碳点A复合材料0.005
‑
0.05%、溴化乙锭
‑
碳点B复合材料0.009
‑
0.08%、吖啶橙0.001
‑
0.004%、抗淬灭剂0.01
‑
0.1%、余量为水；所述荧光增白剂
‑
碳点A复合材料的制备方法，包括以下步骤：将柠檬酸和叶酸溶于去离子水中，然后加入荧光增白剂，超声分散得到混合液a；将混合液转移至高压反应釜中进行水热反应，反应结束后取出经离心、纯化、干燥处理，得荧光增白剂
‑
碳点A复合材料；所述溴化乙锭
‑
碳点B复合材料的制备方法，包括以下步骤：将L
‑
络氨酸、邻苯二胺和溴化乙锭溶于去离子水和无水乙醇的混合溶液中，然后进行超声处理，得混合液b；将混合液放入高压反应釜中进行水热反应，反应结束后取出经离心、纯化、干燥处理，得溴化乙锭
‑
碳点B复合材料。2.根据权利要求1所述的一种阴道分泌物荧光染色液，其特征在于：所述抗淬灭剂为没食子酸盐、甘油、丙二醇、对苯二胺或抗坏血酸中的一种或几种的组合。3.根据权利要求1所述的一种阴道分泌物荧光染色液，其特征在于：所述荧光增白剂包括荧光增白剂33、荧光增白剂71、荧光增白剂28中的至少一种。4.根据权利要求1所述的一种阴道分泌物荧光染色液，其特征在于：所述柠檬酸、叶酸、荧光增白剂和去离子水的用量比为(...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋鑫，宋玉莹，王飞，李硕，
申请(专利权)人：德州国科医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：