一种水稻分蘖芽活力的测定方法及分蘖芽中活性氧水平的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种水稻分蘖芽活力的测定方法及分蘖芽中活性氧水平的检测方法。测定方法通过检测水稻幼苗的分蘖芽中活性氧ROS水平来测定水稻分蘖芽的活力；所述水稻幼苗的分蘖芽中活性氧ROS水平与分蘖芽活力呈负相关，当活性氧ROS积累多时，水稻分蘖芽活力差；当活性氧ROS积累少时，水稻分蘖芽活力强。分蘖芽中活性氧ROS水平的检测方法通过培养水稻幼苗，获取分蘖芽组织，进行活性氧ROS染色观察以及活性氧ROS成份超氧阴离子和过氧化氢含量测定分析，从定性和定量两个方面评价水稻分蘖芽中活性氧ROS水平。本发明专利技术为水稻及其他作物分蘖芽生长发育(分蘖芽活力)研究增加了新的方法，本发明专利技术也为阐述水稻植株形态建成提供新的思路和见解。和见解。和见解。

【技术实现步骤摘要】
一种水稻分蘖芽活力的测定方法及分蘖芽中活性氧水平的检测方法


[0001]本专利技术涉及生物
，特别是涉及一种水稻分蘖芽活力的测定方法及分蘖芽中活性氧(ROS)水平的检测方法。

技术介绍

[0002]分蘖是水稻重要的农艺性状之一，分蘖的形成主要包括分蘖芽的形成和分蘖芽的伸长。通常在水稻每个叶位的叶腋里都能形成一个腋芽，即分蘖芽。分蘖芽处于休眠还是激活状态，受一系列环境因素和激素信号的影响。
[0003]活性氧(ROS)是植物体内一类信号分子，包括:O2‑
、H2O2和
·
OH等，控制着植物的生长发育过程。检测ROS的方法有很多，包括分光光度法，即基于自由基和氧化还原物质之间的反应而起作用，底物和产物之间在不同波长下的吸光度差异使自由基的半定量化；荧光染色法，即利用荧光探针进入细胞产生荧光产物，判断有关刺激下自由基产生的信息；色谱法，即
·
OH与特定的试剂反应生成可通过色谱分析检测到的稳定化合物；以及其他检测方法等。分蘖芽的休眠会导致水稻植株有效分蘖减少，最终影响产量。<br/>[0004]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种水稻分蘖芽活力的测定方法，其特征在于，通过检测水稻幼苗的分蘖芽中活性氧ROS水平来测定水稻分蘖芽的活力；所述水稻幼苗的分蘖芽中活性氧ROS水平与分蘖芽活力呈负相关，当活性氧ROS积累多时，水稻分蘖芽活力差；当活性氧ROS积累少时，水稻分蘖芽活力强。2.根据权利要求1所述的水稻分蘖芽活力的测定方法，其特征在于，通过检测对比不同水稻幼苗的分蘖芽中活性氧ROS水平来对比测定不同水稻分蘖芽的活力，进而用于判断水稻分蘖的多少。3.一种权利要求1或2所述的水稻分蘖芽活力的测定方法中的分蘖芽中活性氧ROS水平的检测方法，其特征在于，通过培养水稻幼苗，获取分蘖芽组织，进行活性氧ROS染色观察以及活性氧ROS成份超氧阴离子和过氧化氢含量测定分析，从定性和定量两个方面评价水稻分蘖芽中活性氧ROS水平。4.根据权利要求3所述的分蘖芽中活性氧ROS水平的检测方法，其特征在于，所述活性氧ROS染色观察采用NBT染色和/或H2DCFDA荧光显色液观察。5.根据权利要求4所述的分蘖芽中活性氧ROS水平的检测方法，其特征在于，所述活性氧ROS染色观察包括如下步骤：(1)采用大田生长21天且长势健壮的幼苗；(2)对水稻幼苗进行取材，取材部位包含地上部分茎基部组织和地下部分根冠组织；(3)取材的样品组织放入染色液前用镊子轻轻将基部最外层叶鞘拨松，使叶鞘内包裹的分蘖芽可以充分接触染液，但不要破坏叶鞘；(4)将取材得到的样品组织放入NBT染色或H2DCFDA荧光显色液进行染色处理；(5)观察结果。6.根据权利要求5所述的分蘖芽中活性氧ROS水平的检测方法，其特征在于，所述步骤(2)中，取材部位包含地上部分2厘米的茎基部组织和地下部分1厘米的根冠组织；和/或，所述步骤(3)中，取材的样品组织中，里面一层叶鞘包裹太紧，导致染液无法接触到分蘖芽，无法进行染色，作为...

【专利技术属性】
技术研发人员：邵高能，祝毛迪，唐绍清，胡培松，闻锐，陈宏法，魏祥进，赵凤利，
申请(专利权)人：中国水稻研究所，
类型：发明
国别省市：