一种有效纯化病毒样颗粒的方法技术

本发明专利技术提供了一种有效纯化病毒样颗粒的方法。本发明专利技术所提供的方法重点包括两步，其中一步是采用内部孔径比所需纯化的病毒样颗粒直径小的小孔阴离子层析介质进行层析，另一步是采用内部孔径为所需纯化的病毒样颗粒直径2

【技术实现步骤摘要】
一种有效纯化病毒样颗粒的方法


[0001]本专利技术涉及生物医药领域，具体地说是一种有效纯化病毒样颗粒的方法。

技术介绍

[0002]在生物医药领域，细胞培养或酵母表达重组病毒样颗粒，通常是由单体或多聚体蛋白自发组装形成的类病毒颗粒。与目的蛋白病毒样颗粒有着接近电荷的VP1单体、VP1单体截短蛋白、宿主蛋白、酶及核酸等，这些杂质通过传统的吸附洗脱模式可以有效去除。但是当强吸附杂质的含量较多时，会明显降低目的蛋白病毒样颗粒的载量，使目的蛋白收集主峰中，往往掺杂着与病毒样颗粒目的蛋白电荷性质接近的多种杂质，最终仍有一些杂质需要更多步层析才可以完全去除。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的是提供一种有效纯化病毒样颗粒的方法，以去除预处理样品中的大部分与目的蛋白性质接近的杂质，增加后续层析的载量。
[0004]本专利技术是这样实现的：一种有效纯化病毒样颗粒的方法，包括如下步骤：
[0005]a、将菌体或细胞破碎，通过过滤、离心、沉淀复溶对样品进行粗纯预处理；
[0006]b、将粗纯预处理后的样品负染色，使本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种有效纯化病毒样颗粒的方法，其特征是，包括如下步骤：a、对样品进行粗纯预处理；b、将粗纯预处理后的样品负染色，使用透射电镜检测，查找并检测所需纯化的病毒样颗粒的直径；c、将缓冲液及上样液pH调节至高于病毒样颗粒等电点1
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2.5个pH；d、采用内部孔径比所需纯化的病毒样颗粒直径小的小孔阴离子层析介质进行层析；e、采用内部孔径为所需纯化的病毒样颗粒直径2
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8倍的大孔阴离子层析介质进行层析；f、对步骤e中收集的层析液进行分子筛层析；g、对分子筛层析后收集的层析液进行透析或超滤换盐，将目的蛋白的缓冲液置换到适合储存的稳定体系。2.根据权利要求1所述的有效纯化病毒样颗粒的方法，其特征是，步骤a中，对样品进行粗纯预处理，具体是：将样品破碎，之后过滤、离心、沉淀复溶。3.根据权利要求2所述的有效纯化病毒样颗粒的方法，其特征是，步骤c中所述缓冲液为磷酸盐缓冲液、Tris
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HCl缓冲液、醋酸
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醋酸盐缓冲液或柠檬酸
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柠檬酸盐缓冲液。4.根据权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：张卫婷，李岩异，刘容麟，庞晓敏，陈金利，张红霞，马东杰，李晓，董乾，
申请(专利权)人：华北制药金坦生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：