荧光标志物的检测方法及检测设备技术

本发明专利技术提供了一种荧光标志物的检测方法及检测设备，所述检测方法包括基于荧光材料组合中各种荧光材料发射光谱峰的位置差异和/或斯托克斯位移的差异进行编码。该检测方法可以打破荧光编码受制于发射光谱重叠的限制，利用发射光谱以及斯托克斯位移共编码技术，实现多重免疫组织化学/免疫荧光的超多元编码，同时该检测方法不依赖迭代顺序抗体标记和成像技术、不需要多光谱成像技术就可以实现多重免疫组织化学/免疫荧光的超多元检测，适用于常规的成像仪器、成本低、扫描速度快。扫描速度快。扫描速度快。

【技术实现步骤摘要】
荧光标志物的检测方法及检测设备


[0001]本专利技术涉及荧光检测
，特别是涉及一种荧光标志物的检测方法及检测设备。

技术介绍

[0002]常规免疫组织化学/免疫荧光(IHC/IF)通常用作组织病理学领域的诊断技术，但存在一定的局限性。其中最主要的局限性是这种技术每次只能检测组织样本上的一个标记物。这可能导致患者样本中重要的预后和诊断信息的错失。以肿瘤浸润性CD8+T细胞为例，可以通过识别CD8、CD3、FOXP3和CD20等抗原的表达来识别CD8+T细胞，单独识别其中的一种抗原可能会导致假阳性或者假阴性的问题。同样的，单一抗原的识别也会导致基于IHC/IF生物标记评估的另一个缺点——高观察者间变异性，不同人对于同一张切片由于缺乏多种判断依据的相互佐证而导致主观的、不可重复的评估结果。
[0003]为了解决上述问题，近年来研究者开发出了多重免疫组织化学/免疫荧光(mIHC/IF)技术，该技术允许在单个组织切片上同时检测多个标记物，并已开始在研究和临床环境中引入使用。通过mIHC/IF技术可以提供有关癌症微环境、预后、治疗和复发的关本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种荧光标志物的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括基于荧光材料组合中各种荧光材料发射光谱峰的位置差异和/或斯托克斯位移的差异进行编码。2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括基于荧光材料组合中各种荧光材料发射光谱峰的位置差异和斯托克斯位移的差异进行共编码。3.如权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述荧光材料组合包括无机荧光材料之间的组合、有机荧光材料之间的组合或所述无机荧光材料及所述有机荧光材料之间的组合。4.如权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述荧光材料组合中，至少有一种荧光材料的斯托克斯位移与其余各种荧光材料的斯托克斯位移差值为50nm以上；和/或至少有一种荧光材料为反斯托克斯位移，区别于其余各种荧光材料的斯托克斯位移。5.如权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述无机荧光材料至少包括量子点、上转换纳米粒子中一种或几种。6.如权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述有机荧光材料至少包括有机荧光染料、有机小分子发光材料、有机高分子发光材料、荧光蛋白中的一种或几种。7.如权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述荧光材料组合为量子点、有机荧光染料、上转换纳米粒子中任意两种或三种的组合。8.如权利要求2至7任一项所述的检测方法，其特征在于，所述基于荧光材料组合中各个荧光材料发射光谱峰的位置差异进行编码包括对不同荧光材料的不同发射光谱峰的位置进行第一重编码，若每一种可区分的发射光谱峰的位置对应一个特定的目标检测物，则进行第一重编码；若每一种可区分的发射光谱峰的位置对应至少两个特定的目标检测物，则进行第二重编码。9.如权利要求8所述的检测方法，其特征在于，所述基于荧光材料组合中各种荧光材料斯托克斯位移的差异进行编码包括对发射光谱峰的位置相同或相近的荧光材料用不同的斯托克斯位移或不同的反斯托克斯位移或斯托克斯位移与反斯托克斯位移的差异进行第二重编码。10.如权利要求9所述的检测方法，其特征在于，所述对不同荧光材料的不同发射光谱峰的位置进行第一重编码包括以下步骤：步骤S1、将不同的荧光材料和不同的反应物之间建立相对应的关系；步骤S2、将标记有不同荧光材料的反应物与待测样本进行反应；步骤S3、根据荧光材料的种类选择对应的荧光通道，检测设备自动切换与荧光通道相对应的第二滤光片进行滤光；步骤S4、用各种激发光激发不同的荧光材料，其中，发射光谱峰的位置不可区分的荧光材料的发射光通过相同的荧光通道对应的同一第二滤光片；发射光谱峰的位置可区分的荧光材料的发射光通过不同的荧光通道对应的不同第二滤光片；步骤S5、用检测器检测通过不同的第二滤光片滤光后的发射光；步骤S6、根据检测器检测到的经过不...

【专利技术属性】
技术研发人员：盛滔，张亚楠，
申请(专利权)人：上海思路迪生物医学科技有限公司，
类型：发明
国别省市：