用于抑制补体因子B表达的siRNA、其缀合物和药物组合物及其用途制造技术

技术编号：38872507 阅读：21 留言：0更新日期：2023-09-22 14:08

本发明专利技术涉及能够抑制补体因子B(CFB)基因表达的siRNA、siRNA缀合物、包含其的药物组合物、及其用途。所述siRNA中的每个核苷酸各自独立地为修饰或未修饰的核苷酸，该siRNA含有正义链和反义链。所述siRNA及其缀合物和药物组合物可以有效治疗和/或预防与CFB基因过表达相关的疾病。相关的疾病。

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【技术实现步骤摘要】
用于抑制补体因子B表达的siRNA、其缀合物和药物组合物及其用途

[0001]本申请涉及能够抑制补体因子B(CFB)基因表达的siRNA、siRNA缀合物、包含其的药物组合物、其制备方法和用途。

技术介绍

[0002]补体(Complement,C)是存在于人和动物血清与组织液中的一组不耐热、经活化后具有酶活性、可介导免疫应答和炎症反应的蛋白质。补体系统(Complement system)被激活后，介导一系列的细胞反应，如细胞溶解、调理吞噬(抗原抗体结合)、炎症反应、清除免疫复合物等。补体系统主要由固有成分、调节蛋白及受体等30余种糖蛋白组成，这些蛋白质以血液中可溶性蛋白存在或以膜相关蛋白存在。将补体系统分成三个启动途径——经典、凝集素和替代途径，其在组分C3处会聚以产生称为C3转化酶的酶复合物，该酶复合物将C3裂解成C3a和C3b。C3b与C3转化酶通过补体因子B(CFB)介导结合，并导致C5转化酶的产生，C5转化酶将C5裂解成C5a和C5b，这启动了膜攻击途径，导致膜攻击复合物(MAC)的形成，该膜攻击复合物(MAC)包括组分C5b、C6、C7、C8和C9。膜攻击复合物(MAC)形成跨膜通道并破坏靶细胞的磷脂双层，导致细胞裂解。
[0003]补体系统CFB的不适当的激活是在许多疾病中的增殖和/或起始病变的原因，这些疾病包括例如，原发性膜性肾病、溶血性尿毒症综合征、C3肾小球病、IgA肾病、阵法性夜间血红蛋白尿(PNH)、年龄相关性黄斑病变和眼科疾病。
[0004]开发CFB补体抑制剂是一项有前景...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种能够抑制补体因子B(CFB)基因表达的siRNA，所述siRNA包含正义链与反义链，其中所述siRNA中的每个核苷酸各自独立地为修饰或未修饰的核苷酸，其中所述正义链含有核苷酸序列I，反义链含有核苷酸序列II，所述核苷酸序列I和所述核苷酸序列II至少部分地反向互补形成双链区，其中所述核苷酸序列I和核苷酸序列II选自以下序列：(1)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:217所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:218所示的核苷酸序列：5
’‑
CAAGACCAAAA
‑3’
(SEQ ID NO:217)5
’‑
UUUUGGUCUUG
‑3’
(SEQ ID NO:218)；(2)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:219所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:220所示的核苷酸序列：5
’‑
CUACAAUGUGAGUGAU
‑3’
(SEQ ID NO:219)5
’‑
AUCACUCACAUUGUAG
‑3’
(SEQ ID NO:220)；(3)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:221所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:222所示的核苷酸序列：5
’‑
UCUCUUUCCACUGCUAU
‑3’
(SEQ ID NO:221)5
’‑
AUAGCAGUGGAAAGAGA
‑3’
(SEQ ID NO:222)；(4)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:223所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:224所示的核苷酸序列：5
’‑
CAGACAGCAGUA
‑3’
(SEQ ID NO:223)5
’‑
UACUGCUGUCUG
‑3’
(SEQ ID NO:224)；(5)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:225所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:226所示的核苷酸序列：5
’‑
AGCAGCUCAAU
‑3’
(SEQ ID NO:225)5
’‑
AUUGAGCUGCU
‑3’
(SEQ ID NO:226)，其中所述核苷酸序列I不为SEQ ID NO:47，所述核苷酸序列II不为SEQ ID NO:48；(6)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:227所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:228所示的核苷酸序列：5
’‑
GUGUACAGCAUGAU
‑3’
(SEQ ID NO:227)5
’‑
AUCAUGCUGUACAC
‑3’
(SEQ ID NO:228)；(7)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:229所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:230所示的核苷酸序列：5
’‑
CAUCAUCCUCAUGA
‑3’
(SEQ ID NO:229)5
’‑
UCAUGAGGAUGAUG
‑3’
(SEQ ID NO:230)；(8)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:231所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:232所示的核苷酸序列：5
’‑
UCAUGACUGAUGGA
‑3’
(SEQ ID NO:231)5
’‑
UCCAUCAGUCAUGA
‑3’
(SEQ ID NO:232)，其中所述核苷酸序列I不为SEQ ID NO:85，所述核苷酸序列II不为SEQ ID NO:86；(9)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:233所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包
含SEQ ID NO:234所示的核苷酸序列：5
’‑
ACCUGGAAGAUGUUU
‑3’
(SEQ ID NO:233)5
’‑
AAACAUCUUCCAGGU
‑3’
(SEQ ID NO:234)；(10)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:235所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:236所示的核苷酸序列：5
’‑
GAUGAAAGCCAGUCU
‑3’
(SEQ ID NO:235)5
’‑
AGACUGGCUUUCAUC
‑3’
(SEQ ID NO:236)，其中所述核苷酸序列I不为SEQ ID NO:127，所述核苷酸序列II不为SEQ ID NO:128；(11)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:129所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:130所示的核苷酸序列：5
’‑
gsasugaaAfgCfCfAfgucucugasTsT
‑3’
(SEQ ID NO:129)5
’‑
P1usCfsaGfaGfaCfuGfgCfuUfuCfaUfcsTsT
‑3’
(SEQ ID NO:130)；(12)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:237所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:238所示的核苷酸序列：5
’‑
CAACAUUAAUGGGAAAAA
‑3’
(SEQ ID NO:237)5
’‑
UUUUUCCCAUUAAUGUUG
‑3’
(SEQ ID NO:238)；(13)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:239所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:240所示的核苷酸序列：5
’‑
AUUUUAUGACUAUGA
‑3’
(SEQ ID NO:239)5
’‑
UCAUAGUCAUAAAAU
‑3’
(SEQ ID NO:240)，其中所述核苷酸序列I不为SEQ ID NO:145，所述核苷酸序列II不为SEQ IDNO:146；(14)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:241所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:242所示的核苷酸序列：5
’‑
AUGACGUUGCCCUGAU
‑3’
(SEQ ID NO:241)5
’‑
AUCAGGGCAACGUCAU
‑3’
(SEQ ID NO:242)；(15)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:243所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:244所示的核苷酸序列：5
’‑
CAAGAAUAAGCUGAAAUA
‑3’
(SEQ ID NO:243)5
’‑
UAUUUCAGCUUAUUCUUG
‑3’
(SEQ ID NO:244)；(16)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:245所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:246所示的核苷酸序列：5
’‑
CACUUGCCAGCAA
‑3’
(SEQ ID NO:245)5
’‑
UUGCUGGCAAGUG
‑3’
(SEQ ID NO:246)；(17)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:247所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:248所示的核苷酸序列：5
’‑
GCUAUGACAAAGUCAA
‑3’
(SEQ ID NO:247)5
’‑
UUGACUUUGUCAUAGC
‑3’
(SEQ ID NO:248)；(18)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列；
(19)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:4所示的核苷酸序列；(20)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:27所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:28所示的核苷酸序列；(21)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:29所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:30所示的核苷酸序列；(22)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:31所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:32所示的核苷酸序列；(23)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:51所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:52所示的核苷酸序列；(24)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:87所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:88所示的核苷酸序列；(25)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:93所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:94所示的核苷酸序列；(26)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:95所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:96所示的核苷酸序列；(27)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:97所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:98所示的核苷酸序列；(28)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:99所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:100所示的核苷酸序列；(29)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:103所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:104所示的核苷酸序列；(30)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:131所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:132所示的核苷酸序列；(31)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:133所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:134所示的核苷酸序列；(32)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:135所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:136所示的核苷酸序列；(33)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:137所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:138所示的核苷酸序列；(34)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:201所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:202所示的核苷酸序列；(35)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:207所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:208所示的核苷酸序列；(36)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:209所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:210所示的核苷酸序列；(37)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:211所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:212所示的核苷酸序列；(38)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:213所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包
含SEQ ID NO:214所示的核苷酸序列；(39)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:215所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:216所示的核苷酸序列；(40)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:401所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:402所示的核苷酸序列：5
’‑
CAAGAUAUGGUCU
‑3’
(SEQ ID NO:401)5
’‑
AGACCAUAUCUUG
‑3’
(SEQ ID NO:402)；(41)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:403所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:404所示的核苷酸序列：5
’‑
AUGGUCUAGUGACAUA
‑3’
(SEQ ID NO:403)5
’‑
UAUGUCACUAGACCAU
‑3’
(SEQ ID NO:404)，其中所述核苷酸序列I不为SEQ ID NO:285，所述核苷酸序列II不为SEQ ID NO:286；(42)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:405所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:406所示的核苷酸序列：5
’‑
CUACAACAUUAAUG
‑3’
(SEQ ID NO:405)5
’‑
CAUUAAUGUUGUAG
‑3’
(SEQ ID NO:406)；(43)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:407所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:408所示的核苷酸序列：5
’‑
GUGAAGCCAAGAUAU
‑3’
(SEQ ID NO:407)5
’‑
AUAUCUUGGCUUCAC
‑3’
(SEQ ID NO:408)；(44)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:354所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:355所示的核苷酸序列：5
’‑
CUAGUGACAUAUGCCACAU
‑3’
(SEQ ID NO:354)5
’‑
AUGUGGCAUAUGUCACUAG
‑3’
(SEQ ID NO:355)；(45)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:409所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:410所示的核苷酸序列：5
’‑
GGAAAAAAGAAGCAGGAA
‑3’
(SEQ ID NO:409)5
’‑
UUCCUGCUUCUUUUUUCC
‑3’
(SEQ ID NO:410)；(46)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:391所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:392所示的核苷酸序列；(47)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:393所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:392所示的核苷酸序列；(48)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:391所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:394所示的核苷酸序列；(49)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:391所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:395所示的核苷酸序列；(50)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:391所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:396所示的核苷酸序列；(51)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:259所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包
含SEQ ID NO:260所示的核苷酸序列；(52)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:259所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:397所示的核苷酸序列；(53)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:398所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:397所示的核苷酸序列；(54)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:259所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:399所示的核苷酸序列；(55)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:259所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:400所示的核苷酸序列；(56)所述核苷酸序列I包含SEQ ID NO:250所示的核苷酸序列，且所述核苷酸序列II包含SEQ ID NO:130所示的核苷酸序列。2.根据权利要求1所述的siRNA，其中所述核苷酸序列I和所述核苷酸序列II基本上反向互补、实质上反向互补或完全反向互补；所述基本上反向互补是指两个核苷酸序列之间存在不多于3个的碱基错配；所述实质上反向互补是指两个核苷酸序列之间存在不多于1个的碱基错配；完全反向互补是指两个核苷酸序列之间没有错配。3.根据权利要求1或2所述的siRNA，其中所述正义链还含有核苷酸序列III，所述反义链还含有核苷酸序列IV，核苷酸序列III和核苷酸序列IV的长度各自独立地为0
‑
9个核苷酸，其中所述核苷酸序列III连接在核苷酸序列I的5'末端，核苷酸序列IV连接在核苷酸序列II的3'末端，所述核苷酸序列III和所述核苷酸序列IV长度相等并且实质上反向互补或完全反向互补；所述实质上反向互补是指两个核苷酸序列之间存在不多于1个的碱基错配；完全反向互补是指两个核苷酸序列之间没有错配；和/或，所述核苷酸序列III连接在核苷酸序列I的3'末端，核苷酸序列IV连接在核苷酸序列II的5'末端，所述核苷酸序列III和所述核苷酸序列IV长度相等并且实质上反向互补或完全反向互补；所述实质上反向互补是指两个核苷酸序列之间存在不多于1个的碱基错配；完全反向互补是指两个核苷酸序列之间没有错配。4.根据权利要求1
‑
3中任一项所述的siRNA，所述正义链还含有核苷酸序列V和/或所述反义链还含有核苷酸序列VI，核苷酸序列V和VI的长度为0至3个核苷酸，核苷酸序列V连接在所述正义链的3'末端构成正义链的3'突出端和/或核苷酸序列VI连接在所述反义链的3'末端构成反义链的3'突出端；优选地，所述核苷酸序列V或VI的长度为2个核苷酸；更优选地，所述核苷酸序列V或VI为连续的两个胸腺嘧啶脱氧核糖核苷酸或连续的两个尿嘧啶核糖核苷酸；或者，所述核苷酸序列V或VI与靶mRNA相应位置的核苷酸错配或互补。5.根据权利要求1
‑
4中任一项所述的siRNA，其中该双链区的长度是15
‑
30个核苷酸对；优选地，双链区的长度是17
‑
23个核苷酸对；更优选地，双链区的长度是19
‑
21个核苷酸对。6.根据权利要求1
‑
5中任一项所述的siRNA，其中正义链或反义链具有15
‑
30个核苷酸；优选地，正义链或反义链具有19
‑
25个核苷酸；更优选地，正义链或反义链具有19
‑
23个核苷酸。7.根据权利要求1
‑
6中任一项所述的siRNA，其中所述正义链或所述反义链中的至少一个核苷酸为修饰的核苷酸，和/或至少一个磷酸酯基为具有修饰基团的磷酸酯基；优选地，
所述含有修饰基团的磷酸酯基为磷酸酯基中的磷酸二酯键中的至少一个氧原子被硫原子取代而形成的硫代磷酸酯基；和/或，所述siRNA包括不包含3
’
突出端核苷酸的正义链。8.根据权利要求1
‑
7中任一项所述的siRNA，其中，所述正义链的5
’
末端核苷酸连接5
’
磷酸基团或5
’
磷酸衍生基团，和/或所述反义链的5
’
末端核苷酸连接5
’
磷酸基团或5
’
磷酸衍生基团。9.根据权利要求1
‑
8中任一项所述的siRNA，其中所述修饰的核苷酸选自2
’‑
氟代修饰的核苷酸，2
’‑
烷氧基修饰的核苷酸，2
’‑
取代的烷氧基修饰的核苷酸，2
’‑
烷基修饰的核苷酸，2
’‑
取代的烷基修饰的核苷酸，2
’‑
脱氧核苷酸，2
’‑
氨基修饰的核苷酸，2
’‑
取代的氨基修饰的核苷酸，核苷酸类似物或其中任意两种以上的组合。10.根据权利要求1
‑
9中任一项所述的siRNA，其中，所述修饰的核苷酸选自2
’‑
氟代修饰的核苷酸，2
’‑
甲氧基修饰的核苷酸，2
’‑
O
‑
CH2‑
CH2‑
O
‑
CH3修饰的核苷酸，2
’‑
O
‑
CH2‑
CH＝CH2修饰的核苷酸，2
’‑
CH2‑
CH2‑
CH＝CH2修饰的核苷酸，2
’‑
脱氧核苷酸，核苷酸类似物或其中任意两种以上的组合。11.根据权利要求1
‑
10中任一项所述的siRNA，其中所述正义链和所述反义链中的每一个核苷酸独立地为2
’‑
氟代修饰的核苷酸或非氟代修饰的核苷酸；优选地，按照5
’
到3
’
的方向，2
’‑
氟代修饰的核苷酸位于正义链的第7、9、10和11位，其余位置为非氟代修饰的核苷酸；按照5
’
到3
’
的方向，2
’‑
氟代修饰的核苷酸位于反义链的偶数位，其余位置为非氟代修饰的核苷酸；或者，按照5
’
到3
’
的方向，2
’‑
氟代修饰的核苷酸位于正义链的第7、9、10和11位，其余位置为非氟代修饰的核苷酸；按照5
’
到3
’
的方向，2
’‑
氟代修饰的核苷酸位于反义链的第2、6、14和16位，其余位置为非氟代修饰的核苷酸；或者，按照5
’
到3
’
的方向，2
’‑
氟代修饰的核苷酸位于正义链的第7、9、10和11位，其余位置为非氟代修饰的核苷酸；按照5
’
到3
’
的方向，2
’‑
氟代修饰的核苷酸位于反义链的第2、6、8、9、14和16位，其余位置为非氟代修饰的核苷酸；或者，按照5
’
到3
’
的方向，2
’‑
氟代修饰的核苷酸位于正义链的第7、9、10和11位，其余位置为非氟代修饰的核苷酸；按照5
’
到3
’
的方向，2
’‑
氟代修饰的核苷酸位于反义链的第2、14和16位，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：王书成，黄河，刘薇，王岩，林国良，产运霞，耿玉先，汪小君，荣梅，
申请(专利权)人：北京福元医药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：

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