醋酸去氨加压素口服溶液含量测定方法技术

本发明专利技术公开一种醋酸去氨加压素口服溶液含量测定方法，通过采用高效液相色谱法同时测定醋酸去氨加压素口服溶液中醋酸去氨加压素、羟苯甲酯、羟苯丙酯的含量；其中，色谱条件包括：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相包括流动相A和流动相B，采用梯度洗脱；流动相A为体积比为(80～100)：(0～20)的缓冲液和乙腈的混合溶液，缓冲液的浓度为0.01～0.07mol/L；流动相B为乙腈；检测波长为220nm；色谱柱柱温为25～40℃；流动相流速为0.5～2.0mL/min。本发明专利技术提供的含量测定方法可以同时测定原料药醋酸加压素和防腐剂羟苯甲酯、羟苯丙酯的含量，方便高效，省时，检测精准。检测精准。

【技术实现步骤摘要】
醋酸去氨加压素口服溶液含量测定方法


[0001]本专利技术属于药物分析
，涉及一种醋酸去氨加压素口服溶液含量测定方法。

技术介绍

[0002]醋酸去氨加压素是天然精氨酸加压素的结构类似物，具有抗利尿和促凝作用，临床上常用于治疗血友病A、I型血管性血友病和尿崩症等。醋酸去氨加压素通常制成注射剂、注射剂(粉)、片剂和鼻喷剂，2013年，GP Pharma公司开发的醋酸去氨加压素口服溶液在欧洲获批上市，口服溶液剂型相比注射剂和片剂，更适宜儿童和吞咽困难的人群使用，剂量精准，依从性更好。
[0003]醋酸去氨加压素口服溶液的处方由原料药、羟苯甲酯和羟苯丙酯组成，用盐酸调节pH制得。目前各国药典均未收录醋酸去氨加压素口服溶液，国内目前尚无其含量测定方法的报道。而美国药典收录的醋酸去氨加压素原料药的含量检测方法，防腐剂会干扰主峰及其他杂质出峰，中国药典收录的醋酸去氨加压素片剂含量检测方法辅料洗脱时间长，主峰与杂质峰分离不佳，因而需要开发一种新的醋酸去氨加压素口服溶液含量测定方法。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种醋酸去氨加压素口服溶液含量测定方法。本专利技术提供的醋酸去氨加压素口服溶液含量测定方法可以同时测定原料药醋酸加压素和两个防腐剂羟苯甲酯、羟苯丙酯的含量，方便高效，省时，检测精准，可用于醋酸去氨加压素口服溶液制备过程及最终产品的质量控制，也可用于稳定性样品的检测，在醋酸去氨加压素口服溶液实际质量控制工作中实用性强。
[0005]根据本专利技术的一个方面，提供了一种醋酸去氨加压素口服溶液含量测定方法，包括如下步骤：采用高效液相色谱法测定醋酸去氨加压素口服溶液中醋酸去氨加压素、羟苯甲酯、羟苯丙酯的含量；其中，高效液相色谱法的色谱条件包括：
[0006]色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；
[0007]流动相包括流动相A和流动相B，采用梯度洗脱；其中，流动相A为缓冲液和乙腈的混合溶液(缓冲液
‑
乙腈)，两者的体积比为(80～100)：(0～20)，缓冲液的浓度为0.01～0.07mol/L；流动相B为乙腈；
[0008]检测波长为220nm；色谱柱柱温为25～40℃；流动相流速为0.5～2.0mL/min。
[0009]在一些实施方式中，色谱柱的规格可以为4.6mm
×
150mm，5μm，即内径为4.6mm，长度为150mm，填充剂粒径为5μm。
[0010]在一些实施方式中，色谱柱可以为Welch Ultimate XB
‑
C18、Horizon
‑
C18或其他效能相当的色谱柱。
[0011]在一些实施方式中，缓冲液可以为磷酸盐缓冲液，其组分包括磷酸二氢钾、磷酸氢二钠和水，主要通过将无水磷酸氢二钠、磷酸二氢钾溶解于水中制得，pH值接近于7.0。
[0012]在一些实施方式中，磷酸盐缓冲液的浓度可以为0.0335mol/L，其制备方法包括如下步骤：取无水磷酸氢二钠2.37g，磷酸二氢钾2.28g，加水1000mL使溶解，即得。由此，可以避免由于缓冲液浓度太高在检测过程中出现盐析而影响检测结果的问题。
[0013]在一些实施方式中，流动相A中，缓冲液和乙腈的体积比可以为95:5。
[0014]在一些实施方式中，色谱柱柱温可以为35℃。
[0015]在一些实施方式中，进样体积可以为50～100μL。
[0016]在一些实施方式中，流动相流速可以为1.0mL/min。
[0017]在一些实施方式中，流动相梯度洗脱的程序可以为：
[0018]时间(分钟)流动相A(体积％)流动相B(体积％)082184703010653515653515.018218208218
[0019]在上述洗脱程序下，醋酸去氨加压素主峰、羟苯甲酯峰、羟苯丙酯峰完全分离，峰形较好且出峰时间适宜，供试品溶液中主峰与杂质峰分离佳。
[0020]与现有技术相比，本专利技术的有益效果包括：
[0021](1)在本专利技术建立的用于测定醋酸去氨加压素口服溶液含量的高效液相色谱的色谱条件下，醋酸去氨加压素主峰、羟苯甲酯峰、羟苯丙酯峰峰形较好且出峰时间适宜，相邻峰的分离度均大于1.5；
[0022](2)本专利技术提供的醋酸去氨加压素口服溶液含量测定方法，专属性良好，醋酸去氨加压素、羟苯甲酯和羟苯丙酯在一定浓度内浓度与其峰面积线性关系均良好，方法准确度、重复性、耐用性良好；
[0023](3)本专利技术提供的醋酸去氨加压素口服溶液含量测定方法方便高效，省时，检测精准。
附图说明
[0024]图1为采用色谱条件1测得的色谱图；
[0025]图2为采用色谱条件2测得的色谱图；
[0026]图3～5依次为为采用色谱条件4测得的空白溶液、对照品溶液和供试品溶液的色谱图。
具体实施方式
[0027]下面结合实施方式对本专利技术作进一步详细的说明。实施例仅用于解释而不以任何方式限制本专利技术。如无特殊说明，实施例中所用原料和试剂为可以通过市售获得的常规产品；实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照本领域常规条件或按照制造厂商建议的条件。
[0028]试验例1醋酸去氨加压素口服溶液含量测定方法的建立
[0029]1、仪器与试剂
[0030]主要仪器：Waters E2695
‑
2998高效液相色谱仪，赛多利斯电子天平。
[0031]主要试剂：乙腈，色谱纯；无水磷酸氢二钠，分析纯；磷酸二氢钾，分析纯；氢氧化钠，分析纯。
[0032]2、样品信息
[0033]醋酸去氨加压素对照品，含量：90.1％，来源：中国食品药品检定研究院；
[0034]羟苯甲酯对照品，含量：99.9％，来源：中国食品药品检定研究院；
[0035]羟苯丙酯对照品，含量：99.9％，来源：中国食品药品检定研究院；
[0036]3、稀释剂的选择
[0037]分别采用水、5％乙腈(即水
‑
乙腈，95:5，v/v)、磷酸盐缓冲液
‑
乙腈(95:5，v/v)、磷酸盐缓冲液
‑
乙腈(90:10，v/v)作为稀释剂考察，醋酸去氨加压素、羟苯甲酯钠、羟苯丙酯钠在水中溶解性均较好，不同稀释剂结果基本一致，由于纯水及缓冲溶液容易长菌，并从经济成本及溶剂稳定性考虑，选择5％乙腈作为稀释剂。
[0038]4、溶液制备
[0039]空白溶剂：5％乙腈；
[0040]醋酸去氨加压素对照品储备液：称取醋酸去氨加压素对照品约20mg置50mL量瓶中，用5％乙腈溶解并定量稀释至刻度，摇匀，即得。
[0041]羟苯甲酯对照品储备液：称取羟苯甲酯对照品约45mg，置25mL量瓶中，先用5mL乙腈溶解，用5％乙腈定量稀释至刻度，摇匀，即得。
[0042]羟苯丙酯对照品储备液：称取羟苯丙酯对照品约20mg置100mL量瓶中，先本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.醋酸去氨加压素口服溶液含量测定方法，其特征在于，包括如下步骤：采用高效液相色谱法测定醋酸去氨加压素口服溶液中醋酸去氨加压素、羟苯甲酯、羟苯丙酯的含量；其中，所述高效液相色谱法的色谱条件包括：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相包括流动相A和流动相B，采用梯度洗脱；其中，所述流动相A为体积比为(80～100)：(0～20)的缓冲液和乙腈的混合溶液，所述缓冲液的浓度为0.01～0.07mol/L；所述流动相B为乙腈；检测波长为220nm；色谱柱柱温为25～40℃；流动相流速为0.5～2.0mL/min。2.根据权利要求1所述的醋酸去氨加压素口服溶液含量测定方法，其特征在于，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液，其组分包括磷酸二氢钾、磷酸氢二钠和水。3.根据权利要求2所述的醋酸去氨加压素口服溶液含量测定方法，其特征在于，所述磷酸盐缓冲...

【专利技术属性】
技术研发人员：许佳佳，黄思玉，范铭超，梁燕婷，刘娟，
申请(专利权)人：深圳市贝美药业有限公司，
类型：发明
国别省市：