本发明专利技术属于生物医药技术领域，公开了一种注射用多孔微球、其制备方法和应用。本发明专利技术提供一种注射用多孔微球，由肝素结合肽III和PLLA结合制备而成；所述肝素结合肽III的氨基酸序列为FHRRIKA。本发明专利技术制备的PLLA肝素结合肽III微球无细胞毒性，具有较好的细胞粘附能力，并且可抑制炎症因子的产生。本发明专利技术提供的微球制备方法简单，不需要大型仪器设备，生产成本低，适合大规模制备。本发明专利技术采用的微球制备方法不用交联，不使用交联剂，无交联剂残留。无交联剂残留。无交联剂残留。
【技术实现步骤摘要】
一种注射用多孔微球、其制备方法和应用
[0001]本专利技术涉及生物医药
，具体涉及一种注射用多孔微球、其制备方法和应用。
技术介绍
[0002]聚L
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乳酸(PLA，商品名：Scuiptra)于1999年在欧洲获得治疗皮肤皱纹、疤痕、皮肤老化等症状的认证。2004年8月获得美国食品和药物管理局快速评审后批准用于治疗人类免疫缺陷病毒相关的面部脂肪萎缩。注射用聚L
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乳酸来源于α
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羟基酸家族中的一种可生物相容性，生物降解性的合成聚合物，被广泛应用于组织工程。聚左旋乳酸(PLLA)属于PLA家族，具有优异的物理和机械性能和生物降解性，与PDLA(通过D
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丙交酯聚合而成)相比，它具有更高的结晶度、化学稳定性和对酶的抗降解性，且PLLA降解产生L
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乳酸，对人体无害，加上PLLA的生产过程和来源绿色环保。因此PLLA是制备组织工程的热门材料。
[0003]然而，PLLA的生物相容性相对欠缺，需要对其进行改性，以增强其对细胞的响应性。现有技术中通过乳液
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溶剂挥发的方式，获得纯PLLA微球，再通过接枝胶原蛋白、明胶等材料进行改性。但是PLLA具有强疏水性，其对细胞的黏附能力差以及降解产物乳酸的形成，在左旋聚乳酸类产品注射初期，面部会出现轻微的炎症反应。由PLLA填充剂引起的不良反应包括淤血、水肿、结节和炎症反应等。
技术实现思路
[0004]本专利技术的目的在于克服现有技术的不足之处而提供一种注射用多孔微球、其制备方法和应用。
[0005]为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案如下：
[0006]第一方面，本专利技术提供一种注射用多孔微球，由肝素结合肽III和PLLA结合制备而成；所述肝素结合肽III的氨基酸序列为FHRRIKA。
[0007]为解决聚L
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乳酸在注射填充中存在的不良反应，本专利技术提供了一种新型的肝素结合肽III(Heparin
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Binding Peptide III)结合制备的多孔微球。肝素结合肽III的氨基酸序列为FHRRIKA。本专利技术的多孔微球成本低、具有促进细胞粘附的非动物源性多肽，与明胶、胶原蛋白等生产材料相比，具有免疫原性低，制备工艺简单的优点。且无细胞毒性，具有较好的细胞粘附能力，并且可抑制炎症因子的产生。
[0008]作为本专利技术所述的注射用多孔微球的优选实施方式，所述肝素结合肽III和PLLA的质量比为1:2～1:10。
[0009]作为本专利技术所述的注射用多孔微球的优选实施方式，所述多孔微球的粒径为50μm～100μm。
[0010]第二方面，本专利技术提供一种注射用多孔微球的制备方法，包括以下步骤：
[0011](1)将肝素结合肽III溶解于水中，得肝素结合肽III溶液；
[0012](2)将PLLA溶解于二氯甲烷中，得PLLA二氯甲烷溶液；
[0013](3)将所述肝素结合肽III溶液滴加至所述PLLA二氯甲烷溶液中，均质，得混悬液；
[0014](4)将所述混悬液滴加至0.1％聚乙烯醇溶液中，搅拌挥发二氯甲烷，得微球；
[0015](5)抽去水相，洗涤，干燥，灭菌，得注射用多孔微球。
[0016]本专利技术提供的微球制备方法简单，不需要大型仪器设备，生产成本低，适合大规模制备。本专利技术采用的微球制备方法不用交联，不使用交联剂，无交联剂残留。
[0017]作为本专利技术所述的注射用多孔微球的优选实施方式，在所述肝素结合肽III和PLLA的质量比为1:2～1:10。
[0018]作为本专利技术所述的注射用多孔微球的优选实施方式，在步骤(1)中，所述肝素结合肽III的氨基酸序列为FHRRIKA。
[0019]作为本专利技术所述的注射用多孔微球的优选实施方式，在步骤(1)中，所述肝素结合肽III按1g:(40～7)mL质量体积比溶解于去离子水中。
[0020]作为本专利技术所述的注射用多孔微球的优选实施方式，在步骤(2)中，所述PLLA按1g:(10～30)mL的质量体积比溶解于二氯甲烷中。
[0021]作为本专利技术所述的注射用多孔微球的优选实施方式，在步骤(4)中，所述滴加按照0.5mL/min～1.5mL/min速度滴加。
[0022]第三方面，本专利技术将所述的注射用多孔微球、所述的制备方法在组织工程或面部填充中应用。
[0023]与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：
[0024](1)本专利技术提供了一种新型的肝素结合肽III结合制备的多孔微球。肝素结合肽III的氨基酸序列为FHRRIKA。本专利技术的多孔微球成本低、具有促进细胞粘附的非动物源性多肽，与明胶、胶原蛋白等生产材料相比，具有免疫原性低，制备工艺简单的优点。
[0025](2)本专利技术制备的PLLA肝素结合肽III微球无细胞毒性，具有较好的细胞粘附能力，并且可抑制炎症因子的产生。本专利技术提供的微球制备方法简单，不需要大型仪器设备，生产成本低，适合大规模制备。本专利技术采用的微球制备方法不用交联，不使用交联剂，无交联剂残留。
附图说明
[0026]图1为多孔微球的SEM图；
[0027]图2为不同浓度的肝素结合肽III对3T3
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L1细胞粘附作用的统计图；
[0028]图3为多孔微球对HDF细胞的细胞毒性统计图；
[0029]图4为多孔微球对HaCaT细胞的细胞毒性统计图；
[0030]图5为光显微镜观察多孔微球对3T3
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L1细胞吸附作用；
[0031]图6为多孔微注射位点组织的HE染色图。
具体实施方式
[0032]为更好地说明本专利技术的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本专利技术作进一步说明。本领域技术人员应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。
[0033]实施例中所用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；所用的材料、试剂等，如
无特殊说明，均可从商业途径得到。实施例中所涉及的肝素结合肽III(Heparin
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Binding Peptide III)其氨基酸序列为：FHRRIKA。
[0034]实施例1：
[0035](1)将250mg肝素结合肽III溶解于1.75mL去离子水中；
[0036](2)将500mg PLLA溶解于12mL二氯甲烷中；
[0037](3)将肝素结合肽III溶液滴加至PLLA二氯甲烷溶液中，进行均质，均质速度为12000rpm，时间为5min。
[0038](4)将均质后的混悬液按照1mL/min速度滴加至搅拌速度为500rpm的500mL 0.1％聚乙烯醇(PVA)溶液中，搅拌12h；
[0039](5)用真空抽滤泵抽去水相，用去离子水洗涤微球3次，冷冻干燥保存，辐照灭菌，得PLLA肝素结合肽III微球。其中，冷冻干燥程序如本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种注射用多孔微球，其特征在于，由肝素结合肽III和PLLA结合制备而成；所述肝素结合肽III的氨基酸序列为FHRRIKA。2.根据权利要求1所述的注射用多孔微球，其特征在于，所述肝素结合肽III和PLLA的质量比为1:2～1:10。3.根据权利要求1所述的注射用多孔微球，其特征在于，所述多孔微球的粒径为50μm～100μm。4.一种注射用多孔微球的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将肝素结合肽III溶解于水中，得肝素结合肽III溶液；(2)将PLLA溶解于二氯甲烷中，得PLLA二氯甲烷溶液；(3)将所述肝素结合肽III溶液滴加至所述PLLA二氯甲烷溶液中，均质，得混悬液；(4)将所述混悬液滴加至0.1％聚乙烯醇溶液中，搅拌挥发二氯甲烷，得微球；(5)抽去水相，洗涤，干燥，灭菌，得注射用多孔微球。5.根...
【专利技术属性】
技术研发人员：颜福霞，卢宏伟，邹衡芳，赵书宁，周晗，陈玉容，
申请(专利权)人：广州远想医学生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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