一种皮肤修复肽及其应用制造技术

本发明专利技术属于蛋白肽技术领域，公开了一种皮肤修复肽AF

【技术实现步骤摘要】
一种皮肤修复肽及其应用


[0001]本专利技术涉及蛋白肽
，具体涉及一种皮肤修复肽及其应用。

技术介绍

[0002]皮肤是机体与外界接触的第一道屏障，是维持内环境稳定和阻止微生物、化学物质等侵入的屏障。多种创伤均会引起皮肤缺损，如外力创伤，再如随着年龄的增大以及紫外线的影响，胶原蛋白大量流失，成纤维细胞合成的胶原蛋白和糖胺聚糖减少，导致支撑皮肤的胶原肽键断裂，皮肤出现损伤。在皮肤损伤中，活性肽起着独特而重要的生理作用，参与皮肤修护的过程，不仅能够促进皮肤细胞的增殖，还可以为皮肤提供营养，延缓皮肤老化，促进皮肤创伤修复。目前，活性肽作为皮肤修复的活性原料之一被广泛添加至皮肤护理产品当中。然而，现有技术中这些多肽不仅存在难以合成、活性有限的问题。因此，研发序列短小、合成简单、活性高效的促皮肤修复的超短肽成为皮肤修复、再生医疗、美容等领域的重点方向之一。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的在于克服现有技术的不足之处而提供一种皮肤修复肽及其应用。
[0004]为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案如下：
[0005]第一方面，本专利技术提供了一种皮肤修复肽，包括大鲵水解胶原肽和/或透皮肽。
[0006]本专利技术的皮肤修复肽能够促进成纤维细胞增殖，促进成纤维细胞划痕修复活性，促进胶原蛋白合成，促进弹性蛋白合成。可用于皮肤损伤修复的改善或治疗中。本专利技术的皮肤修复肽含有透皮短肽可促进透皮吸收，微量高效，安全性有保证。适用于在皮肤修复的化妆品或药品中应用，以实现皮肤损伤修复的改善或治疗的目的。
[0007]作为本专利技术所述的皮肤修复肽的优选实施方式，所述大鲵水解胶原肽的氨基酸序列为GLYYF。
[0008]作为本专利技术所述的皮肤修复肽的优选实施方式，所述透皮肽的氨基酸序列为ACSSSPSKHCG、CYGRKKRRQRRRC、RGDFK、LCLR、RPARPAR、VVVR、CTWLKY、TWLKYH中的任一种。
[0009]优选的，所述透皮肽的氨基酸序列为ACSSSPSKHCG。
[0010]进一步的，所述皮肤修复肽的氨基酸序列为ACSSSPSKHCGGLYYF。
[0011]第二方面，本专利技术提供了一种所述大鲵水解胶原肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：取新鲜养殖大鲵肌肉部位组织，研磨成匀浆加入胰蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶和胃蛋白酶酶解；离心取上清。采用液相色谱仪分离纯化，收集洗脱液，即得。
[0012]作为本专利技术所述的制备方法的优选实施方式，所述酶解为采用胰蛋白酶80U～120U、中性蛋白酶80U～120U、碱性蛋白酶80U～120U、胃蛋白酶80U～120U酶解4～6小时。
[0013]作为本专利技术所述的制备方法的优选实施方式，所述液相色谱仪分离纯化中采用的色谱填料为UniSil 10
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120C18，检测波长为220nm，流速为0.5ml/min，流动相A为乙腈和0.05％三氟乙酸，流动相B为纯化水和0.05％三氟乙酸。
[0014]第三方面，本专利技术将所述的皮肤修复肽在用于皮肤修复的化妆品或药品中应用。
[0015]第四方面，本专利技术提供了一种含所述的皮肤修复肽的化妆品或药品。
[0016]与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：
[0017]本专利技术的皮肤修复肽能够促进成纤维细胞增殖，促进成纤维细胞划痕修复活性，促进胶原蛋白合成，促进弹性蛋白合成。可用于皮肤损伤修复的改善或治疗中。本专利技术的皮肤修复肽含有透皮短肽可促进透皮吸收，微量高效，安全性有保证。适用于在皮肤修复的化妆品或药品中应用，以实现皮肤损伤修复的改善或治疗的目的。
附图说明
[0018]图1为不同组分细胞划痕试验的迁移率统计图；
[0019]图2为CCK
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8检测合成多肽的细胞毒性统计图；
[0020]图3为体外透皮测试合成多肽的含量统计图；
[0021]图4为细胞划痕实验测试合成多肽的划痕修复能力电镜图；
[0022]图5为合成多肽对中CollagenⅠ、CollagenⅢ、Elastic、MMP
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9基因表达量的影响统计图。
具体实施方式
[0023]为更好地说明本专利技术的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本专利技术作进一步说明。本领域技术人员应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。
[0024]术语“肽”是指通过肽键将氨基酸残基彼此结合形成的线性分子。可以通过本领域已知的化学合成方法，特别是固相合成技术合成肽或液相合成技术合成肽。
[0025]实施例中所用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0026]实施例1：大鲵多肽的分离和鉴定
[0027](1)分离
[0028]取新鲜养殖大鲵，取肌肉部位组织，研磨成匀浆，取10g匀浆，加入胰蛋白酶100U、中性蛋白酶100U、碱性蛋白酶100U、胃蛋白酶100U酶解5小时。12000rpm离心30min，取上清。采用Unique AutoPrep高压制备液相色谱仪进行分离纯化，色谱填料UniSil 10
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120C18，检测波长220nm，流速0.5ml/min，流动相A乙腈(0.05％三氟乙酸)，流动相B纯化水(0.05％三氟乙酸)，采用梯度洗脱。(0％～100％A)洗脱20min，柱温25℃，自动进样，进样量100mL，根据不同峰收集洗脱液。分别标记为P1、P2、P3、P4。采用超微量分光光度计，检测波长280nm，对不同组分进行定量分析，其中P1 1.51μg/μL、P2 1.75μg/μL、P3 3.25μg/μL、P4 2.57μg/μL。
[0029]不同组分细胞划痕试验筛选。通过人皮肤成纤维细胞划痕试验检对不同组分P1、P2、P3、P4进行功效筛选。将人皮肤成纤维细胞以2
×
105个/mL的细胞密度接种于6孔板中，在培养箱中培养24h；用枪头笔直地划一条横线，用PBS洗细胞3次，去掉划下的细胞，加入无血清培养基；分别设立空白对照组和试验组，将不同组分P1、P2、P3、P4稀释至0.1μg/μL，放入37℃，5％ CO2培养箱，培养24h时间点观察拍照。结果如图1所示，组分P4与其他试验组相
比，具有较好的划痕修复能力。
[0030](2)鉴定
[0031]组分P4的多肽序列鉴定方法如下：
[0032]基于Edman降解法的多肽N
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端测序分析：采用氨基酸自动测序仪PPSQ33A对组分P4进行分析，具体步骤如下：置换buffer，取50μL样品至超滤管中，加入8mol/L Urea溶液200μL，于4℃在12000rcf速度下离心10min，并重复操作一次。加入100μL ddH2O，于4℃在12000rcf速度下离心10min，并重复操作一次。上机检测，将置换后的样品溶液滴在膜上，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种皮肤修复肽，其特征在于，包括大鲵水解胶原肽和/或透皮肽。2.根据权利要求1所述的皮肤修复肽，其特征在于，所述大鲵水解胶原肽的氨基酸序列为GLYYF。3.根据权利要求1所述的皮肤修复肽，其特征在于，所述透皮肽的氨基酸序列为ACSSSPSKHCG、CYGRKKRRQRRRC、RGDFK、LCLR、RPARPAR、VVVR、CTWLKY、TWLKYH中的任一种。4.根据权利要求3所述的皮肤修复肽，其特征在于，所述透皮肽的氨基酸序列为ACSSSPSKHCG。5.根据权利要求4所述的皮肤修复肽，其特征在于，所述皮肤修复肽的氨基酸序列为ACSSSPSKHCGGLYYF。6.一种权利要求1所述大鲵水解胶原肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：取新鲜养殖大鲵肌肉部位组织，研磨成匀浆加入胰蛋白酶、中性蛋白...

【专利技术属性】
技术研发人员：周晗，颜福霞，杨蒙蒙，卢宏伟，邹衡芳，陈玉蓉，
申请(专利权)人：广州远想医学生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：