一株高产有机硒的高活性嗜酸乳杆菌制造技术

本发明专利技术公开了一株高产有机硒的高活性嗜酸乳杆菌，属于微生物技术领域。本发明专利技术筛选得到的嗜酸乳杆菌CCFM1304具有高活性，并且能够将无机硒高效富集，转化为有机硒，被机体更好的吸收利用，具体体现在：(1)嗜酸乳杆菌CCFM1304可将无机硒高效富集，转化为有机硒，有机硒含量为95.3％，有机硒中硒代半胱氨酸的含量高达67.8％；(2)嗜酸乳杆菌CCFM1304具有高活性，冻干后菌粉活菌数可达到6.5

【技术实现步骤摘要】
一株高产有机硒的高活性嗜酸乳杆菌


[0001]本专利技术涉及一株高产有机硒的高活性嗜酸乳杆菌，属于微生物


技术介绍

[0002]嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)属乳杆菌科中的乳杆菌属，其在人体整个胃肠道中，“从上而下”调节微生态环境。“下”是指在大肠中，它们也可以释放有益双歧杆菌等其他益生菌生长的物质，增加肠道内益生菌的数量、增强它们的生命力。基于嗜酸乳杆菌对人体具有很好的营养保健作用，越来越多的企业以嗜酸乳杆菌冻干粉为食品添加剂制备生物制品和健康食品，那么单位产品活菌数就直接影响产品的功效。因此，在冻干粉生产制备过程中其高活菌数就尤为重要。
[0003]硒(Se)自然界主要以三种形态存在，包括单质硒、无机硒和有机硒(生物硒)。硒作为人类和动物生存所必需的微量元素，在人体内通常以硒蛋白的形态存在。有关研究发现，人体内至少有30余种含硒蛋白或亚单位，最早发现的红细胞谷胱甘肽过氧化物酶，硒是其中的必需组分，该酶以硒代半胱氨酸为活性中心，催化还原型谷胱甘肽、氧化型谷胱甘肽，还原机体内有害的过氧化物，从而保护生物膜免受过氧化物引起的氧化损伤。
[0004]硒对机体发挥有益的生理功能不仅与其含量有关，更与其存在形态相关。相对于无机硒而言，有机硒由无机硒与氨基酸、蛋白质、活性多糖等有机营养成分相结合形成的一类物质，主要包括硒代半胱氨酸、硒甲基硒代半胱氨酸、硒代蛋氨酸三种，生物活性强，毒性低，利于人体吸收。而无机硒主要为亚硒酸钠，其吸收利用率低且有很大的毒性，国外多用于饲料。因此，摄取有机硒是目前主要的补硒形式。目前，主要是利用微生物的生物转化功能将无机硒与氨基酸、蛋白质、活性多糖等有机营养成分相结合以生产得到有机硒，但是，由于现有微生物转化无机硒生产有机硒的转化效率过低，利用此方法生产有机硒的产量一直不高，这无疑阻碍了有机硒市场的进一步发展。

技术实现思路

[0005]本专利技术提供一株可高效转化无机硒生产有机硒，如硒代半胱氨酸、硒甲基硒代半胱氨酸、硒代蛋氨酸3种形态的嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)，且该乳杆菌具有高活性。
[0006]本专利技术通过在培养过程中添加无机硒，最终筛选出一株富硒量高且有机化程度高的嗜酸乳杆菌CCFM1304，其干菌粉硒含量能够达到453.12mg/kg，且有机硒转化率可达到95.3％，其中有机硒中硒代半胱氨酸的含量达到67.8％。
[0007]本专利技术提供了一株嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)CCFM1304，所述嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)CCFM1304已于2023年02月13日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No：63165，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。
[0008]所述嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)CCFM1304是从来源于新疆维吾尔
自治区塔城地区沙湾县幼儿的粪便样本中分离得到的，将分离得到的菌株进行PCR扩增16S rDNA，PCR产物送至上海美吉生物医药科技有限公司进行测序，将测序得到的结果(SEQ ID NO.1所示)在NCBI中进行核酸序列比对，最终得到1株嗜酸乳杆菌，命名为嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)CCFM1304。
[0009]本专利技术提供嗜酸乳杆菌CCFM1304通过本专利技术提供的培养方法培养后具有以下特征：
[0010](1)该菌株在MRS固体培养基上培养48h后呈较小，微微隆起、白色、不透明菌落；
[0011](2)该菌株在MRS液体培养基上培养3代及以上后OD
600
值能够达到2.6；
[0012](3)该菌株在MRS培养基中培养冻干后的活菌数可达到3.5
×
10
11
CFU/g；
[0013](4)该菌株在优化培养基中培养冻干后的活菌数可达到6.5
×
10
11
CFU/g；
[0014](5)该菌株可将无机硒富集，转化为有机硒，能够被机体更好的吸收利用。
[0015](6)该菌株经过富硒发酵后，富硒嗜酸乳杆菌中总硒含量达到453.12mg/kg，有机硒含量为95.3％，有机硒中硒代半胱氨酸的含量高达67.8％。
[0016]在本专利技术的一种实施方案中，所述MRS培养基含有蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、牛肉浸膏10g/L、葡萄糖20g/L、无水乙酸钠2g/L、柠檬酸氢二胺2g/L、K2HPO4·
3H2O 2.6g/L、MgSO4·
7H2O 0.1g/L、MnSO4·
H2O 0.05g/L、吐温80 1g/L。
[0017]在本专利技术的一种实施方案中，所述优化培养基组含有安琪酵母浸粉FM803 20g/L、大豆蛋白陈FP410 10g/L、葡萄糖40g/L、无水乙酸钠2g/L、柠檬酸氢二胺2g/L、K2HPO4
·
3H2O2.6g/L、MgSO4
·
7H2O 0.1g/L、MnSO4
·
H2O 0.05g/L、吐温80 1g/L。
[0018]在专利技术的一种实施方式中，所述嗜酸乳杆菌CCFM1304菌泥经过真空冷冻干燥处理，所述干燥包括但不限于：真空冷冻干燥、喷雾干燥、真空干燥或流化床干燥。
[0019]在专利技术的一种实施方式中，所述嗜酸乳杆菌CCFM1304菌泥冻干时使用的保护剂组成为低聚异麦芽糖、胶原蛋白、硫酸镁、谷胱甘肽和硫酸锰。
[0020]本专利技术还提供了一种微生物菌剂，所述微生物菌剂中含有所述的嗜酸乳杆菌CCFM13043或其发酵液，或含有所述的嗜酸乳杆菌CCFM1304冻干粉；或含有经富硒培养后的嗜酸乳杆菌CCFM1304，或含有经富硒培养后的嗜酸乳杆菌CCFM1304的细胞裂解物；所述富硒培养为：将嗜酸乳杆菌CCFM1304接种至含有无机硒的培养基中进行发酵培养。
[0021]在本专利技术的一种实施方式中，所述微生物菌剂中，每g或每mL益生菌制剂中含有≥1
×
109CFU所述嗜酸乳杆菌CCFM1304。
[0022]本专利技术还提供了一种产品，所述产品中含有所述的嗜酸乳杆菌CCFM1304或所述的微生物菌剂，或含有经富硒培养后的嗜酸乳杆菌CCFM1304；所述富硒培养为：将嗜酸乳杆菌CCFM1304接种至含有无机硒的培养基中进行发酵培养。
[0023]在本专利技术的一种实施方式中，所述产品为食品、药品或保健品。
[0024]在本专利技术的一种实施方式中，所述产品中，嗜酸乳杆菌CCFM1304的添加量不低于1
×
109CFU/g或1
×
109CFU/mL。
[0025]在本专利技术的一种实施方式中，所述食品包含使用嗜酸乳杆菌的发酵剂生产得到的乳制品、豆制本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)CCFM1304，已于2023年02月13日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No：63165。2.一种微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂中含有权利要求1所述的嗜酸乳杆菌CCFM13043或其发酵液，或含有权利要求1所述的嗜酸乳杆菌CCFM1304冻干粉；或含有经富硒培养后的嗜酸乳杆菌CCFM1304，或含有经富硒培养后的嗜酸乳杆菌CCFM1304的细胞裂解物；所述富硒培养为：将嗜酸乳杆菌CCFM1304接种至含有无机硒的培养基中进行发酵培养。3.根据权利要求2所述的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂中，每g或每mL益生菌制剂中含有≥1
×
109CFU的嗜酸乳杆菌CCFM1304。4.一种产品，其特征在于，所述产品中含有权利要求1所述的嗜酸乳杆菌CCFM1304或权利要求2或3所述的微生物菌剂，或含有经富硒培养后的嗜酸乳杆菌CCFM1304；所述富硒培养为：将嗜酸乳杆菌CCFM1304接种至含有无机硒的培养基中进行发酵培养。5.根据权利要求4所述的产品，其特征在于，所述产品为食品、药品或保健品。6.根据权利要求5所述的产品，其特征在于，所述产品中，嗜酸乳杆菌CCFM1304的添加量不低于1
×
109CFU/g或1
×
109CFU/mL。7.权利要求1所述的嗜酸乳杆菌C...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔树茂，仲雨晴，唐鑫，毛丙永，张秋香，赵建新，陈卫，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：