一种麝香通心滴丸入血成分的定性检测方法技术

本发明专利技术提供一种麝香通心滴丸入血成分的定性检测方法，具体采用超高效液相色谱

【技术实现步骤摘要】
一种麝香通心滴丸入血成分的定性检测方法


[0001]本技术方案属于复方中药成分检测领域，具体涉及麝香通心滴丸入血成分的定性检测。

技术介绍

[0002]麝香通心滴丸由人工麝香、人参茎叶总皂苷、蟾酥、丹参、熊胆粉、人工牛黄和冰片7味药材组成，具有芳香开窍、益气温阳、理气止痛之效，用于冠心病稳定型劳累性心绞痛，中医辨证气虚血瘀证，症见胸痛胸闷，心悸气短，神倦乏力。其中人工麝香和蟾酥芳香通脉、缓急止痛，为君药；人参茎叶总皂苷和丹参补益心气、活血化瘀，为臣药；人工牛黄和熊胆粉清脉凉开、化痰逐淤，为佐药；冰片开窍醒神，与麝香相须为用，引诸药入心络。
[0003]“血清药物化学”这一理论最先由德国科学家格哈德
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多马克提出，后由我国科学家王喜军教授提出符合中医药理论的中药血清药物化学。中药化学成分极其复杂，口服后部分成分经肠道和肝脏代谢酶代谢后吸收入血进而发挥效应。
[0004]入血成分与药材成分、药物成分不同。《基于HPLC
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Q
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TOF
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MS技术分析红景天颗粒的化学成分及大鼠口服后的入血成分》(上海中医药大学学报，2021,35(01):61
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73)公开了红景天颗粒中共鉴定出49个化学成分，包括黄酮类、苷类、酚酸类、鞣质类、原花青素类以及其他类成分。大鼠口服红景天颗粒后，血浆样本共鉴定出26个入血成分，包括4个原型成分和22个代谢产物。代谢产物发生Ⅰ相代谢主要为脱糖基化、脱氢和羟基化反应，Ⅱ相代谢主要为葡萄糖醛酸化和硫酸化反应。由此可见，药物原型入血后会经不同代谢途径进行生物转化，由此获得不同结构的入血成分。用于药物成分原型的检测方法不一定适用于入血成分的检测。
[0005]麝香通心滴丸的入血成分定性检测已有报道。《基于血清药物化学与网络药理学探究麝香通心滴丸治疗冠心病的机制》(中成药，2020,42(10):2768
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2777)公开了血清样本在甲醇提取，浓缩后经HPLC
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Q
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TOF/MS联用检测。其中，Hydro
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RP C18色谱柱(250mm
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4.6mm,4μm)；流动相0.4％甲酸乙腈
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0.2％甲酸，梯度洗脱；离子源ESI，扫描方式ESI+/ESI
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模式；干燥气体温度320℃，体积流量10L/min，鞘气温度350℃，体积流量12L/min，碎裂能量175V；毛细管电压3kV；正负离子采集范围m/z 50～1500。该技术方案能定性检测沙蟾毒精，牛黄胆酸，远华蟾毒精，甘氨胆酸，去乙酰华蟾毒精，蟾毒灵，熊去氧胆酸和脂蟾毒配基。该技术方案只能同时检测蟾酥、人工牛黄和熊胆粉的成分，同步检测成分数量较少。
[0006]CN114858959A“一种大鼠血浆中麝香通心滴丸蟾蜍二烯内酯成分的检测方法及其用途”(申请日：2021.01.20；公开日：2022.08.05)公开了采用超高效液相色谱
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串联质谱(UPLC
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MS/MS)对大鼠血浆中沙蟾毒精、远华蟾毒精、去乙酰华蟾毒精、蟾毒灵和脂蟾毒配基进行定性和定量检测的方法。其中，血浆采用甲醇提取后进行UPLC检测，色谱柱：AcquityBEH C18(100mm
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2.1mm,1.7μm)；流动相A为1～3mmol/L乙酸铵溶液，流动相B为乙腈，经梯度洗脱，可在13min内完成检测。该技术方案只能检测蟾酥类成分，同步检测数量少。
[0007]此外，单味药材和组方类似中药复方的入血成分检测也有相关报道。
[0008]CN107843671A“一种高通量液相色谱串联质谱的高通量液相色谱串联质谱的检测方法”(申请日：2017.12.21；公开日：2018.03.27)公开了UPLC
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MS/MS检测人血清中15种胆汁酸的技术方案。其中UPLC色谱采用C18色谱柱，流动相A为0.1％甲酸水溶液，流动相B为0.1％甲酸
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乙腈：甲醇(3：1)溶液。质谱检测条件如下：电喷雾针电压3.0kV，去溶剂气流速800L/h，去溶剂气温度400℃，锥孔气流速50L/h，检测为负离子模式，多重反应监控。该技术方案能同步检测15种胆汁酸，即胆酸，石胆酸，脱氧胆酸，熊脱氧胆酸，鹅脱氧胆酸，牛磺胆酸，甘氨胆酸，牛磺石胆酸，甘氨石胆酸，牛磺脱氧胆酸，牛磺熊脱氧胆酸，牛磺鹅脱氧胆酸，甘氨脱氧胆酸，甘氨鹅脱氧胆酸和甘氨熊脱氧胆酸。
[0009]CN102486472A“一种测定血清中药物活性成分的方法”(申请日：2009.04.20；公开日：2015.11.25)公开了麝香保心丸的入血成分检测。其中，麝香保心丸由麝香、人参提取物、人工牛黄、肉桂、苏合香、蟾酥、冰片组成，用于气滞血瘀所致的胸痹，症见心前区疼痛、固定不移；心肌缺血所致的心绞痛、心肌梗死见上述证候者。该技术方案采用HPLC
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ELSD对麝香保心丸入血成分进行一测多评，可同步检测日本蟾蜍它灵(又名，日蟾毒它灵)，人参皂苷Re，1β
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羟基蟾毒灵，人参皂苷Rb1，人参皂苷Ra1，脂蟾毒精醇，人参皂苷Rc，人参皂苷Rb2，人参皂苷Rb3，人参皂苷Rd，蟾毒灵，胆酸，猪去氧胆酸，华蟾酥毒基，鹅去氧胆酸和去氧胆酸。但麝香保心丸的药味组成与麝香通心滴丸不同，其中麝香保心丸中未包含熊胆粉与丹参。
[0010]复方中药入血成分相比单味药材入血成分更复杂，组方不同对应的入血成分存在较大区别。一方面，药材配伍过程中存在药味、适应症等的变化，由此产生药效成分的变化；另一方面，药材本身成分入血后经酶催化、生物转化成不同衍生物。此外，对单味药材的药效成分研究脱离了中医整体协同作用的理论，不利于复方中药药效的整体评价。
[0011]因此，现有技术中定性检测麝香通心滴丸入血成分的数量较少，不能充分反映药物入血及起效的情况。

技术实现思路

[0012]为解决现有技术存在的问题，本专利技术专利提供一种麝香通心滴丸入血成分的定性检测方法，该方法采用超高效液相色谱
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串联质谱同步检测麝香通心滴丸中蟾酥、丹参、人参茎叶总皂苷、人工牛黄及熊胆粉入血成分43种，为进一步研究药物代谢周期及代谢途径提供基础。
[0013]本专利技术采用的技术方案如下：
[0014]一种麝香通心滴丸入血成分的定性检测方法，所述检测方法包括超高效液相色谱
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串联质谱分析，其中液相色谱条件中采用碳十八填料色谱柱，流动相A为0.05％～0.2％甲酸水，流动相B为0.05％～0.2％甲酸乙腈，梯度洗脱程序如下：
[0015]时间(min)B(％)04～729～122690～98274～8
[0016]流速为0.2～0.4mL/min，柱温为35～45℃。
[0017]进一步的，质谱分析条件包括：电喷雾离子源，负离子扫描，源电压为
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种麝香通心滴丸入血成分的定性检测方法，其特征在于，所述检测方法包括超高效液相色谱
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串联质谱分析，其中液相色谱条件中采用碳十八填料色谱柱，流动相A为0.05％～0.2％甲酸水，流动相B为0.05％～0.2％甲酸乙腈，梯度洗脱程序如下：时间(min)B(％)04～729～122690～98274～8流速为0.2～0.4mL/min，柱温为35～45℃；所述质谱分析条件包括：电喷雾离子源，负离子扫描，源电压为
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4.5kV；正离子扫描，源电压为5.5kV；离子源温度为550～600℃，雾化气压力为50psi，辅助气压力为45～55psi，帘气压力为30～40psi，去簇电位80～120V，碰撞能量10～60V，质量范围m/z 50～1500Da。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述质谱分析条件包括：帘气为N2，正离子扫描时，离子源温度为600℃；负离子扫描时，离子源温度为550℃；辅助气压力为50psi，帘气压力为35psi，去簇电位为100V。3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述流动相A为0.1％甲酸水，流动相B为0.1％甲酸乙腈，梯度洗脱程序如下：0min，5％B；2min，10％B；26min，95％B；27min，5％B；流速为0.3mL/min，柱温为40℃。4.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：姚建标，蒋惠娣，江超，闵会，海燕，徐斌，吴旦，
申请(专利权)人：内蒙古康恩贝药业有限公司，
类型：发明
国别省市：