一种高浓度高稳定性的抗体制剂及其制备方法技术

本发明专利技术提供一种高浓度高稳定性的抗体制剂及其制备方法，属于抗体制剂领域，所述的抗体制剂中包括一种抗C5抗体，轻链序列为SEQ ID NO.1，重链序列为SEQ ID NO.2或其长效改造序列；还包括缓冲体系：20

【技术实现步骤摘要】
一种高浓度高稳定性的抗体制剂及其制备方法


[0001]本专利技术属于抗体制剂领域，具体涉及一种高浓度高稳定性的抗体制剂及其制备方法。

技术介绍

[0002]随着生物抗体药治疗的发展，对于静脉内或者皮下高浓度给药需要对有效成分进行高度浓缩（约20mg/mL至约100
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150mg/mL，甚至200mg/mL或更高）。在对单次给药量较大的慢性疾病，如PNH（阵发性睡眠性血红蛋白尿症，表现为慢性血管内溶血）的治疗领域，为了实现病人的自主用药，提升病人用药的便捷性和治疗依从性，需要开发给药体积小而浓度高的抗体制剂。然而，抗体药物在高浓度浓缩过程中，会产生如粘度增大、蛋白聚集及电荷异质性改变的问题，会引起活性抗体活性下降、免疫原性增强等风险。因此，需要改进抗体药物的制剂以增加抗体的溶解度，降低粘度，并解决蛋白聚集、电荷异质性改变的问题。
[0003]对于抗体药物制剂的改进主要包括以下几个方面：I.制剂中的抗体；II.钙和乙酸盐或者缓冲液：通过向所述制剂中加入钙盐和/或乙酸盐（和/或缓冲液）降低抗体制剂的粘度：测定方法在加入钙盐和/或乙酸盐（和/或缓冲液）之前和之后测定所述蛋白制剂的粘度；III.制剂中的赋形剂：赋型剂能够赋予或增强蛋白制剂的稳定性，以及一定程度上影响药物的功效和免疫源性，因此需要开发具有稳定性、安全性的赋型剂的蛋白制剂。赋形剂可以是缓冲剂、稳定剂或表面活性剂等。
[0004]EA5单抗是一种特异性靶向补体C5的人源化单克隆抗体。补体C5在酶切后可转化为C5a和C5b，其中C5a为重要的促炎分子，C5b可继续形成C5b
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9，即导致细胞打孔或裂解的攻膜复合物（MAC）。攻膜复合物在 PNH患者红细胞表面沉积可引起红细胞裂解，即PNH的主要临床表现。EA5单抗可阻断C5裂解，防止C5a和C5b
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9的形成，因此可用于有效治疗PNH。另外对于aHUS、gMG等由补体末端激活引起的疾病同样有较好的治疗效果。
[0005]PNH（阵发性睡眠性血红蛋白尿症）是一种罕见且危及生命的造血干细胞克隆性疾病，患病率约为百万分之十三，临床主要表现为溶血性贫血、血红蛋白尿症、静脉血栓形成、骨髓造血功能衰竭以及平滑肌功能障碍等。补体系统攻击红细胞造成的血管内溶血是PNH发病和死亡的核心因素。CD59为红细胞表面最重要的补体攻膜复合物（MAC）抑制因子，PNH患者由于位于X染色体(Xp22.1)的磷脂酰肌醇聚糖（PIG
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A）基因发生获得性体细胞突变，导致CD59因糖基磷脂酰肌醇（GPI）合成缺陷不能结合到红细胞的细胞膜上，最终导致抑制补体通路活化的功能丧失。PNH的主要治疗手段包括补体抑制剂、糖皮质激素和异基因造血干细胞移植等，其中补体C5抑制剂Soliris（Eculizumab）或Ultomiris（Ravulizumab）为PNH的标准治疗，可有效控制血管内溶血，较少血栓形成，并提高长期生存率，但上述药品价格昂贵且需要静脉注射，患者需定期入院输注，对生活带来较大不便。因此，开发安全有效的皮
下注射补体C5抑制剂用于PNH病人的治疗意义重大。
[0006]PNH为典型的补体激活引起的疾病，EA5抗体对其他由补体激活引起的疾病同样具有较大的治疗潜力，如类风湿性关节炎、抗磷脂抗体综合征、狼疮性肾炎、缺血再灌注损伤、非典型溶血性尿毒症综合征(aHUS)、典型溶血性尿毒症综合征、阵发性夜间血红蛋白尿(PNH)、致密物沉积病、视神经脊髓炎、多灶性运动神经病、多发性硬化、黄斑变性、HELLP综合征、自发性流产、血栓性血小板减少性紫癜、寡免疫性血管炎、大疱性表皮松解症、复发性流产、创伤性脑损伤、心肌炎、脑血管病症、周围血管病症、肾血管病症、肠系膜/肠血管病症、血管炎、过敏性紫癜性肾炎、全身性红斑狼疮相关血管炎、类风湿性关节炎相关血管炎、免疫复合血管炎、高安氏病、扩张型心肌病、糖尿病血管病变、川崎病、静脉空气栓塞，支架置入、冠状动脉旋磨术、经皮腔内冠状动脉成形术后再狭窄，重症肌无力、冷凝集素病、皮肌炎、阵发性寒冷性血红蛋白尿、抗磷脂综合征、格雷夫斯病、动脉粥样硬化、阿尔茨海默氏病、全身性炎性反应败血症、败血性休克、脊髓损伤、肾小球肾炎、移植排斥、桥本甲状腺炎、I型糖尿病、银屑病、天疱疮、自身免疫性溶血性贫血、特发性血小板减少性紫癜、古德帕斯彻综合征、迪戈斯病和灾难性抗磷脂综合征。

技术实现思路

[0007]为了解决上述问题，本专利技术提供了一种抗C5抗体和其制剂，优化了抗体的分子设计以及制剂的缓冲体系，目的在于提高该抗体制剂的整体稳定性。
[0008]本专利技术中，“PS80”指聚山梨酯
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80，又称吐温
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80。
[0009]本专利技术中，“组氨酸
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盐酸组氨酸”指组氨酸钠+盐酸组氨酸缓冲液。
[0010]一方面，本专利技术提供了一种抗C5抗体。
[0011]所述的抗C5抗体为改造抗体，轻链序列为SEQ ID NO.1，重链序列为SEQ ID NO.2或其长效改造序列。该抗体分子通过工程化Fc区域，提高抗体的溶解度和稳定性；提高抗体等电点，以避免抗体在下游工艺中的损失；同时提高抗体与FcRn的亲和力，以实现更长的体内半衰期。
[0012]优选地，所述的重链序列的长效改造序列为SEQ ID NO.3。
[0013]另一方面，本专利技术提供了包含前述抗C5抗体的抗体制剂。
[0014]所述的抗C5抗体含量为0
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200mg/L，优选为160
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200mg/mL，进一步优选为180mg/mL。
[0015]所述的抗体制剂中还包括缓冲体系。
[0016]所述的缓冲体系中包括：20
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50mM组氨酸
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盐酸组氨酸、70
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110mM精氨酸、25
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50mM氯化钠和0.03% PS80。
[0017]所述的组氨酸
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盐酸组氨酸的含量可以选自：20
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30mM、30
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40mM、40
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50mM、25
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35mM、25
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45mM。
[0018]所述的精氨酸的含量可以选自：70
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80mM、80
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90mM、90
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100mM、100
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110mM、70
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90mM、80
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100mM、90
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110mM、100
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110mM。
[0019]所述的氯化钠的含量可以选自：25
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30mM、25
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35mM、30
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50mM、40
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50mM、35
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40mM、25
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45mM、30...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗体制剂，其特征在于，由抗C5抗体和缓冲体系组成；所述的抗C5抗体轻链序列为SEQ ID NO.1，重链序列为SEQ ID NO.3；缓冲体系由20
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50mM组氨酸
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盐酸组氨酸、70
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110mM精氨酸、25
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50mM氯化钠和0.03% PS80组成；所述的抗C5抗体含量为160
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200mg/mL。2.根据权利要求1所述的抗体制剂，其特征在于，缓冲体系由20mM组氨酸
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盐酸组氨酸、70
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110mM精氨酸、25
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50mM氯化钠和0.03% PS80组成。3.根据权利要求2所述的抗体制剂，其特征在于，缓冲体系由20mM组氨酸
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盐酸组氨酸、80mM精氨酸、25
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50mM氯化钠和0.03% PS80组成。4.根据权利要求3所述的抗体制剂，其特征在于，缓冲体系由20mM组氨酸
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盐酸组氨酸、80mM精氨酸、50mM氯化钠和0.03% PS80组成。5.根据权利要求4所述的抗体制剂，其特征在于，缓冲体系pH为6.0
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6.5。6.根据权利要求5所述的抗体制剂，其特征在于，缓冲体系pH为6...

【专利技术属性】
技术研发人员：庄超，黄峥，高煜，
申请(专利权)人：上海览屹医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：