PGAM2变位酶及其在心肌细胞中的应用制造技术

本发明专利技术属于生物医药技术领域，涉及PGAM2变位酶及其在心肌细胞中的应用，PGAM2核酸序列为核苷酸序列表中的SEQ ID No.1。本发明专利技术还探究了Ang II诱导的心肌细胞肥大的关键分子和信号通路，对于阐明心肌细胞肥大发生的内在机制意义重大。本发明专利技术提出了PGAM2在心肌细胞中的新功能，并且以PGAM2为研究对象，合成PGAM2的干扰小片段siRNA，转染心肌细胞，发现敲低PGAM2能够显著抑制心肌细胞肥大。基于PGAM2在心肌肥厚中的重要功能，其抑制剂或者siRNA将为临床预防或治疗心肌肥厚相关疾病提供新靶标。供新靶标。供新靶标。

【技术实现步骤摘要】
PGAM2变位酶及其在心肌细胞中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，特别涉及一种PGAM2变位酶及其在心肌细胞中的应用。

技术介绍

[0002]心力衰竭（heart failure，HF），简称心衰，是指各种原因导致心脏泵血功能受损，心排血量不能满足全身组织基本代谢需要的综合征，主要表现为呼吸困难、活动受限、体液潴留等。目前，临床对于心衰的治疗仍缺乏有效策略。心衰是一种进展性的疾病，重在预防，将心衰防控的关口前移，将为临床心衰的预防和治疗提供重要思路。心肌肥厚是心衰发生的病理基础,是一种产生较缓慢但较有效的代偿功能，主要发生在长期压力负荷过重的情况下，心肌总量增加，收缩力加强，使心脏得以维持正常的血循环，同时有相当的储备力。但这种代偿功能也有其不利之处，主要因为肥大的心肌需氧增加，而冠状动脉的供血量往往不能予以满足，造成心肌缺血，这将最后导致心肌收缩力的减退。心肌肥厚的发病机理极为复杂，具体机制仍不明确。目前发现关键基因治疗具有重要意义，如利用AAV9将特定功能性基因递送到心肌细胞中发挥抗心肌肥大的功效。因此发现调控心肌肥厚的特异分子及信号通路，对于阐明心肌肥厚发生发展的内在机制，寻找防控心衰的新靶点具有十分重要的理论和临床意义。
[0003]磷酸甘油酸变位酶肌肉特异性的亚基M型（PGAM2）是糖酵解途径的重要酶类，催化3
‑
磷酸甘油酸（3
‑
PG）转化为2
‑
磷酸甘油酸（2
‑
PG）的可逆反应。最近研究发现，PGAM2可在氧化应激条件下被激活，参与调控肿瘤细胞增殖，说明PGAM2不仅具有催化功能，还具有重要的调控功能，PGAM2主要在骨骼肌和心肌中表达。最近研究发现过表达PGAM2的小鼠中的糖酵解和三羧酸循环改变，从而更早的诱导心肌收缩功能受损，心脏对于压力负荷的耐受力下降。但PGAM2是否参与心肌细胞肥大的调控尚不清楚。
[0004]热休克蛋白（HSPs）是普遍存在并高度保守的蛋白，能够被多种病理和环境刺激所诱导。HSP90是心肌细胞中含量最高的蛋白之一。HSP90在多种心肌肥厚模型和心衰患者中的表达增加，HSP90的抑制剂17
‑
AAG能够抑制心肌肥厚相关的纤维化，提示抑制HSP90在改善心肌肥厚中起到重要作用。目前，PGAM2是否通过调控HSP90的表达，来干预心肌肥厚，未见报道。

技术实现思路

[0005]为了研究调控心肌肥厚的作用靶点及特异分子，阐明心肌肥厚发生发展的内在机制，本专利技术提出PGAM2变位酶及其在心肌细胞中的应用。
[0006]本专利技术是通过如下技术方案实现的：第一方面，本专利技术提供了一种PGAM2变位酶， PGAM2变位酶核酸序列为核苷酸序列表中的SEQ ID No.1。
[0007]第二方面，本专利技术提供了PGAM2变位酶在心肌细胞中的应用。
[0008]此外，本专利技术运用IP、质谱分析，WB实验，qRT
‑
PCR以及后期实验进一步的分析证实，敲低PGAM2的表达能够显著改善血管紧张素II（Ang II）诱导的心肌肥厚。更具体的说，敲低PGAM2显著抑制血管紧张素 II诱导的心肌细胞肥大标志蛋白ANP、BNP以及β
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MHC的表达。其中所用的引物如下：Hsp90AA1
‑
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CCAAGGACCAGGTTGCTAACTCA
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Hsp90AA1
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。
[0009]第三方面，本专利技术的另一目的在于提供抑制PGAM2的小干扰RNA片段siRNA，靶向PGAM2的siRNA序列如下：S1 靶序列：CCAGGGAAAGGCAAAGTGAS2 靶序列：CCATCATGGAACTGAATCT。
[0010]与现有技术相比，本专利技术的优点和积极效果在于：（1）本专利技术探究了Ang II诱导的心肌细胞肥大的关键分子和信号通路，对于阐明心肌细胞肥大发生的内在机制意义重大。本专利技术提出了PGAM2在心肌细胞中的新功能，并且以PGAM2为研究对象，合成PGAM2的干扰小片段siRNA，转染心肌细胞，发现敲低PGAM2能够显著抑制心肌细胞肥大。
[0011]（2）通过IP结合高分辨质谱，本专利技术找到PGAM2与心肌肥厚的负调控蛋白HSP90互作，并且调控HSP90的蛋白表达水平。本专利技术验证干扰PGAM2后，能够通过抑制HSP90的表达，达到抗心肌细胞肥大的目的。当敲低PGAM2，同时过表达HSP90则能够逆转敲低PGAM2对于心肌肥厚的影响，表明HSP90在心肌细胞中是PGAM2的一个重要功能靶标，PGAM2可通过HSP90来调节心肌细胞的功能。对于研究Ang II诱导的心肌细胞肥大具有很好的应用价值。
[0012]（3）基于PGAM2在心肌肥厚中的重要功能，其抑制剂或者siRNA将为临本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种PGAM2变位酶，其特征在于，所述PGAM2变位酶核酸序列为核苷酸序列表中的SEQ ID No.1。2.权利要求1所述的PGAM2变位酶在心肌细胞中的应用。3.权利要求2所述的应用，其特征在于：应用时采用qRT—PCR检测敲低PGAM2显著抑制Ang II诱导的心肌细胞肥大标志蛋白ANP、BNP以及β
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MHC的表达，其中所用的引物如下：PGAM2
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【专利技术属性】
技术研发人员：苏国海，李莹，李敏，李文静，杜佳敏，
申请(专利权)人：济南市中心医院，
类型：发明
国别省市：