【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微纳加工技术/光学/生物，尤其涉及一种基于微流控系统和微孔的细胞计数方法。
技术介绍
1、细胞计数在生物学和医学研究中具有重要的意义。它通过准确测量给定样本中细胞的数量，为我们提供了关于细胞状态、功能和响应的重要信息。首先，细胞计数在疾病诊断和监测方面起着关键作用。通过细胞计数，可以确定某些疾病的存在和严重程度。例如，白细胞计数可帮助诊断感染或免疫系统疾病。此外，定期监测细胞数量的变化可以评估治疗效果和疾病进展情况。其次，细胞计数对于研究细胞增殖和细胞周期也非常重要。了解细胞增殖速率对于研究肿瘤发展、组织修复和再生等生理过程至关重要。通过细胞计数，我们可以获得关于细胞分裂和生长调控机制的信息，从而深入研究细胞生物学过程。此外，细胞计数在药物筛选和毒性评估中具有广泛应用。通过测试细胞数量的变化，可以评估药物的效力和毒性。这对于药物研发和毒理学研究非常重要，有助于筛选出有效而安全的药物候选物。同时，细胞计数对于细胞培养和细胞研究也是至关重要的。在细胞培养中，了解并控制细胞数量是成功进行实验所必需的。而在细胞研究方面，细胞计数可以用于研究细胞迁移、细胞凋亡、细胞分化等关键生物学过程，为我们深入了解细胞行为和功能提供了重要的线索。因此，细胞计数在临床诊断、疾病监测、生物学研究和药物开发等领域具有广泛的应用价值。准确测量和监测细胞数量能够提供对细胞状态、功能和响应的重要信息，推动科学研究和临床实践的进展。在选择适当的细胞计数方法和正确操作的基础上，细胞计数将继续为我们揭示细胞世界的奥秘。
2、常见的细胞计数方法包
技术实现思路
1、本专利技术的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的一种基于微流控系统和微孔的细胞计数方法。
2、为了实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：
3、一种基于微流控系统和微孔的细胞计数方法，包括以下步骤：
4、s1、镜头收集细胞在微流控芯片中流动的图像信息，被分光镜分光后，一部分由相机接收，显示出观察画面，一部分被光电倍增管接收；
5、s2、而在光电倍增管之前有一小孔，因此仅能接收部分光能；
6、s3、通过微调节器，将微孔的位置调节到正好只能观察到微流控通道的中间位置；
7、s4、细胞流过该位置后，会由于细胞的挡光效应，导致pmt接收的光减少，则会出现一个电位下降；
8、s5、通过记录电位下降的个数，即可以统计有多少个细胞经过该位置，从而达到细胞计数的目的。
9、优选的，所述s3中，为了实现微孔位置的确定，需要通过调节系统进行调节，调节系统包括xyz调节台、载物台、微流控芯片、光源、镜头、分光镜及分光镜安装架、反射镜及反射镜安装架、微孔调节架、第一相机、第二相机及一些支撑件和连接件，微流控芯片设于载物台上，载物台与xyz调节台连接，微孔调节架设于分光镜及分光镜安装架的一侧，反射镜及反射镜安装架设于分光镜及分光镜安装架的另一侧，镜头设于载物台的下方。
10、优选的，所述微孔调节架上设有微孔。
11、优选的，首先放置好微流控芯片，开启光源，开启第一相机和第二相机，观察第一相机，通过xyz调节台，使得连接第一相机的显示器中，显示在需要观察的微流道处。
12、优选的，接着微孔调节架，此时观察第二相机连接的显示器，直到显示的微孔图像调节到微流道中间位置，并在第一相机的显示器中手动标出微孔所在位置，此时，无论怎么移动平移台或者放置新的微流控芯片，手动标记的微孔位置在第一相机的显示器中的位置不会改变。
13、优选的，将第二相机拆除更换为pmt，pmt前端需要增加中性密度滤光片以降低整体光强，因为pmt感光能力很强，仅需要非常微弱的光即可有信号反应，接着即可以开始细胞计数实验：
14、首先，微流控芯片接好鞘流液、细胞液、废液或收集管，将微流控芯片置于载物台芯片槽中，开启光源，开启第一相机，通过调节外部气源压力，调节鞘液和细胞液的流入速度，使得微流控观察区域处形成鞘流，保证细胞始终在流道的中间流动，接着开启pmt，由于细胞的挡光作用，当细胞经过时，pmt接收的信号会有一个明显的降低，通过信号采集和比较算法，统计信号下降个数，即可达到细胞计数的目的。
15、优选的，所述微流控芯片上设有细胞液入口和观察区域。
16、优选的，所述微流控芯片上还设有废液或收集液出口和鞘流入口。
17、本专利技术中，所述一种基于微流控系统和微孔的细胞计数方法的有益效果：
18、本专利技术融合了流式细胞仪的微流控技术和显微成像技术，同时创新性的利用了微孔的挡光效应，通过pmt检测细胞经过微孔时的信号变化，达到细胞计数的目的，具有成本低、通用性和扩展性强等优点，因此在生物细胞分析领域具有重要的意义，计数无需染色细胞，对细胞是一种无伤检测。
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1.一种基于微流控系统和微孔的细胞计数方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种基于微流控系统和微孔的细胞计数方法，其特征在于，所述S3中，为了实现微孔位置的确定，需要通过调节系统进行调节，调节系统包括XYZ调节台(8)、载物台(7)、微流控芯片(6)、光源(1)、镜头(2)、分光镜及分光镜安装架(10)、反射镜及反射镜安装架(9)、微孔调节架(5)、第一相机(3)、第二相机(4)及一些支撑件和连接件，微流控芯片(6)设于载物台(7)上，载物台(7)与XYZ调节台(8)连接，微孔调节架(5)设于分光镜及分光镜安装架(10)的一侧，反射镜及反射镜安装架(9)设于分光镜及分光镜安装架(10)的另一侧，镜头(2)设于载物台(7)的下方。
3.根据权利要求2所述的一种基于微流控系统和微孔的细胞计数方法，其特征在于，所述微孔调节架(5)上设有微孔。
4.根据权利要求3所述的一种基于微流控系统和微孔的细胞计数方法，其特征在于，首先放置好微流控芯片(6)，开启光源(1)，开启第一相机(3)和第二相机(4)，观察第一相机(3)，通过XYZ调
5.根据权利要求4所述的一种基于微流控系统和微孔的细胞计数方法，其特征在于，接着微孔调节架(5)，此时观察第二相机(4)连接的显示器，直到显示的微孔图像调节到微流道中间位置，并在第一相机(3)的显示器中手动标出微孔所在位置，此时，无论怎么移动平移台或者放置新的微流控芯片，微孔在第一相机(3)的显示器中的位置不会改变。
6.根据权利要求5所述的一种基于微流控系统和微孔的细胞计数方法，其特征在于，将第二相机(4)拆除更换为PMT，PMT前端需要增加中性密度滤光片以降低整体光强，因为PMT感光能力很强，仅需要非常微弱的光即可有信号反应，接着即可以开始细胞计数实验：
7.根据权利要求6所述的一种基于微流控系统和微孔的细胞计数方法，其特征在于，所述微流控芯片(6)上设有细胞液入口(11)和观察区域(12)。
8.根据权利要求7所述的一种基于微流控系统和微孔的细胞计数方法，其特征在于，所述微流控芯片(6)上还设有废液或收集液出口(13)和鞘流入口(14)。
...【技术特征摘要】
1.一种基于微流控系统和微孔的细胞计数方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种基于微流控系统和微孔的细胞计数方法，其特征在于，所述s3中，为了实现微孔位置的确定，需要通过调节系统进行调节，调节系统包括xyz调节台(8)、载物台(7)、微流控芯片(6)、光源(1)、镜头(2)、分光镜及分光镜安装架(10)、反射镜及反射镜安装架(9)、微孔调节架(5)、第一相机(3)、第二相机(4)及一些支撑件和连接件，微流控芯片(6)设于载物台(7)上，载物台(7)与xyz调节台(8)连接，微孔调节架(5)设于分光镜及分光镜安装架(10)的一侧，反射镜及反射镜安装架(9)设于分光镜及分光镜安装架(10)的另一侧，镜头(2)设于载物台(7)的下方。
3.根据权利要求2所述的一种基于微流控系统和微孔的细胞计数方法，其特征在于，所述微孔调节架(5)上设有微孔。
4.根据权利要求3所述的一种基于微流控系统和微孔的细胞计数方法，其特征在于，首先放置好微流控芯片(6)，开启光源(1)，开启第一相机(3)和第二相机(4)，观察第一相机(3)，通过...
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